摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1. 引言 | 第10-16页 |
1.1. 哺乳动物的毛色 | 第10页 |
1.2. 山羊毛色性状及其价值 | 第10页 |
1.3. 被毛颜色的形成 | 第10页 |
1.4. “上位白”基因座位和 SCF/c-KIT 信号途径 | 第10-13页 |
1.5. SCF/c-KIT 信号途径参与影响哺乳动物毛色的形成 | 第13-14页 |
1.6. SCF/c-KIT 信号途径的重要功能和研究现状 | 第14页 |
1.7. 本课题组对山羊 SCF/c-KIT 信号途径研究成果 | 第14-15页 |
1.8. 本研究的目的、意义及主要内容 | 第15-16页 |
2. 材料与方法 | 第16-28页 |
2.1. 试验材料 | 第16-19页 |
2.1.1. 试验动物和样本采集 | 第16-17页 |
2.1.2. 主要试剂及溶液的配制 | 第17-18页 |
2.1.3. 试验过程中使用的设备及仪器 | 第18-19页 |
2.1.4. 研究中使用的生物信息学软件 | 第19页 |
2.2. 试验方法和步骤 | 第19-28页 |
2.2.1. RNA 的提取 | 第19页 |
2.2.2. RNA 的纯化 | 第19-20页 |
2.2.3. cDNA 第一链的合成 | 第20页 |
2.2.4. RT-PCR 实验引物的设计 | 第20-21页 |
2.2.5. 荧光实时定量 PCR 实验引物的设计 | 第21-22页 |
2.2.6. PCR 反应体系与条件 | 第22页 |
2.2.7. 标准品的制备 | 第22-23页 |
2.2.8. 标准曲线建立和实时荧光定量 PCR | 第23-24页 |
2.2.9. 石蜡切片制作 | 第24页 |
2.2.10. 免疫组织化学 | 第24页 |
2.2.11. DNA 的提取 | 第24-25页 |
2.2.12. DNA 浓度和纯度的检测及测定 | 第25页 |
2.2.13. 筛选 SNPs 实验 PCR 引物的设计 | 第25-27页 |
2.2.14. PCR 扩增、测序以及数据分析 | 第27-28页 |
3. 结果与分析 | 第28-57页 |
3.1. SCF 基因不同剪接变体及 c-KIT,SCF 与 TYR 基因表达关系研究 | 第28-40页 |
3.1.1. 山羊皮肤组织 mRNA 的提取和纯化 | 第28页 |
3.1.2. SCF 基因不同剪接变体的 PCR 扩增结果 | 第28-30页 |
3.1.3. 荧光定量 PCR 实验中各待测基因的扩增和克隆 | 第30-31页 |
3.1.4. 阳性克隆的鉴定 | 第31-32页 |
3.1.5. Real-time qPCR 检测 TYR, c-KIT 及各型 SCF 基因在黑白山羊皮肤中的表达 | 第32-37页 |
3.1.6. 不同山羊皮肤中 c-KIT 基因及各型 SCF 基因与 TYR 基因 mRNA 变化规律 | 第37-38页 |
3.1.7. c-KIT 基因和 SCF 基因与 TYR 基因表达关系 | 第38-40页 |
3.2. c-KIT 在不同毛色山羊皮肤分布规律研究 | 第40-41页 |
3.3. c-KIT 基因和 SCF 基因组序列多态性研究 | 第41-57页 |
3.3.1. DNA 的提取 | 第41页 |
3.3.2. PCR 扩增结果 | 第41-42页 |
3.3.3. 测序结果比对分析 | 第42-47页 |
3.3.4. 研究中发现的 c-SNPs | 第47-48页 |
3.3.5. c-KIT 基因上 4 个 cSNPs 的遗传多样性分析 | 第48-50页 |
3.3.6. c-KIT 基因多态位点的遗传多样性分析 | 第50-54页 |
3.3.7. SCF 基因多态位点的遗传多样性分析 | 第54-57页 |
4. 讨论 | 第57-63页 |
4.1. 实验过程讨论 | 第57-58页 |
4.1.1. 样品采集和核酸提取 | 第57页 |
4.1.2. PCR 扩增 | 第57页 |
4.1.3. 实时荧光定量 PCR 试验 | 第57页 |
4.1.4. 毛囊切片制备 | 第57-58页 |
4.1.5. IHC 实验 | 第58页 |
4.2. 实验结果分析讨论 | 第58-63页 |
4.2.1. SCF 基因中的不同剪接变体及 c-KIT,SCF 与 TYR 基因表达定量 | 第58-59页 |
4.2.2. c-KIT 的表达分布 | 第59-60页 |
4.2.3. 多态位点的遗传多样性分析 | 第60-63页 |
5. 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
作者简历 | 第70-71页 |
在读期间已发表论文 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |