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山羊c-KIT和SCF基因在皮肤中的表达及与毛色关系研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
1. 引言第10-16页
    1.1. 哺乳动物的毛色第10页
    1.2. 山羊毛色性状及其价值第10页
    1.3. 被毛颜色的形成第10页
    1.4. “上位白”基因座位和 SCF/c-KIT 信号途径第10-13页
    1.5. SCF/c-KIT 信号途径参与影响哺乳动物毛色的形成第13-14页
    1.6. SCF/c-KIT 信号途径的重要功能和研究现状第14页
    1.7. 本课题组对山羊 SCF/c-KIT 信号途径研究成果第14-15页
    1.8. 本研究的目的、意义及主要内容第15-16页
2. 材料与方法第16-28页
    2.1. 试验材料第16-19页
        2.1.1. 试验动物和样本采集第16-17页
        2.1.2. 主要试剂及溶液的配制第17-18页
        2.1.3. 试验过程中使用的设备及仪器第18-19页
        2.1.4. 研究中使用的生物信息学软件第19页
    2.2. 试验方法和步骤第19-28页
        2.2.1. RNA 的提取第19页
        2.2.2. RNA 的纯化第19-20页
        2.2.3. cDNA 第一链的合成第20页
        2.2.4. RT-PCR 实验引物的设计第20-21页
        2.2.5. 荧光实时定量 PCR 实验引物的设计第21-22页
        2.2.6. PCR 反应体系与条件第22页
        2.2.7. 标准品的制备第22-23页
        2.2.8. 标准曲线建立和实时荧光定量 PCR第23-24页
        2.2.9. 石蜡切片制作第24页
        2.2.10. 免疫组织化学第24页
        2.2.11. DNA 的提取第24-25页
        2.2.12. DNA 浓度和纯度的检测及测定第25页
        2.2.13. 筛选 SNPs 实验 PCR 引物的设计第25-27页
        2.2.14. PCR 扩增、测序以及数据分析第27-28页
3. 结果与分析第28-57页
    3.1. SCF 基因不同剪接变体及 c-KIT,SCF 与 TYR 基因表达关系研究第28-40页
        3.1.1. 山羊皮肤组织 mRNA 的提取和纯化第28页
        3.1.2. SCF 基因不同剪接变体的 PCR 扩增结果第28-30页
        3.1.3. 荧光定量 PCR 实验中各待测基因的扩增和克隆第30-31页
        3.1.4. 阳性克隆的鉴定第31-32页
        3.1.5. Real-time qPCR 检测 TYR, c-KIT 及各型 SCF 基因在黑白山羊皮肤中的表达第32-37页
        3.1.6. 不同山羊皮肤中 c-KIT 基因及各型 SCF 基因与 TYR 基因 mRNA 变化规律第37-38页
        3.1.7. c-KIT 基因和 SCF 基因与 TYR 基因表达关系第38-40页
    3.2. c-KIT 在不同毛色山羊皮肤分布规律研究第40-41页
    3.3. c-KIT 基因和 SCF 基因组序列多态性研究第41-57页
        3.3.1. DNA 的提取第41页
        3.3.2. PCR 扩增结果第41-42页
        3.3.3. 测序结果比对分析第42-47页
        3.3.4. 研究中发现的 c-SNPs第47-48页
        3.3.5. c-KIT 基因上 4 个 cSNPs 的遗传多样性分析第48-50页
        3.3.6. c-KIT 基因多态位点的遗传多样性分析第50-54页
        3.3.7. SCF 基因多态位点的遗传多样性分析第54-57页
4. 讨论第57-63页
    4.1. 实验过程讨论第57-58页
        4.1.1. 样品采集和核酸提取第57页
        4.1.2. PCR 扩增第57页
        4.1.3. 实时荧光定量 PCR 试验第57页
        4.1.4. 毛囊切片制备第57-58页
        4.1.5. IHC 实验第58页
    4.2. 实验结果分析讨论第58-63页
        4.2.1. SCF 基因中的不同剪接变体及 c-KIT,SCF 与 TYR 基因表达定量第58-59页
        4.2.2. c-KIT 的表达分布第59-60页
        4.2.3. 多态位点的遗传多样性分析第60-63页
5. 结论第63-64页
参考文献第64-70页
作者简历第70-71页
在读期间已发表论文第71-72页
致谢第72-73页

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