摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-25页 |
1.1 饲料中的抗营养因子 | 第15-16页 |
1.1.1 抗营养因子的来源与作用 | 第15-16页 |
1.1.2 饲料中抗营养因子的消除方法 | 第16页 |
1.2 饲用酶的研究 | 第16-19页 |
1.2.1 饲用酶的特点 | 第17-18页 |
1.2.2 饲用酶的作用和作用方式 | 第18页 |
1.2.3 饲用酶的发展 | 第18-19页 |
1.3 α-半乳糖苷酶的研究进展 | 第19-21页 |
1.3.1 α-半乳糖苷酶的来源和分类 | 第19-20页 |
1.3.2 α-半乳糖苷酶的应用 | 第20-21页 |
1.3.3 α-半乳糖苷酶基因工程的研究 | 第21页 |
1.4 转基因植物研究进展 | 第21-23页 |
1.4.1 转基因技术的发展 | 第21-22页 |
1.4.2 转基因植物的发展 | 第22-23页 |
1.5 研究目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 α-半乳糖苷酶转基因玉米的培育 | 第25-45页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 菌株、基因和玉米材料 | 第25页 |
2.1.2 测序和引物合成 | 第25页 |
2.1.3 试剂盒和生物试剂 | 第25页 |
2.1.4 实验仪器 | 第25-26页 |
2.1.5 培养基配制 | 第26页 |
2.1.6 溶液配制 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-35页 |
2.2.1 α-半乳糖苷酶基因的密码子优化 | 第26-28页 |
2.2.2 植物表达载体构建 | 第28-30页 |
2.2.3 α-半乳糖苷酶植物表达盒的获得 | 第30-31页 |
2.2.4 植物表达盒的共转化 | 第31-32页 |
2.2.5 转基因阳性愈伤组织筛选 | 第32-34页 |
2.2.6 玉米植株培育 | 第34-35页 |
2.3 实验结果与分析 | 第35-42页 |
2.3.1 α-半乳糖苷酶基因的优化 | 第35-38页 |
2.3.2 植物表达载体构建 | 第38-39页 |
2.3.3 转基因愈伤组织培养 | 第39-41页 |
2.3.4 T1代种子收集 | 第41页 |
2.3.5 转基因玉米回交 | 第41-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
本章小结 | 第44-45页 |
第三章 转基因玉米分子检测和酶学分析 | 第45-70页 |
3.1 实验材料 | 第45-47页 |
3.1.1 菌株 | 第45页 |
3.1.2 生物试剂 | 第45页 |
3.1.3 溶液配制 | 第45-46页 |
3.1.4 培养基配制 | 第46页 |
3.1.5 实验器材 | 第46-47页 |
3.1.6 蛋白质质谱分析 | 第47页 |
3.2 实验方法 | 第47-59页 |
3.2.1 目的基因PCR检 测 | 第47-48页 |
3.2.2 Southern blot杂交 | 第48-52页 |
3.2.3 α-半乳糖苷酶抗原制备 | 第52-54页 |
3.2.4 多克隆抗体获得 | 第54-55页 |
3.2.5 Western blot分析 | 第55-57页 |
3.2.6 玉米 α-半乳糖苷酶酶活测定 | 第57-58页 |
3.2.7 两种来源 α-半乳糖苷酶性质比较 | 第58-59页 |
3.2.8 两种来源 α-半乳糖苷酶制粒比较 | 第59页 |
3.3 实验结果 | 第59-67页 |
3.3.1 玉米叶片PCR检测 | 第59-61页 |
3.3.2 玉米叶片Southern blot分析 | 第61-62页 |
3.3.3 Aga-F75在毕赤酵母中的表达 | 第62-63页 |
3.3.4 转基因玉米Western blot分析 | 第63-64页 |
3.3.5 转基因玉米 α-半乳糖苷酶酶活测定 | 第64-65页 |
3.3.6 酶学性质分析 | 第65-67页 |
3.3.7 制粒实验结果 | 第67页 |
3.4 讨论 | 第67-68页 |
本章小结 | 第68-70页 |
第四章 全文结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
作者简历 | 第78页 |