中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
1 绪论 | 第11-20页 |
·研究背景及意义 | 第11-14页 |
·研究背景 | 第11-14页 |
·研究意义 | 第14页 |
·根肿菌概况 | 第14-16页 |
·根肿菌的生物学特性 | 第14-15页 |
·根肿菌的生活史 | 第15页 |
·根肿菌的传播途径和发病特点 | 第15-16页 |
·根肿病相关的植物激素 | 第16-18页 |
·生长素和细胞分裂素 | 第16页 |
·腈水解酶简介 | 第16-18页 |
·植物腈水解酶研究进展 | 第18页 |
·研究目的和内容 | 第18-19页 |
·研究目的 | 第18页 |
·研究内容和技术路线 | 第18-19页 |
·本研究的创新点 | 第19-20页 |
2 茎瘤芥被根肿菌侵染后腈水解酶基因的表达分析 | 第20-34页 |
·引言 | 第20页 |
·材料与仪器 | 第20-21页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·主要仪器设备 | 第21页 |
·MS 培养液的配制与主要试剂 | 第21页 |
·实验方法与步骤 | 第21-26页 |
·引物的设计与筛选 | 第21-23页 |
·内参基因PCR 扩增条件的优化 | 第23页 |
·内参基因和腈水解酶基因PCR 扩增产物验证 | 第23-25页 |
·茎瘤芥根总RNA 的提取 | 第25页 |
·DNase 酶处理及RNA 质量检测 | 第25-26页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第26页 |
·qPCR | 第26页 |
·数据分析 | 第26页 |
·结果与分析 | 第26-33页 |
·引物的设计筛选 | 第26-28页 |
·qPCR 退火温度的优化 | 第28-29页 |
·PCR 扩增产物验证 | 第29-30页 |
·总RNA 质量检测 | 第30页 |
·内参基因的稳定性分析 | 第30页 |
·腈水解酶基因的表达情况 | 第30-33页 |
·本章小结 | 第33-34页 |
3 茎瘤芥 BJNIT 基因的末端序列克隆 | 第34-46页 |
·引言 | 第34页 |
·材料与仪器 | 第34-35页 |
·实验材料 | 第34页 |
·主要仪器设备 | 第34-35页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·实验方法与步骤 | 第35-39页 |
·RACE 引物的设计及合成 | 第35-36页 |
·3' RACE 法扩增BjNIT 基因的3'末端序列 | 第36-37页 |
·3' RACE 产物克隆及阳性质粒的筛选和鉴定 | 第37页 |
·3' RACE 产物的测序 | 第37-38页 |
·5' RACE 法扩增BjNIT4 基因的5’末端序列 | 第38-39页 |
·5' RACE 产物的克隆及阳性质粒的筛选和鉴定 | 第39页 |
·5' RACE 产物的测序 | 第39页 |
·生物信息学分析 | 第39页 |
·结果与分析 | 第39-45页 |
·推测氨基酸序列分析 | 第39-40页 |
·腈水解酶基因编码的氨基酸的理化性质分析 | 第40-43页 |
·腈水解酶功能位点分析 | 第43页 |
·腈水解酶功能结构域分析 | 第43-44页 |
·腈水解酶系统进化分析 | 第44-45页 |
·本章小结 | 第45-46页 |
4 结论与讨论 | 第46-48页 |
·内参基因的选取 | 第46页 |
·腈水解酶基因的表达情况 | 第46-47页 |
·腈水解酶进化分析 | 第47-48页 |
5 后续工作与展望 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
附录 | 第56-58页 |
A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第56页 |
B. 作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第56-57页 |
C. 用于表达分析的内参基因和腈水解酶基因的标准曲线 | 第57-58页 |