中文摘要 | 第3-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
符号说明 | 第13-14页 |
质粒、菌株说明 | 第14-15页 |
文献综述 | 第15-24页 |
1. 猪链球菌疫苗的综述 | 第15-20页 |
1.1 血清型、序列种类和地理分布 | 第15-17页 |
1.2 现今使用的疫苗 | 第17-20页 |
2. 猪圆环病毒疫苗的综述 | 第20-24页 |
2.1 实验性PCV2疫苗 | 第21-24页 |
第一章 猪链球菌2型外源抗原的筛选 | 第24-43页 |
1.1 材料 | 第24-26页 |
1.1.1 菌株、质粒和动物 | 第24页 |
1.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
1.1.3 主要耗材及仪器 | 第25页 |
1.1.4 相关主要溶液的配置 | 第25-26页 |
1.2 实验方法 | 第26-31页 |
1.2.1 猪链球菌2型eno基因的克隆和BL21(pET28a-Eno)的构建 | 第26-27页 |
1.2.2 BL21(pET28a-Eno)可溶性蛋白的纯化 | 第27-28页 |
1.2.3 Eno兔多抗血清的制备及其效价的测定 | 第28页 |
1.2.4 rSC0016(pS-Eno)菌株的构建及其蛋白表达 | 第28-30页 |
1.2.5 rSC0016 (pS-Eno)的生长曲线测定 | 第30页 |
1.2.6 rSC0018(pYA3493)、rSC0016(pS-3493)、rSC0016(pS-ENO)在BALB/c小鼠中的定居实验 | 第30页 |
1.2.7 rSC0016 (pS-Eno)、rSC0016 (pS-SaoA)、rSC0016 (pS-6PGD)、rSC0016 (pYA3493)免疫BALB/c鼠抗体的检测及IFN-γ及IL-4的水平测定 | 第30-31页 |
1.2.8 免疫小鼠的攻毒 | 第31页 |
1.2.9 统计分析 | 第31页 |
1.3 结果 | 第31-41页 |
1.3.1 Eno基因的扩增、连接、转化 | 第31-32页 |
1.3.2 pET28a-Eno在BL21中的表达及可溶性蛋白纯化 | 第32-33页 |
1.3.3 Rabbit anti-Eno多抗血清的制取及其效价的检测 | 第33页 |
1.3.4 rSC0016 (pS-Eno)、rSC0016 (pS-SaoA)、rSC0016 (pS-6PGD)菌株的构建 | 第33-35页 |
1.3.5 rSC0016 (pS-Eno)、rSC0016 (pS-SaoA)、rSC0016 (pS-6PGD)菌株中目的蛋白的表达 | 第35-36页 |
1.3.6 rSC0016 (pS-Eno)的生长曲线测定 | 第36-37页 |
1.3.7 rSC0018(pYA3493)、rSC0016(pS-3493)、rSC0016 (pS-Eno)在BALB/c小鼠中定居实验的结果 | 第37-38页 |
1.3.8 免疫后BALB/c小鼠各项抗体水平的检测 | 第38-39页 |
1.3.9 免疫后BALB/c小鼠体内IFN-γ及IL-4的水平测定 | 第39-40页 |
1.3.10 动物保护性实验 | 第40-41页 |
1.4 讨论 | 第41-43页 |
第二章 递送猪圆环病毒2型Cap蛋白的减毒沙门菌的构建和免疫效力评价 | 第43-59页 |
2.1 材料 | 第43-45页 |
2.1.1 菌株、质粒和动物 | 第43页 |
2.1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
2.1.3 主要耗材及仪器 | 第44页 |
2.1.4 相关主要溶液的配置 | 第44-45页 |
2.2 实验方法 | 第45-50页 |
2.2.1 猪圆环病毒2型基因的克隆和BL21(pET28a-Cap)、 BL21 (pET28a-dCap)的构建 | 第45-46页 |
2.2.2 BL21(pET28a-Cap)、BL21 (pET28a-dCap)可溶性蛋白的纯化 | 第46页 |
2.2.3 Cap和dCap兔多抗血清的制备及其效价的测定 | 第46页 |
2.2.4 rSC0016(pS-Cap)、rSC0016(pS-dCap)菌株的构建及其蛋白表达 | 第46-48页 |
2.2.5 rSC0016 (pS-Cap)、rSC0016 (pS-dCap)的生长曲线测定 | 第48页 |
2.2.6 rSC0016 (pS-Cap)、rSC0016 (pS-dCap)在BALB/c小鼠中的定居实验 | 第48-49页 |
2.2.7 rSC0016 (pS-Cap)、rSC0016 (pS-dCap)免疫BALB/c小鼠抗体的检测 | 第49页 |
2.2.8 免疫小鼠的攻毒及保护效力评价 | 第49-50页 |
2.3 结果 | 第50-58页 |
2.3.1 Cap、 dCap基因的扩增、重组、转化 | 第50-51页 |
2.3.2 pET28a-Cap、 pET28a-dCap在BL21中的表达及可溶性蛋白纯化 | 第51-52页 |
2.3.3 Cap和dCap兔多抗血清的制取及其效价的检测 | 第52页 |
2.3.4 rSC0016(pS-Cap)、rSC0016(pS-dCap)菌株的构建 | 第52-53页 |
2.3.5 rSC0016(pS-Cap)、rSC0016(pS-dCap)菌株的蛋白表达部位的测定 | 第53-54页 |
2.3.6 rSC0016 (pS-Cap)、rSC0016 (pS-dCap)的生长曲线测定 | 第54-55页 |
2.3.7 rSC0016 (pS-Cap)、rSC0016 (pS-dCap)在BALB/c小鼠中的定居实验 | 第55-56页 |
2.3.8 rSC0016 (pS-Cap)、rSC0016 (pS-dCap)免疫BALB/c小鼠抗体水平测定 | 第56-57页 |
2.3.9 rSC0016 (pS-Cap)、rSC0016 (pS-dCap)对小鼠的保护效率评价 | 第57-58页 |
2.4 讨论 | 第58-59页 |
全文小结 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66-67页 |