| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 肝癌简介 | 第13-14页 |
| 1.2 肝癌的治疗 | 第14-16页 |
| 1.2.1 肝癌的传统治疗手段 | 第14-15页 |
| 1.2.2 肝癌的生物治疗手段 | 第15-16页 |
| 1.3 肝癌的相关分子机制 | 第16-18页 |
| 1.4 肝癌的化疗耐药 | 第18-19页 |
| 1.5 肝癌一线化疗药物5-FU简介 | 第19-20页 |
| 1.6 转录组测序 | 第20页 |
| 1.7 Wnt信号通路的研究概况 | 第20-26页 |
| 1.7.1 Wnt信号通路 | 第20-23页 |
| 1.7.2 Wnt信号通路与HCC | 第23-24页 |
| 1.7.3 基因DKK1、FZD10、DVL1与肿瘤化疗耐药的关系 | 第24-26页 |
| 1.8 本课题的意义 | 第26-27页 |
| 第二章 肝癌耐药细胞株的构建 | 第27-38页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-34页 |
| 2.2.1 细胞实验的前期工作 | 第28-29页 |
| 2.2.2 细胞实验的基本操作 | 第29-31页 |
| 2.2.3 药物诱导 | 第31-32页 |
| 2.2.4 单细胞筛选 | 第32-33页 |
| 2.2.5 CCK-8实验检测IC50 | 第33-34页 |
| 2.3 结果 | 第34-36页 |
| 2.3.1 细胞学形态的差异 | 第34-35页 |
| 2.3.2 细胞耐药结果 | 第35-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-37页 |
| 2.5 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 细胞样本的转录组测序 | 第38-48页 |
| 3.1 转录组测序的简介 | 第38页 |
| 3.2 测序的流程 | 第38-39页 |
| 3.2.1 提取样本RNA | 第38页 |
| 3.2.2 测序文库的构建 | 第38-39页 |
| 3.2.3 上机测序 | 第39页 |
| 3.3 数据处理与分析 | 第39-40页 |
| 3.3.1 质控分析和数据组装 | 第39页 |
| 3.3.2 序列比对 | 第39页 |
| 3.3.3 基因表达量的分析 | 第39页 |
| 3.3.4 差异表达基因的筛选 | 第39-40页 |
| 3.3.5 功能注释 | 第40页 |
| 3.3.6 通路富集分析 | 第40页 |
| 3.4 结果 | 第40-46页 |
| 3.4.1 测序数据的统计结果 | 第40页 |
| 3.4.2 差异表达基因的筛选结果 | 第40-41页 |
| 3.4.3 功能注释和富集分析结果 | 第41-46页 |
| 3.5 讨论 | 第46-47页 |
| 3.6 小结 | 第47-48页 |
| 第四章 mRNA表达水平的验证 | 第48-56页 |
| 4.1 q-PCR的简介 | 第48页 |
| 4.2 材料 | 第48-49页 |
| 4.3 方法 | 第49-53页 |
| 4.3.1 细胞RNA提取 | 第49-50页 |
| 4.3.2 逆转录实验 | 第50-51页 |
| 4.3.3 q-PCR对mRNA的验证 | 第51-53页 |
| 4.4 结果 | 第53-55页 |
| 4.4.1 RNA样本结果 | 第53页 |
| 4.4.2 mRNA验证结果 | 第53-55页 |
| 4.5 讨论 | 第55页 |
| 4.6 小结 | 第55-56页 |
| 第五章 转染细胞实验研究DKK1、FZD10和DVL1与肝癌5-FU耐药的关联 | 第56-65页 |
| 5.1 前言 | 第56页 |
| 5.2 材料 | 第56-57页 |
| 5.3 方法 | 第57-61页 |
| 5.3.1 q-PCR法检测siRNA的干扰效率并筛选siRNA序列 | 第57-60页 |
| 5.3.2 CCK-8法检测细胞在RNA干扰前后IC50的变化 | 第60-61页 |
| 5.4 结果 | 第61-64页 |
| 5.4.1 siRNA干扰效率及序列筛选的结果 | 第61-62页 |
| 5.4.2 CCK-8实验结果 | 第62-64页 |
| 5.5 讨论 | 第64页 |
| 5.6 小结 | 第64-65页 |
| 全文总结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
