| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 主要缩略词 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 阿尔茨海默症 | 第12-13页 |
| 1.2 APP和Aβ | 第13-14页 |
| 1.3 γ-分泌酶概述 | 第14-18页 |
| 1.4 γ-分泌酶的结构生物学研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 本论文的主要研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-41页 |
| 2.1 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第21-24页 |
| 2.2.1 菌株和细胞系 | 第21页 |
| 2.2.2 载体 | 第21-22页 |
| 2.2.3 基因 | 第22页 |
| 2.2.4 主要试剂 | 第22-24页 |
| 2.3 试剂和溶液配制 | 第24-27页 |
| 2.3.1 培养基配制 | 第24-25页 |
| 2.3.2 常用溶液配制 | 第25-27页 |
| 2.3.3 其他试剂配制 | 第27页 |
| 2.4 实验方法及步骤 | 第27-41页 |
| 2.4.1 PCR引物设计 | 第27-28页 |
| 2.4.2 PCR扩增目的片段 | 第28-30页 |
| 2.4.3 限制性内切酶消化反应 | 第30-31页 |
| 2.4.4 DNA凝胶电泳 | 第31页 |
| 2.4.5 DNA凝胶回收 | 第31-32页 |
| 2.4.6 DNA连接反应 | 第32页 |
| 2.4.7 质粒DNA转化E.coli感受态细胞 | 第32页 |
| 2.4.8 质粒小量抽提 | 第32-34页 |
| 2.4.9 原核表达检测与大规模表达 | 第34页 |
| 2.4.10 昆虫细胞的培养与维持 | 第34-35页 |
| 2.4.11 重组杆状病毒基因组bacmid的制备与检测 | 第35-36页 |
| 2.4.12 重组杆状病毒的制备、扩增与蛋白表达 | 第36页 |
| 2.4.13 哺乳动物细胞系的质粒瞬转 | 第36-37页 |
| 2.4.14 细胞破碎与蛋白粗提取液的制备 | 第37页 |
| 2.4.15 亲和层析（重力柱） | 第37-38页 |
| 2.4.16 离子交换层析 | 第38页 |
| 2.4.17凝胶过滤层析 | 第38页 |
| 2.4.18 Western Blotting | 第38-39页 |
| 2.4.19 体外去糖基化实验 | 第39页 |
| 2.4.20 Bradford法测定蛋白质浓度 | 第39页 |
| 2.4.21 去垢剂筛选 | 第39页 |
| 2.4.22 膜蛋白提取 | 第39-40页 |
| 2.4.23 蛋白质结构信息学分析 | 第40-41页 |
| 第三章 γ-分泌酶组分的表达纯化 | 第41-70页 |
| 3.1 nicastrin的表达与纯化 | 第41-57页 |
| 3.1.1 nicastrin蛋白序列生物信息学分析 | 第41-44页 |
| 3.1.2 nicastrin蛋白表达与纯化 | 第44-50页 |
| 3.1.3 nicastrin蛋白体外去糖基化 | 第50-56页 |
| 3.1.4 讨论 | 第56-57页 |
| 3.2 presenilin的表达与纯化 | 第57-62页 |
| 3.2.1 presenilin蛋白序列生物信息学分析 | 第57页 |
| 3.2.2 presenilin蛋白表达与纯化 | 第57-62页 |
| 3.2.3 讨论 | 第62页 |
| 3.3 PEN2的表达与纯化 | 第62-65页 |
| 3.3.1 PEN2蛋白序列生物信息学分析 | 第62-63页 |
| 3.3.2 PEN2蛋白的表达与纯化 | 第63-65页 |
| 3.3.3 讨论 | 第65页 |
| 3.4 Aph1a的表达与纯化 | 第65-70页 |
| 3.4.1 Aph1a蛋白序列生物信息学分析 | 第65-66页 |
| 3.4.2 Aph1a蛋白的表达与纯化 | 第66-69页 |
| 3.4.3 讨论 | 第69-70页 |
| 第四章 γ-分泌酶复合物的表达纯化 | 第70-74页 |
| 4.1 γ-分泌酶全酶的表达检测 | 第70-71页 |
| 4.2 γ-分泌酶全酶的去垢剂筛选 | 第71页 |
| 4.3 γ-分泌酶全酶的纯化 | 第71-72页 |
| 4.4 本章讨论 | 第72-74页 |
| 第五章 总结与展望 | 第74-77页 |
| 5.1 总结 | 第74-75页 |
| 5.2 展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 攻读硕士学位期间发表或录用论文 | 第88页 |
