| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTACT | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-24页 |
| 1 AP-2 家族 | 第10-13页 |
| 1.1 基因构成与进化史 | 第10页 |
| 1.2 结构特点 | 第10-11页 |
| 1.3 位置及功能 | 第11-13页 |
| 1.4 AP-2 蛋白的研究方向 | 第13页 |
| 2 ETS-1 转录因子 | 第13-20页 |
| 2.1 ETS-1 介绍 | 第13-14页 |
| 2.2 ETS-1 的基因位点组织： | 第14-15页 |
| 2.3 ETS-1 蛋白结构： | 第15-17页 |
| 2.4 通过泛素化和SUMO化调控ETS-1： | 第17-18页 |
| 2.5 ETS-1 的表达模式： | 第18-19页 |
| 2.6 造血系统肿瘤中的ETS-1： | 第19-20页 |
| 3 PP-2A家族 | 第20-24页 |
| 3.1 PP2A结构癌症相关的基因突变 | 第20-22页 |
| 3.2 PP2A的抑制蛋白与PP2A激活药物 | 第22-23页 |
| 3.3 总结 | 第23-24页 |
| 第二章 材料、试剂以及研究方法 | 第24-34页 |
| 1 本实验的材料 | 第24页 |
| 2 本实验的试剂 | 第24页 |
| 3 实验仪器 | 第24页 |
| 4 实验方法 | 第24-34页 |
| 4.1 培养前列腺癌细胞DU145、前列腺癌细胞LNCaP。 | 第24-25页 |
| 4.2 Western blot技术检测Ets-1, AP-2α 的表达水平 | 第25-28页 |
| 4.2.1 列腺癌细胞DU145、前列腺癌细胞LNCaP总蛋白的提取 | 第25-26页 |
| 4.2.2 蛋白质浓度的测定 | 第26页 |
| 4.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第26-28页 |
| 4.3 过表达AP-2α/ETS-1 的DU145和LNCaP细胞系的建立 | 第28-34页 |
| 4.3.1 过表达载体的扩增 | 第28-29页 |
| 4.3.2 lipfectamine2000转染DU145和LNCaP细胞 | 第29-30页 |
| 4.3.3 特异性siRNA对AP-2α 和ETS-1 进行敲除 | 第30页 |
| 4.3.4 凝胶迁移滞后实验（EMSA）分析DU145和LNCaP细胞核蛋白中AP-2α 转录因子与PP2A-Aα 基因启动子序列的体外相互作用 | 第30-31页 |
| 4.3.5 DU145和LNCaP细胞核蛋白的提取 | 第31页 |
| 4.3.6 双链DNA探针的退火 | 第31页 |
| 4.3.7 双链DNA探针的标记及纯化 | 第31-32页 |
| 4.3.8 核蛋白与双链DNA相互作用的标记反应 | 第32页 |
| 4.3.9 非变性聚丙烯酰胺凝胶的配制和电泳 | 第32-33页 |
| 4.3.10 非变性聚丙烯酰胺凝胶的干胶及显影 | 第33-34页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第34-42页 |
| 1 实验结果 | 第34-39页 |
| 1.1 确定AP-2α 和ETS-1 在前列腺癌细胞DU145和LNCaP中的表达。 | 第34-35页 |
| 1.2 AP-2α 在体外与PP2A-Aα 基因启动子序列的结合 | 第35-36页 |
| 1.3 在DU145细胞沉默AP-2α 导致PP2A-Aα 上调 | 第36-37页 |
| 1.4 在LNCaP细胞中过表达AP-2α 导致PP2A-Aα 的表达明显下降 | 第37-38页 |
| 1.5 在DU145细胞中，沉默ETS-1 不改变PP2A-Aα 的表达水平 | 第38-39页 |
| 1.6 在LNCaP细胞中，过表达ETS-1 不改变PP2A-Aα 的表达水平 | 第39页 |
| 2 实验讨论 | 第39-42页 |
| 参考文献 | 第42-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-55页 |
