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罹病茎瘤芥腈水解酶基因克隆及动态表达RT-qPCR分析

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
1 绪论第11-20页
   ·研究背景及意义第11-14页
     ·研究背景第11-14页
     ·研究意义第14页
   ·根肿菌概况第14-16页
     ·根肿菌的生物学特性第14-15页
     ·根肿菌的生活史第15页
     ·根肿菌的传播途径和发病特点第15-16页
   ·根肿病相关的植物激素第16-18页
     ·生长素和细胞分裂素第16页
     ·腈水解酶简介第16-18页
     ·植物腈水解酶研究进展第18页
   ·研究目的和内容第18-19页
     ·研究目的第18页
     ·研究内容和技术路线第18-19页
   ·本研究的创新点第19-20页
2 茎瘤芥被根肿菌侵染后腈水解酶基因的表达分析第20-34页
   ·引言第20页
   ·材料与仪器第20-21页
     ·实验材料第20-21页
     ·主要仪器设备第21页
     ·MS 培养液的配制与主要试剂第21页
   ·实验方法与步骤第21-26页
     ·引物的设计与筛选第21-23页
     ·内参基因PCR 扩增条件的优化第23页
     ·内参基因和腈水解酶基因PCR 扩增产物验证第23-25页
     ·茎瘤芥根总RNA 的提取第25页
     ·DNase 酶处理及RNA 质量检测第25-26页
     ·cDNA 第一链的合成第26页
     ·qPCR第26页
     ·数据分析第26页
   ·结果与分析第26-33页
     ·引物的设计筛选第26-28页
     ·qPCR 退火温度的优化第28-29页
     ·PCR 扩增产物验证第29-30页
     ·总RNA 质量检测第30页
     ·内参基因的稳定性分析第30页
     ·腈水解酶基因的表达情况第30-33页
   ·本章小结第33-34页
3 茎瘤芥 BJNIT 基因的末端序列克隆第34-46页
   ·引言第34页
   ·材料与仪器第34-35页
     ·实验材料第34页
     ·主要仪器设备第34-35页
     ·主要试剂第35页
   ·实验方法与步骤第35-39页
     ·RACE 引物的设计及合成第35-36页
     ·3' RACE 法扩增BjNIT 基因的3'末端序列第36-37页
     ·3' RACE 产物克隆及阳性质粒的筛选和鉴定第37页
     ·3' RACE 产物的测序第37-38页
     ·5' RACE 法扩增BjNIT4 基因的5’末端序列第38-39页
     ·5' RACE 产物的克隆及阳性质粒的筛选和鉴定第39页
     ·5' RACE 产物的测序第39页
     ·生物信息学分析第39页
   ·结果与分析第39-45页
     ·推测氨基酸序列分析第39-40页
     ·腈水解酶基因编码的氨基酸的理化性质分析第40-43页
     ·腈水解酶功能位点分析第43页
     ·腈水解酶功能结构域分析第43-44页
     ·腈水解酶系统进化分析第44-45页
   ·本章小结第45-46页
4 结论与讨论第46-48页
   ·内参基因的选取第46页
   ·腈水解酶基因的表达情况第46-47页
   ·腈水解酶进化分析第47-48页
5 后续工作与展望第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-56页
附录第56-58页
 A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录第56页
 B. 作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目第56-57页
 C. 用于表达分析的内参基因和腈水解酶基因的标准曲线第57-58页

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