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应用玉米RIPs基因转化马铃薯提高其抗病性研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略语表第10-11页
1 引言第11-31页
    1.1 马铃薯对保障粮食安全的重要性第11-12页
    1.2 马铃薯抗病基因工程研究进展第12-26页
        1.2.1 马铃薯抗真菌病害基因工程第12-15页
        1.2.2 马铃薯抗卵菌基因工程第15-19页
        1.2.3 马铃薯抗病毒基因工程第19-24页
        1.2.4 马铃薯抗细菌基因工程第24-25页
        1.2.5 马铃薯抗类病毒基因工程第25-26页
    1.3 核糖体失活蛋白及其在植物抗病基因工程中的应用第26-29页
        1.3.1 应用RIP基因工程改善植物对病毒抗性第26-27页
        1.3.2 应用RIP基因工程改善植物对真菌抗性第27-29页
    1.4 本研究的目的意义及研究内容第29-31页
        1.4.1 目的及意义第29-31页
        1.4.2 研究内容第31页
2 pCAMBIA2301质粒的RIPs基因扩增及RIPs基因测序第31-35页
    2.1 材料与方法第31-34页
        2.1.1 试验材料第31-33页
        2.1.2 试验方法第33-34页
    2.2 结果与分析第34-35页
        2.2.1 重组质粒RIPs基因PCR第34-35页
        2.2.2 质粒RIPs基因PCR产物测序结果第35页
3 玉米RIPs基因对马铃薯转化第35-41页
    3.1 材料与方法第35-36页
        3.1.1 植物材料的离体快繁第35页
        3.1.2 农杆菌菌液的准备第35页
        3.1.3 马铃薯的遗传转化第35-36页
        3.1.4 调查指标第36页
    3.2 结果与分析第36-37页
    3.3 讨论第37-41页
    3.4 小结第41页
4 RIPs基因在受体马铃薯中表达的分子检测第41-61页
    4.1 材料与仪器设备第41-44页
        4.1.1 植物材料第41-42页
        4.1.2 酶和试剂第42-43页
        4.1.3 仪器设备第43-44页
    4.2 试验方法第44-53页
        4.2.1 马铃薯基因组DNA提取第44页
        4.2.2 马铃薯基因组DNA的RIPs基因PCR及PCR产物凝胶电泳第44页
        4.2.3 Southern印记杂交第44-46页
        4.2.4 马铃薯总RNA的RT-PCR第46-49页
        4.2.5 马铃薯总RNA的RT-qPCR第49-52页
        4.2.6 RIPs活性测定第52-53页
    4.3 结果与分析第53-60页
        4.3.1 卡那霉素抗性株系RIPs基因扩增第53-54页
        4.3.2 RIPs基因PCR阳性马铃薯株系的Southern印记杂交分析第54-58页
        4.3.3 Southern杂交阳性株系的RT-PCR分析第58-59页
        4.3.4 Southern杂交阳性株系的RT-qPCR分析第59页
        4.3.5 RIPs活性分析第59-60页
    4.4 讨论第60-61页
    4.5 小结第61页
5 转RIPs基因马铃薯抗病性鉴定第61-72页
    5.1 材料与方法第61-65页
        5.1.1 R.solani抗性鉴定第61-63页
        5.1.2 P.infestans抗性鉴定第63-65页
    5.2 结果与分析第65-70页
        5.2.1 转RIPs基因马铃薯对真菌R.solani抗性第65-67页
        5.2.2 转RIPs基因马铃薯对卵菌P.infestans抗性第67-70页
    5.3 讨论第70-72页
        5.3.1 关于以核糖体失活蛋白基因改善马铃薯对R.solani抗性第70-71页
        5.3.2 关于转RIPs基因马铃薯无性系对P.infestans抗性第71-72页
    5.4 小结第72页
6 结论第72-73页
7 讨论与展望第73-75页
致谢第75-76页
参考文献第76-93页
附录第93-100页
作者简介第100页

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