附件 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
图表清单 | 第11-12页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-22页 |
1.1 烟草基因组学研究进展 | 第13页 |
1.1.1 基因组学 | 第13页 |
1.1.2 烟草基因组学的研究进展 | 第13页 |
1.2 T-DNA激活标签技术在基因功能研究中的应用 | 第13-17页 |
1.2.1 T-DNA标签技术简介 | 第13-15页 |
1.2.2 侧翼序列获得技术 | 第15-17页 |
1.3 MATE基因家族研究进展 | 第17-20页 |
1.3.1 MATE基因家族慨况 | 第17-18页 |
1.3.2 MATE基因家族结构 | 第18页 |
1.3.3 植物中MATE基因家族研究进展 | 第18页 |
1.3.4 烟草中MATE基因家族研究进展 | 第18-19页 |
1.3.5 问题与展望 | 第19-20页 |
1.4 生长素控制生长发育研究进展 | 第20页 |
1.5 本研究的立项依据和主要内容 | 第20-22页 |
1.5.1 本研究的立项依据 | 第20-21页 |
1.5.2 本研究的主要内容 | 第21-22页 |
第二章 突变体表型鉴定 | 第22-26页 |
2.1 试验材料 | 第22页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 仪器与工具 | 第22页 |
2.2 试验方法 | 第22页 |
2.3 结果与分析 | 第22-24页 |
2.4 讨论 | 第24-26页 |
第三章 激活基因的筛选 | 第26-40页 |
3.1 材料与方法 | 第26-33页 |
3.1.1 试验材料 | 第26页 |
3.1.2 试验试剂及器材 | 第26-27页 |
3.1.3 DNA的提取 | 第27页 |
3.1.4 突变株系阳性检测 | 第27-28页 |
3.1.5 侧翼序列的扩增及分析 | 第28-29页 |
3.1.6 共分离试验 | 第29-30页 |
3.1.7 RNA提取及cDNA第一链的合成 | 第30-31页 |
3.1.8 旁侧基因相对定量 | 第31-33页 |
3.2 结果与分析 | 第33-39页 |
3.2.1 突变株系田间分离情况分析 | 第33-34页 |
3.2.2 分离株系植株阳性鉴定结果 | 第34页 |
3.2.3 侧翼序列扩增结果 | 第34-35页 |
3.2.4 激活插入位置的确定 | 第35-37页 |
3.2.5 插入位置附近基因表达分析 | 第37-39页 |
3.3 讨论 | 第39-40页 |
第四章 烟草MATE基因过表达载体构建及遗传转化 | 第40-50页 |
4.1 材料与方法 | 第40-46页 |
4.1.1 过表达载体及菌株 | 第40页 |
4.1.2 主要药品及试剂 | 第40页 |
4.1.3 培养基及试剂配制方法 | 第40-42页 |
4.1.4 无菌苗的培养 | 第42页 |
4.1.5 过表达载体的构建 | 第42-45页 |
4.1.6 重组载体转化农杆菌 | 第45页 |
4.1.7 农杆菌介导的烟草叶盘转化及后续鉴定 | 第45-46页 |
4.2 结果与分析 | 第46-49页 |
4.2.1 目标基因的克隆 | 第46-47页 |
4.2.2 大肠杆菌转化阳性鉴定 | 第47页 |
4.2.3 农杆菌转化阳性鉴定 | 第47-48页 |
4.2.4 转基因苗阳性检测及表型鉴定 | 第48-49页 |
4.3 讨论 | 第49-50页 |
第五章 普通烟草MATE基因家族分析及Ntab0245760功能预测 | 第50-61页 |
5.1 试验材料及试剂 | 第50页 |
5.1.1 试验材料 | 第50页 |
5.1.2 试验试剂 | 第50页 |
5.2 试验方法 | 第50-52页 |
5.2.1 普通烟草MATE家族成员的识别 | 第50页 |
5.2.2 多序列比对及系统发育树的构建 | 第50页 |
5.2.3 普通烟草MATE蛋白特征分析 | 第50-51页 |
5.2.4 普通烟草MATE家族基因表达分析及基因Ntab0245760功能预测 | 第51-52页 |
5.3 结果与分析 | 第52-59页 |
5.3.1 普通烟草MATE家族成员识别及系统发育分析 | 第52-53页 |
5.3.2 普通烟草MATE家族蛋白跨膜区数目及亚细胞定位分析 | 第53-54页 |
5.3.3 MATE家族蛋白保守域分析 | 第54-56页 |
5.3.4 普通烟草MATE家族基因表达模式分析 | 第56-58页 |
5.3.5 普通烟草MATE家族功能预测及基因Ntab0245760功能初探。 | 第58-59页 |
5.4 讨论 | 第59-61页 |
第六章 全文结论 | 第61-63页 |
6.1 结论 | 第61页 |
6.2 创新点 | 第61-62页 |
6.3 工作展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
作者简介 | 第69页 |