英汉缩略语名词对照 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
前言 | 第12-13页 |
技术路线 | 第13-14页 |
第一部分 肺炎链球菌CcpA蛋白的保守性分析以及与CPS基因座启动子区域相互作用的验证 | 第14-26页 |
1. 实验材料 | 第14-16页 |
1.1 菌株及质粒 | 第14-15页 |
1.2 实验动物 | 第15页 |
1.3 实验试剂 | 第15-16页 |
1.4 主要仪器 | 第16页 |
2. 实验方法 | 第16-20页 |
2.1 ccpA目的基因的PCR扩增 | 第17页 |
2.2 pET-28a(+)-ccpA重组表达质粒的构建 | 第17页 |
2.3 重组CcpA蛋白的诱导表达及纯化 | 第17-18页 |
2.4 多克隆抗体的制备 | 第18页 |
2.5 ELISA法检测抗血清效价 | 第18页 |
2.6 Western印迹分析CcpA蛋白保守性 | 第18-19页 |
2.7 EMSA验证CcpA蛋白与cps启动子序列的结合 | 第19-20页 |
3. 实验结果 | 第20-24页 |
3.1 ccpA基因扩增产物的鉴定 | 第20-21页 |
3.2 pET-28a(+)-ccpA重组质粒的构建 | 第21页 |
3.3 CcpA重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第21-22页 |
3.4 抗CcpA多克隆抗体的效价分析 | 第22页 |
3.5 CcpA蛋白保守性表达分析 | 第22-23页 |
3.6 EMSA验证CcpA蛋白与CPS启动子片段的结合 | 第23-24页 |
4. 讨论 | 第24-26页 |
第二部分 肺炎链球菌CcpA蛋白对CPS的调控作用研究 | 第26-44页 |
1. 实验材料 | 第26-29页 |
1.1 菌株和质粒 | 第26-27页 |
1.2 实验试剂 | 第27-29页 |
1.3 主要仪器 | 第29页 |
2. 实验方法 | 第29-32页 |
2.1 ccpA缺失株D39△ccpA的构建与鉴定 | 第29-31页 |
2.2 ccpA回复株(D39△ccpA::ccpA)的构建与鉴定 | 第31页 |
2.3 荚膜多糖含量检测 | 第31-32页 |
2.4 实时荧光定量PCR | 第32页 |
2.5 统计方法 | 第32页 |
3. 实验结果 | 第32-42页 |
3.1 ccpA缺失株(D39AccpA)的构建与鉴定 | 第32-40页 |
3.2 成功构建ccpA回复株(D39AccpA::ccpA) | 第40页 |
3.3 ccpA基因缺失或回复表达后,细菌CPS含量的变化 | 第40-42页 |
4. 讨论 | 第42-44页 |
全文总结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
文献综述 | 第48-56页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文题录 | 第57页 |