中文摘要 | 第15-17页 |
ABSTRACT | 第17-18页 |
1 综述 | 第19-27页 |
1.1 连翘概况 | 第19-24页 |
1.1.1 连翘的形态特征 | 第19页 |
1.1.2 连翘的本草考证 | 第19-20页 |
1.1.3 连翘的分布与生境 | 第20-21页 |
1.1.4 连翘中的主要化学成分 | 第21-22页 |
1.1.4.1 挥发油 | 第21页 |
1.1.4.2 苯乙醇及其苷类 | 第21页 |
1.1.4.3 木脂素类 | 第21-22页 |
1.1.4.4 三萜类 | 第22页 |
1.1.4.5 C_6-C_2天然醇及其苷类 | 第22页 |
1.1.4.6 黄酮类 | 第22页 |
1.1.5 连翘的药理作用 | 第22-24页 |
1.1.5.1 抑制病原微生物作用 | 第22-23页 |
1.1.5.2 抗氧化作用 | 第23页 |
1.1.5.3 抗肝损伤作用 | 第23页 |
1.1.5.4 解热作用 | 第23页 |
1.1.5.5 对心血管系统的作用 | 第23页 |
1.1.5.6 其他作用 | 第23-24页 |
1.2 花粉活性研究现状 | 第24-25页 |
1.3 花粉形态特征研究现状 | 第25页 |
1.4 植物组织培养技术在中药研究中的应用 | 第25-27页 |
2 不同类型连翘花粉的活力与形态比较 | 第27-35页 |
2.1 不同花型连翘花粉活性研究 | 第27-31页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第27页 |
2.1.1.1 材料 | 第27页 |
2.1.1.2 试剂 | 第27页 |
2.1.2 染色法测定连翘花粉活力 | 第27-28页 |
2.1.2.1 TTC染色法 | 第27页 |
2.1.2.2 I_2-KI染色法 | 第27-28页 |
2.1.2.3 醋酸洋红染色法 | 第28页 |
2.1.2.4 离体培养法测定连翘花粉的萌发率 | 第28页 |
2.1.3 结果与分析 | 第28-30页 |
2.1.3.1 4种类型连翘花粉活力比较 | 第28-29页 |
2.1.3.2 不同因素对连翘花粉萌发率的影响 | 第29-30页 |
2.1.4 讨论 | 第30-31页 |
2.1.4.1 连翘花变异类型的花粉活力低于正常的二雄蕊花型的花粉活力 | 第30页 |
2.1.4.2 醋酸洋红染色法是连翘花粉活力测定的适宜方法 | 第30-31页 |
2.1.4.3 高浓度蔗糖与适宜浓度的硼酸和琼脂可促进连翘花粉的萌发 | 第31页 |
2.2 不同类型连翘花粉的扫描电子显微镜观察 | 第31-35页 |
2.2.1 材料与仪器 | 第31页 |
2.2.1.1 材料 | 第31页 |
2.2.1.2 仪器 | 第31页 |
2.2.2 方法 | 第31-32页 |
2.2.3 结果 | 第32-34页 |
2.2.3.1 8种类型连翘花粉的形态结构 | 第32-33页 |
2.2.3.2 8种类型连翘花粉的大小与脊背宽度 | 第33-34页 |
2.2.4 讨论 | 第34-35页 |
2.2.4.1 不同类型连翘花粉的形态特征具有一致性 | 第34页 |
2.2.4.2 不同类型连翘在花粉大小、脊背宽等形态学指标上存在差异 | 第34-35页 |
3 连翘细胞培养及连翘酯苷A的生物合成 | 第35-61页 |
3.1 连翘果实消毒方法的筛选 | 第35-38页 |
3.1.1 材料与仪器 | 第35页 |
3.1.1.1 材料 | 第35页 |
3.1.1.2 试剂 | 第35页 |
3.1.2 方法 | 第35-36页 |
3.1.2.1 外植体的处理 | 第35页 |
3.1.2.2 青翘消毒的单因素预实验 | 第35-36页 |
3.1.2.3 青翘消毒的正交试验 | 第36页 |
3.1.3 结果 | 第36-38页 |
3.1.3.1 青翘消毒的单因素试验结果 | 第36页 |
3.1.3.2 青翘消毒的正交试验结果 | 第36-38页 |
3.1.4 讨论 | 第38页 |
3.2 连翘愈伤组织诱导条件的筛选 | 第38-43页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第38页 |
3.2.1.1 材料 | 第38页 |
3.2.1.2 试剂 | 第38页 |
3.2.2 实验方法 | 第38-39页 |
3.2.2.1 外植体的消毒 | 第38页 |
3.2.2.2 基本培养基对连翘果实愈伤组织诱导的影响 | 第38-39页 |
3.2.2.3 不同外源植物激素对连翘果实愈伤组织诱导的影响 | 第39页 |
3.2.2.4 不同碳源对连翘果实愈伤组织诱导的影响 | 第39页 |
3.2.3 结果 | 第39-42页 |
3.2.3.1 基本培养基对连翘果实愈伤组织诱导的影响 | 第39-40页 |
3.2.3.2 外源植物激素对连翘果实愈伤组织诱导的影响 | 第40-42页 |
3.2.3.3 碳源对连翘果实愈伤组织诱导的影响 | 第42页 |
3.2.4 讨论 | 第42-43页 |
3.2.4.1 MS基本培养基是青翘愈伤组织诱导的适宜培养基 | 第42页 |
3.2.4.2 2,4-D、6-BA和KT配合使用可有效促进青翘愈伤组织的诱导 | 第42-43页 |
3.2.4.3 在青翘愈伤组织诱导中,蔗糖的作用优于葡萄糖和麦芽 | 第43页 |
3.3 连翘细胞悬浮培养体系的建立与主要成分测定 | 第43-55页 |
3.3.1 材料与仪器、试剂 | 第43页 |
3.3.1.1 材料 | 第43页 |
3.3.1.2 仪器和试剂 | 第43页 |
3.3.2 方法 | 第43-46页 |
3.3.2.1 连翘悬浮细胞系的建立 | 第43-44页 |
3.3.2.2 悬浮培养细胞中连翘酯苷A的测定与标准曲线的绘制 | 第44-45页 |
3.3.2.3 培养基中附加的外源植物激素 | 第45页 |
3.3.2.4 基本培养基 | 第45页 |
3.3.2.5 培养基的pH | 第45页 |
3.3.2.6 培养基中附加的碳源 | 第45页 |
3.3.2.7 培养基中的大量元素浓度 | 第45页 |
3.3.2.8 培养基中的氮源 | 第45-46页 |
3.3.2.9 培养基中的磷源 | 第46页 |
3.3.3 结果 | 第46-53页 |
3.3.3.1 外源植物激素对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用 | 第46-48页 |
3.3.3.2 基本培养基对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用 | 第48-49页 |
3.3.3.3 培养基的pH值对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用 | 第49-50页 |
3.3.3.4 不同碳源对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用 | 第50-51页 |
3.3.3.5 大量元素浓度对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用 | 第51-52页 |
3.3.3.6 氮对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用 | 第52页 |
3.3.3.7 磷对连翘悬浮细胞生长及连翘酯苷A合成的作用 | 第52-53页 |
3.3.4 讨论 | 第53-55页 |
3.3.4.1 连翘细胞的生长与连翘酯苷A的合成需要不同的外源激素组合 | 第53页 |
3.3.4.2 B_5培养基是适合于连翘悬浮细胞增殖和连翘酯苷A合成的基本培养基 | 第53-54页 |
3.3.4.3 酸性环境适合于连翘细胞的增殖和连翘酯苷A的合成 | 第54页 |
3.3.4.4 蔗糖是连翘细胞增殖和连翘酯苷A合成的理想碳源 | 第54页 |
3.3.4.5 连翘细胞的增殖与连翘酯苷A的合成需要不同浓度的无机元素 | 第54页 |
3.3.4.6 连翘悬浮细胞的增殖与连翘酯苷A的合成需要不同的NH_4~+和NO_3~-比例 | 第54页 |
3.3.4.7 连翘悬浮细胞的增殖与连翘酯苷A的合成需要不同浓度的磷元素 | 第54-55页 |
3.4 连翘细胞悬浮培养动力学研究 | 第55-61页 |
3.4.1 材料与仪器、试剂 | 第55页 |
3.4.1.1 材料 | 第55页 |
3.4.1.2 仪器及试剂 | 第55页 |
3.4.2 方法 | 第55-58页 |
3.4.2.1 悬浮细胞生长曲线的测定 | 第55页 |
3.4.2.2 细胞活力的测定 | 第55-56页 |
3.4.2.3 培养液pH值的测定 | 第56页 |
3.4.2.4 苯酚-硫酸法测定培养液中的蔗糖含量 | 第56页 |
3.4.2.5 水杨酸-浓硫酸法测定培养液中的NO_3~-浓度 | 第56-58页 |
3.4.3 结果 | 第58-60页 |
3.4.3.1 连翘悬浮细胞的生长规律 | 第58页 |
3.4.3.2 连翘悬浮细胞的活力变化规律 | 第58-59页 |
3.4.3.3 连翘悬浮细胞培养液pH的变化规律 | 第59页 |
3.4.3.4 连翘悬浮细胞培养液中蔗糖的消耗规律 | 第59页 |
3.4.3.5 连翘悬浮细胞培养液中NO_3~-的利用规律 | 第59-60页 |
3.4.4 讨论 | 第60-61页 |
3.4.4.1 连翘悬浮细胞的生长基本符合“S”形生长曲线 | 第60页 |
3.4.4.2 连翘悬浮细胞的活力表现为抛物线形 | 第60页 |
3.4.4.3 培养基的pH值在连翘悬浮细胞培养过程中不断变化 | 第60页 |
3.4.4.4 蔗糖为连翘悬浮细胞的活跃生命活动过程提供了充足的能量 | 第60页 |
3.4.4.5 连翘悬浮培养细胞的增殖对NH_4~+和NO_3~-表现为选择性利用 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
图版说明 | 第68-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
个人简历 | 第75-76页 |
承诺书 | 第76-77页 |