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赤霉菌Gibberella sp.F75来源的α-半乳糖苷酶转基因玉米的培育

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第14-15页
第一章 绪论第15-25页
    1.1 饲料中的抗营养因子第15-16页
        1.1.1 抗营养因子的来源与作用第15-16页
        1.1.2 饲料中抗营养因子的消除方法第16页
    1.2 饲用酶的研究第16-19页
        1.2.1 饲用酶的特点第17-18页
        1.2.2 饲用酶的作用和作用方式第18页
        1.2.3 饲用酶的发展第18-19页
    1.3 α-半乳糖苷酶的研究进展第19-21页
        1.3.1 α-半乳糖苷酶的来源和分类第19-20页
        1.3.2 α-半乳糖苷酶的应用第20-21页
        1.3.3 α-半乳糖苷酶基因工程的研究第21页
    1.4 转基因植物研究进展第21-23页
        1.4.1 转基因技术的发展第21-22页
        1.4.2 转基因植物的发展第22-23页
    1.5 研究目的和意义第23-25页
第二章 α-半乳糖苷酶转基因玉米的培育第25-45页
    2.1 实验材料第25-26页
        2.1.1 菌株、基因和玉米材料第25页
        2.1.2 测序和引物合成第25页
        2.1.3 试剂盒和生物试剂第25页
        2.1.4 实验仪器第25-26页
        2.1.5 培养基配制第26页
        2.1.6 溶液配制第26页
    2.2 实验方法第26-35页
        2.2.1 α-半乳糖苷酶基因的密码子优化第26-28页
        2.2.2 植物表达载体构建第28-30页
        2.2.3 α-半乳糖苷酶植物表达盒的获得第30-31页
        2.2.4 植物表达盒的共转化第31-32页
        2.2.5 转基因阳性愈伤组织筛选第32-34页
        2.2.6 玉米植株培育第34-35页
    2.3 实验结果与分析第35-42页
        2.3.1 α-半乳糖苷酶基因的优化第35-38页
        2.3.2 植物表达载体构建第38-39页
        2.3.3 转基因愈伤组织培养第39-41页
        2.3.4 T1代种子收集第41页
        2.3.5 转基因玉米回交第41-42页
    2.4 讨论第42-44页
    本章小结第44-45页
第三章 转基因玉米分子检测和酶学分析第45-70页
    3.1 实验材料第45-47页
        3.1.1 菌株第45页
        3.1.2 生物试剂第45页
        3.1.3 溶液配制第45-46页
        3.1.4 培养基配制第46页
        3.1.5 实验器材第46-47页
        3.1.6 蛋白质质谱分析第47页
    3.2 实验方法第47-59页
        3.2.1 目的基因PCR检 测第47-48页
        3.2.2 Southern blot杂交第48-52页
        3.2.3 α-半乳糖苷酶抗原制备第52-54页
        3.2.4 多克隆抗体获得第54-55页
        3.2.5 Western blot分析第55-57页
        3.2.6 玉米 α-半乳糖苷酶酶活测定第57-58页
        3.2.7 两种来源 α-半乳糖苷酶性质比较第58-59页
        3.2.8 两种来源 α-半乳糖苷酶制粒比较第59页
    3.3 实验结果第59-67页
        3.3.1 玉米叶片PCR检测第59-61页
        3.3.2 玉米叶片Southern blot分析第61-62页
        3.3.3 Aga-F75在毕赤酵母中的表达第62-63页
        3.3.4 转基因玉米Western blot分析第63-64页
        3.3.5 转基因玉米 α-半乳糖苷酶酶活测定第64-65页
        3.3.6 酶学性质分析第65-67页
        3.3.7 制粒实验结果第67页
    3.4 讨论第67-68页
    本章小结第68-70页
第四章 全文结论第70-71页
参考文献第71-77页
致谢第77-78页
作者简历第78页

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