| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第10-22页 |
| ·植物原生质体瞬时表达系统应用 | 第10页 |
| ·植物原生质体 | 第10-14页 |
| ·植物材料选择 | 第11-12页 |
| ·酶液种类及其使用浓度 | 第12-13页 |
| ·渗透稳定剂 | 第13-14页 |
| ·酶液pH值 | 第14页 |
| ·DNA直接导入法转化植物原生质体 | 第14-15页 |
| ·PEG介导的转化 | 第14-15页 |
| ·电击法介导的基因转化 | 第15页 |
| ·绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP) | 第15-19页 |
| ·绿色荧光蛋白结构 | 第16-18页 |
| ·绿色荧光蛋白分子改造 | 第18-19页 |
| ·绿色荧光蛋白发光特性影响因素 | 第19页 |
| ·本实验研究内容 | 第19-22页 |
| ·理想受体系统建立——番木瓜原生质体分离 | 第20页 |
| ·原生质体瞬时表达体系建立 | 第20-22页 |
| 2 实验材料与方法 | 第22-27页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株与质粒 | 第22页 |
| ·主要仪器与设备 | 第22页 |
| ·主要细胞与分子生物学试剂 | 第22-23页 |
| ·实验关键试剂配方 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·番木瓜叶肉原生质体分离纯化 | 第23-24页 |
| ·原生质体产量与活力测定 | 第24页 |
| ·番木瓜叶肉原生质体GFP基因瞬时表达 | 第24-27页 |
| ·HBT95—SGFP-NOS质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·PEG介导的GFP基因遗传转化 | 第25-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-36页 |
| ·番木瓜叶肉原生质体分离条件优化 | 第27-30页 |
| ·叶肉原生质体分离纯化与活力检测 | 第27页 |
| ·酶、甘露醇浓度以及酶解时间对番木瓜叶肉原生质体分离影响 | 第27-29页 |
| ·pH值对叶肉原生质体分离的影响 | 第29-30页 |
| ·番木瓜叶肉原生质体瞬时表达研究 | 第30-36页 |
| ·质粒HBT95-SGFP(S65T)-NOS提取 | 第30页 |
| ·番木瓜叶肉原生质体基因瞬时表达情况 | 第30-31页 |
| ·PEG介导的番木瓜叶肉原生质体瞬时表达体系建立 | 第31-34页 |
| ·PEG分子量对番木瓜叶肉原生质体基因瞬时表达率影响 | 第31-32页 |
| ·PEG终浓度变化对番木瓜叶肉原生质体瞬时表达率影响 | 第32-33页 |
| ·PEG处理时间对番木瓜叶肉原生质体基因瞬时表达率影响 | 第33-34页 |
| ·质粒DNA对番木瓜叶肉原生质体基因瞬时表达率影响 | 第34页 |
| ·融合蛋白荧光信号的检测 | 第34-36页 |
| 3 分析与讨论 | 第36-39页 |
| ·番木瓜叶肉原生质体分离优化 | 第36-37页 |
| ·植物材料选择与生理状态 | 第36页 |
| ·"酶浓度-酶解时间"合理配比 | 第36页 |
| ·甘露醇浓度 | 第36-37页 |
| ·酶液pH值 | 第37页 |
| ·番木瓜叶肉原生质体遗传转化的影响因素 | 第37-39页 |
| ·PEG种类与浓度 | 第37-38页 |
| ·PEG作用时间 | 第38页 |
| ·质粒DNA浓度 | 第38-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 后记 | 第47页 |
