符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-28页 |
1.1 植物芽再生 | 第12-14页 |
1.1.1 植物芽再生体系的建立 | 第12页 |
1.1.2 植物芽再生的调控 | 第12-14页 |
1.2 植物茎端分生组织 | 第14-16页 |
1.2.1 茎端分生组织的结构 | 第14-15页 |
1.2.2 茎端分生组织的调控机理 | 第15-16页 |
1.3 表观遗传学 | 第16-19页 |
1.3.1 表观遗传学的研究内容 | 第16-17页 |
1.3.2 表观遗传调控茎端分生组织的活性 | 第17-18页 |
1.3.3 表观遗传调控芽的再生 | 第18-19页 |
1.4 蛋白质精氨酸甲基转移酶 | 第19-23页 |
1.4.1 蛋白质精氨酸甲基转移酶的分类 | 第19-20页 |
1.4.2 蛋白质精氨酸甲基转移酶的结构 | 第20-21页 |
1.4.3 蛋白质精氨酸甲基转移酶的功能 | 第21-22页 |
1.4.4 蛋白质精氨酸甲基转移酶调控植物的生长发育 | 第22-23页 |
1.5 细胞周期 | 第23-26页 |
1.5.1 细胞周期的调控 | 第23-25页 |
1.5.2 细胞周期调控植物的生长发育 | 第25-26页 |
1.6 泛素蛋白连接酶 | 第26-27页 |
1.7 本实验的意义 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-44页 |
2.1 实验材料 | 第28-30页 |
2.1.1 植物材料 | 第28页 |
2.1.2 培养基 | 第28页 |
2.1.3 菌株与质粒 | 第28页 |
2.1.4 酶及生化试剂 | 第28-29页 |
2.1.5 PCR引物 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-44页 |
2.2.1 拟南芥的种植与鉴定 | 第30-32页 |
2.2.1.1 拟南芥种子的消毒 | 第30页 |
2.2.1.2 拟南芥的种植与管理 | 第30页 |
2.2.1.3 拟南芥DNA的提取 | 第30-31页 |
2.2.1.4 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第31-32页 |
2.2.2 表达载体的构建与转基因植株的获得 | 第32-37页 |
2.2.2.1 拟南芥基因序列的克隆 | 第32页 |
2.2.2.2 DNA的回收与纯化 | 第32-33页 |
2.2.2.3 TOP10大肠杆菌感受态制备 | 第33-34页 |
2.2.2.4 大肠杆菌热激转化 | 第34页 |
2.2.2.5 筛菌 | 第34-35页 |
2.2.2.6 大肠杆菌质粒提取 | 第35页 |
2.2.2.7 表达载体的构建 | 第35-36页 |
2.2.2.8 农杆菌的转化 | 第36-37页 |
2.2.2.9 拟南芥转基因植株的获得 | 第37页 |
2.2.3 拟南芥基因转录水平分析 | 第37-39页 |
2.2.3.1 植物总RNA的提取 | 第37-38页 |
2.2.3.2 反转录 | 第38-39页 |
2.2.3.3 实时荧光定量PCR分析 | 第39页 |
2.2.4 染色质免疫共沉淀 | 第39-42页 |
2.2.4.1 实验步骤 | 第39-42页 |
2.2.4.2 Ch IP结果的qRT-PCR检测 | 第42页 |
2.2.5 GUS染色分析基因表达模式 | 第42-43页 |
2.2.6 RNA剪接 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-55页 |
3.1 AtPRMT5调控拟南芥芽的再生 | 第44-45页 |
3.2 AtPRMT5通过组蛋白H4R3修饰调控KRP1基因的转录 | 第45-47页 |
3.3 KRP1过表达抑制芽再生 | 第47-48页 |
3.4 AtPRMT5通过抑制KRP1的表达调控芽的再生 | 第48-49页 |
3.5 AtPRMT5通过RKP剪接调控芽的再生 | 第49-52页 |
3.6 RKP突变抑制芽的再生 | 第52-53页 |
3.7 RKP通过KRP1介导的细胞周期调控芽再生 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-59页 |
4.1 表观遗传修饰调控芽的再生 | 第55-56页 |
4.2 AtPRMT5通过介导组蛋白修饰及RNA剪接调控芽再生 | 第56-57页 |
4.3 Pre-mRNA剪接与芽再生的关系 | 第57页 |
4.4 KRP1介导的细胞分裂调控芽的再生 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第71页 |