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连翘花粉活力、花粉形态及细胞培养研究

中文摘要第15-17页
ABSTRACT第17-18页
1 综述第19-27页
    1.1 连翘概况第19-24页
        1.1.1 连翘的形态特征第19页
        1.1.2 连翘的本草考证第19-20页
        1.1.3 连翘的分布与生境第20-21页
        1.1.4 连翘中的主要化学成分第21-22页
            1.1.4.1 挥发油第21页
            1.1.4.2 苯乙醇及其苷类第21页
            1.1.4.3 木脂素类第21-22页
            1.1.4.4 三萜类第22页
            1.1.4.5 C_6-C_2天然醇及其苷类第22页
            1.1.4.6 黄酮类第22页
        1.1.5 连翘的药理作用第22-24页
            1.1.5.1 抑制病原微生物作用第22-23页
            1.1.5.2 抗氧化作用第23页
            1.1.5.3 抗肝损伤作用第23页
            1.1.5.4 解热作用第23页
            1.1.5.5 对心血管系统的作用第23页
            1.1.5.6 其他作用第23-24页
    1.2 花粉活性研究现状第24-25页
    1.3 花粉形态特征研究现状第25页
    1.4 植物组织培养技术在中药研究中的应用第25-27页
2 不同类型连翘花粉的活力与形态比较第27-35页
    2.1 不同花型连翘花粉活性研究第27-31页
        2.1.1 材料与试剂第27页
            2.1.1.1 材料第27页
            2.1.1.2 试剂第27页
        2.1.2 染色法测定连翘花粉活力第27-28页
            2.1.2.1 TTC染色法第27页
            2.1.2.2 I_2-KI染色法第27-28页
            2.1.2.3 醋酸洋红染色法第28页
            2.1.2.4 离体培养法测定连翘花粉的萌发率第28页
        2.1.3 结果与分析第28-30页
            2.1.3.1 4种类型连翘花粉活力比较第28-29页
            2.1.3.2 不同因素对连翘花粉萌发率的影响第29-30页
        2.1.4 讨论第30-31页
            2.1.4.1 连翘花变异类型的花粉活力低于正常的二雄蕊花型的花粉活力第30页
            2.1.4.2 醋酸洋红染色法是连翘花粉活力测定的适宜方法第30-31页
            2.1.4.3 高浓度蔗糖与适宜浓度的硼酸和琼脂可促进连翘花粉的萌发第31页
    2.2 不同类型连翘花粉的扫描电子显微镜观察第31-35页
        2.2.1 材料与仪器第31页
            2.2.1.1 材料第31页
            2.2.1.2 仪器第31页
        2.2.2 方法第31-32页
        2.2.3 结果第32-34页
            2.2.3.1 8种类型连翘花粉的形态结构第32-33页
            2.2.3.2 8种类型连翘花粉的大小与脊背宽度第33-34页
        2.2.4 讨论第34-35页
            2.2.4.1 不同类型连翘花粉的形态特征具有一致性第34页
            2.2.4.2 不同类型连翘在花粉大小、脊背宽等形态学指标上存在差异第34-35页
3 连翘细胞培养及连翘酯苷A的生物合成第35-61页
    3.1 连翘果实消毒方法的筛选第35-38页
        3.1.1 材料与仪器第35页
            3.1.1.1 材料第35页
            3.1.1.2 试剂第35页
        3.1.2 方法第35-36页
            3.1.2.1 外植体的处理第35页
            3.1.2.2 青翘消毒的单因素预实验第35-36页
            3.1.2.3 青翘消毒的正交试验第36页
        3.1.3 结果第36-38页
            3.1.3.1 青翘消毒的单因素试验结果第36页
            3.1.3.2 青翘消毒的正交试验结果第36-38页
        3.1.4 讨论第38页
    3.2 连翘愈伤组织诱导条件的筛选第38-43页
        3.2.1 材料与试剂第38页
            3.2.1.1 材料第38页
            3.2.1.2 试剂第38页
        3.2.2 实验方法第38-39页
            3.2.2.1 外植体的消毒第38页
            3.2.2.2 基本培养基对连翘果实愈伤组织诱导的影响第38-39页
            3.2.2.3 不同外源植物激素对连翘果实愈伤组织诱导的影响第39页
            3.2.2.4 不同碳源对连翘果实愈伤组织诱导的影响第39页
        3.2.3 结果第39-42页
            3.2.3.1 基本培养基对连翘果实愈伤组织诱导的影响第39-40页
            3.2.3.2 外源植物激素对连翘果实愈伤组织诱导的影响第40-42页
            3.2.3.3 碳源对连翘果实愈伤组织诱导的影响第42页
        3.2.4 讨论第42-43页
            3.2.4.1 MS基本培养基是青翘愈伤组织诱导的适宜培养基第42页
            3.2.4.2 2,4-D、6-BA和KT配合使用可有效促进青翘愈伤组织的诱导第42-43页
            3.2.4.3 在青翘愈伤组织诱导中,蔗糖的作用优于葡萄糖和麦芽第43页
    3.3 连翘细胞悬浮培养体系的建立与主要成分测定第43-55页
        3.3.1 材料与仪器、试剂第43页
            3.3.1.1 材料第43页
            3.3.1.2 仪器和试剂第43页
        3.3.2 方法第43-46页
            3.3.2.1 连翘悬浮细胞系的建立第43-44页
            3.3.2.2 悬浮培养细胞中连翘酯苷A的测定与标准曲线的绘制第44-45页
            3.3.2.3 培养基中附加的外源植物激素第45页
            3.3.2.4 基本培养基第45页
            3.3.2.5 培养基的pH第45页
            3.3.2.6 培养基中附加的碳源第45页
            3.3.2.7 培养基中的大量元素浓度第45页
            3.3.2.8 培养基中的氮源第45-46页
            3.3.2.9 培养基中的磷源第46页
        3.3.3 结果第46-53页
            3.3.3.1 外源植物激素对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用第46-48页
            3.3.3.2 基本培养基对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用第48-49页
            3.3.3.3 培养基的pH值对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用第49-50页
            3.3.3.4 不同碳源对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用第50-51页
            3.3.3.5 大量元素浓度对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用第51-52页
            3.3.3.6 氮对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用第52页
            3.3.3.7 磷对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用第52-53页
        3.3.4 讨论第53-55页
            3.3.4.1 连翘细胞的生长与连翘酯苷A的合成需要不同的外源激素组合第53页
            3.3.4.2 B_5培养基是适合于连翘悬浮细胞增殖和连翘酯苷A合成的基本培养基第53-54页
            3.3.4.3 酸性环境适合于连翘细胞的增殖和连翘酯苷A的合成第54页
            3.3.4.4 蔗糖是连翘细胞增殖和连翘酯苷A合成的理想碳源第54页
            3.3.4.5 连翘细胞的增殖与连翘酯苷A的合成需要不同浓度的无机元素第54页
            3.3.4.6 连翘悬浮细胞的增殖与连翘酯苷A的合成需要不同的NH_4~+和NO_3~-比例第54页
            3.3.4.7 连翘悬浮细胞的增殖与连翘酯苷A的合成需要不同浓度的磷元素第54-55页
    3.4 连翘细胞悬浮培养动力学研究第55-61页
        3.4.1 材料与仪器、试剂第55页
            3.4.1.1 材料第55页
            3.4.1.2 仪器及试剂第55页
        3.4.2 方法第55-58页
            3.4.2.1 悬浮细胞生长曲线的测定第55页
            3.4.2.2 细胞活力的测定第55-56页
            3.4.2.3 培养液pH值的测定第56页
            3.4.2.4 苯酚-硫酸法测定培养液中的蔗糖含量第56页
            3.4.2.5 水杨酸-浓硫酸法测定培养液中的NO_3~-浓度第56-58页
        3.4.3 结果第58-60页
            3.4.3.1 连翘悬浮细胞的生长规律第58页
            3.4.3.2 连翘悬浮细胞的活力变化规律第58-59页
            3.4.3.3 连翘悬浮细胞培养液pH的变化规律第59页
            3.4.3.4 连翘悬浮细胞培养液中蔗糖的消耗规律第59页
            3.4.3.5 连翘悬浮细胞培养液中NO_3~-的利用规律第59-60页
        3.4.4 讨论第60-61页
            3.4.4.1 连翘悬浮细胞的生长基本符合“S”形生长曲线第60页
            3.4.4.2 连翘悬浮细胞的活力表现为抛物线形第60页
            3.4.4.3 培养基的pH值在连翘悬浮细胞培养过程中不断变化第60页
            3.4.4.4 蔗糖为连翘悬浮细胞的活跃生命活动过程提供了充足的能量第60页
            3.4.4.5 连翘悬浮培养细胞的增殖对NH_4~+和NO_3~-表现为选择性利用第60-61页
参考文献第61-68页
图版说明第68-74页
致谢第74-75页
个人简历第75-76页
承诺书第76-77页

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