| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第10-16页 |
| 1.1 甘草的化学成分及含量测定方法研究进展 | 第10页 |
| 1.2 甘草化学成分研究进展 | 第10页 |
| 1.3 甘草含量测定方法研究进展 | 第10-11页 |
| 1.4 甘草及其活性成分的药理作用研究进展 | 第11页 |
| 1.5 甘草及其提取物的药理活性研究 | 第11-12页 |
| 1.6 甘草中三萜皂苷类化合物的药理活性研究 | 第12页 |
| 1.7 甘草黄酮类化合物的药理活性研究 | 第12-13页 |
| 1.8 野生与栽培甘草之间的质量差异性研究进展 | 第13-14页 |
| 1.9 抑制性差减杂交技术(SSH)的研究与应用 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-17页 |
| 2 论文的总体设计 | 第17-22页 |
| 2.1 立题依据与研究背景 | 第17-19页 |
| 2.1.1 如何提高栽培甘草的药用成分含量是当前中药资源领域备受关注的问题 | 第17页 |
| 2.1.2 前期研究发现与人工甘草相比野生甘草具有快速积累甘草酸的特性 | 第17页 |
| 2.1.3 野生甘草快速积累甘草酸的相关机制分析 | 第17-19页 |
| 2.1.4 抑制性差减杂交(SSH)技术是研究野生甘草快速积累药用成分基因机制的有效手段 | 第19页 |
| 2.1.5 本课题的研究目的和意义 | 第19页 |
| 2.2 研究目标 | 第19页 |
| 2.3 研究内容与研究方案 | 第19-20页 |
| 2.3.1 野生与栽培甘草药用成分快速积累的定量与定性研究 | 第19-20页 |
| 2.3.2 野生甘草与栽培甘草根抑制性差减cDNA文库构建 | 第20页 |
| 2.3.3 与药用成分快速积累相关的基因序列的筛选研究 | 第20页 |
| 2.4 技术路线 | 第20-21页 |
| 2.5 预期结果 | 第21页 |
| 2.6 可能的创新点 | 第21-22页 |
| 3 野生与栽培甘草药用成分快速积累的定量与定性分析 | 第22-41页 |
| 3.1 甘草样品取样部位的考察与确定 | 第22-29页 |
| 3.1.1 材料与方法 | 第22-25页 |
| 3.1.2 结果与分析 | 第25-29页 |
| 3.2 生与栽培甘草中五种药用成分含量对比分析 | 第29-33页 |
| 3.2.1 材料与方法 | 第29-30页 |
| 3.2.2 结果与分析 | 第30-33页 |
| 3.3 野生与栽培甘草中总黄酮含量对比分析 | 第33-34页 |
| 3.3.1 材料与方法 | 第33-34页 |
| 3.3.2 结果与分析 | 第34页 |
| 3.4 野生与栽培甘草的指纹图谱定性分析 | 第34-39页 |
| 3.4.1 材料与方法 | 第34-36页 |
| 3.4.2 结果与分析 | 第36-39页 |
| 3.5 讨论 | 第39-41页 |
| 4 野生与栽培甘草根抑制差减cDNA文库的构建 | 第41-59页 |
| 4.1 材料与方法 | 第41-51页 |
| 4.1.1 仪器与试药 | 第41-42页 |
| 4.1.2 总RNA提取 | 第42页 |
| 4.1.3 mRNA的分离 | 第42-43页 |
| 4.1.4 抑制性差减杂交 | 第43-49页 |
| 4.1.5 正向差减cDNA文库的构建 | 第49-50页 |
| 4.1.6 文库中插入片段的PCR鉴定 | 第50页 |
| 4.1.7 阳性克隆质粒DNA提取 | 第50-51页 |
| 4.2 结果与分析 | 第51-57页 |
| 4.2.1 选取样品的定量与定性差异分析 | 第51-52页 |
| 4.2.2 总RNA以及mRNA的质量检测 | 第52-54页 |
| 4.2.3 Rsa Ⅰ酶切效率分析 | 第54页 |
| 4.2.4 抑制性差减杂交产物二次PCR结果 | 第54-55页 |
| 4.2.5 差减效率检测 | 第55页 |
| 4.2.6 抑制性差减文库的构建 | 第55-56页 |
| 4.2.7 插入片段的PCR鉴定 | 第56-57页 |
| 4.3 讨论 | 第57-59页 |
| 4.3.1 高质量和足够量的RNA是构建高质量cDNA文库的前提 | 第57-58页 |
| 4.3.2 构建甘草根cDNA差减文库的重要性 | 第58-59页 |
| 5 野生甘草快速积累药用成分的基因序列筛选研究 | 第59-74页 |
| 5.1 材料与方法 | 第59-60页 |
| 5.1.1 材料 | 第59页 |
| 5.1.2 阳性克隆测序及表达序列标签(ESTs)的聚类和拼接 | 第59-60页 |
| 5.1.3 基因注释和功能分类 | 第60页 |
| 5.2 结果与分析 | 第60-69页 |
| 5.2.1 序列的质量分析 | 第60页 |
| 5.2.2 序列拼接结果分析 | 第60页 |
| 5.2.3 基因注释和功能分类 | 第60-69页 |
| 5.3 讨论 | 第69-74页 |
| 5.3.1 甘草的生态环境适应性研究 | 第69页 |
| 5.3.2 甘草中主要药用成分的生物合成途径研究 | 第69-71页 |
| 5.3.3 与野生甘草快速积累药用成分相关的基因机制探讨 | 第71-74页 |
| 6 结论与展望 | 第74-75页 |
| 6.1 结论 | 第74页 |
| 6.1.1 甘草样品不同部位药用成分分布情况研究 | 第74页 |
| 6.1.2 两种繁殖模式下甘草中药用成分积累速度研究 | 第74页 |
| 6.1.3 与野生甘草快速积累药用成分相关的特异性EST筛选研究 | 第74页 |
| 6.2 展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 个人简历 | 第86-87页 |
