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烟草T-DNA激活标签发育改变突变体基因克隆与功能分析

附件第5-6页
摘要第6-7页
Abstract第7页
图表清单第11-12页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-22页
    1.1 烟草基因组学研究进展第13页
        1.1.1 基因组学第13页
        1.1.2 烟草基因组学的研究进展第13页
    1.2 T-DNA激活标签技术在基因功能研究中的应用第13-17页
        1.2.1 T-DNA标签技术简介第13-15页
        1.2.2 侧翼序列获得技术第15-17页
    1.3 MATE基因家族研究进展第17-20页
        1.3.1 MATE基因家族慨况第17-18页
        1.3.2 MATE基因家族结构第18页
        1.3.3 植物中MATE基因家族研究进展第18页
        1.3.4 烟草中MATE基因家族研究进展第18-19页
        1.3.5 问题与展望第19-20页
    1.4 生长素控制生长发育研究进展第20页
    1.5 本研究的立项依据和主要内容第20-22页
        1.5.1 本研究的立项依据第20-21页
        1.5.2 本研究的主要内容第21-22页
第二章 突变体表型鉴定第22-26页
    2.1 试验材料第22页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 仪器与工具第22页
    2.2 试验方法第22页
    2.3 结果与分析第22-24页
    2.4 讨论第24-26页
第三章 激活基因的筛选第26-40页
    3.1 材料与方法第26-33页
        3.1.1 试验材料第26页
        3.1.2 试验试剂及器材第26-27页
        3.1.3 DNA的提取第27页
        3.1.4 突变株系阳性检测第27-28页
        3.1.5 侧翼序列的扩增及分析第28-29页
        3.1.6 共分离试验第29-30页
        3.1.7 RNA提取及cDNA第一链的合成第30-31页
        3.1.8 旁侧基因相对定量第31-33页
    3.2 结果与分析第33-39页
        3.2.1 突变株系田间分离情况分析第33-34页
        3.2.2 分离株系植株阳性鉴定结果第34页
        3.2.3 侧翼序列扩增结果第34-35页
        3.2.4 激活插入位置的确定第35-37页
        3.2.5 插入位置附近基因表达分析第37-39页
    3.3 讨论第39-40页
第四章 烟草MATE基因过表达载体构建及遗传转化第40-50页
    4.1 材料与方法第40-46页
        4.1.1 过表达载体及菌株第40页
        4.1.2 主要药品及试剂第40页
        4.1.3 培养基及试剂配制方法第40-42页
        4.1.4 无菌苗的培养第42页
        4.1.5 过表达载体的构建第42-45页
        4.1.6 重组载体转化农杆菌第45页
        4.1.7 农杆菌介导的烟草叶盘转化及后续鉴定第45-46页
    4.2 结果与分析第46-49页
        4.2.1 目标基因的克隆第46-47页
        4.2.2 大肠杆菌转化阳性鉴定第47页
        4.2.3 农杆菌转化阳性鉴定第47-48页
        4.2.4 转基因苗阳性检测及表型鉴定第48-49页
    4.3 讨论第49-50页
第五章 普通烟草MATE基因家族分析及Ntab0245760功能预测第50-61页
    5.1 试验材料及试剂第50页
        5.1.1 试验材料第50页
        5.1.2 试验试剂第50页
    5.2 试验方法第50-52页
        5.2.1 普通烟草MATE家族成员的识别第50页
        5.2.2 多序列比对及系统发育树的构建第50页
        5.2.3 普通烟草MATE蛋白特征分析第50-51页
        5.2.4 普通烟草MATE家族基因表达分析及基因Ntab0245760功能预测第51-52页
    5.3 结果与分析第52-59页
        5.3.1 普通烟草MATE家族成员识别及系统发育分析第52-53页
        5.3.2 普通烟草MATE家族蛋白跨膜区数目及亚细胞定位分析第53-54页
        5.3.3 MATE家族蛋白保守域分析第54-56页
        5.3.4 普通烟草MATE家族基因表达模式分析第56-58页
        5.3.5 普通烟草MATE家族功能预测及基因Ntab0245760功能初探。第58-59页
    5.4 讨论第59-61页
第六章 全文结论第61-63页
    6.1 结论第61页
    6.2 创新点第61-62页
    6.3 工作展望第62-63页
参考文献第63-68页
致谢第68-69页
作者简介第69页

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