摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写表 | 第8-11页 |
前言 | 第11-20页 |
1.乳腺癌简介 | 第11-15页 |
1.1 乳腺癌的分类及生物学特征 | 第11-12页 |
1.2 乳腺癌的发生机制 | 第12-15页 |
1.2.1 人表皮生长因子受体 2(HER-2/neu) | 第12-13页 |
1.2.2 肿瘤抑制因子TP53 | 第13-14页 |
1.2.3 nm23 | 第14-15页 |
1.2.4 Cyclin D1 | 第15页 |
2. Eps8基因简介 | 第15-20页 |
2.1 Eps8蛋白的结构 | 第15-16页 |
2.2 Eps8的生理功能 | 第16-20页 |
第一部分 材料和方法 | 第20-28页 |
1.材料 | 第20页 |
2.主要仪器 | 第20-21页 |
3. 实验方法 | 第21-28页 |
3.1 免疫组化 | 第21-22页 |
3.2 细胞培养 | 第22-24页 |
3.2.1 细胞解冻 | 第22-23页 |
3.2.2 细胞传代 | 第23页 |
3.2.3 细胞冻存 | 第23-24页 |
3.3 建立稳定过表达GFP和GFP-Eps8的MCF7细胞系 | 第24页 |
3.3.1 细胞转染 | 第24页 |
3.3.2 抗生素筛选 | 第24页 |
3.4 Eps8 siRNA慢病毒的制备与细胞感染 | 第24-25页 |
3.5 细胞增殖测定 | 第25-26页 |
3.5.1 细胞活力分析 | 第25页 |
3.5.2 细胞计数法 | 第25页 |
3.5.3 液体克隆实验 | 第25-26页 |
3.6 细胞周期检测 | 第26页 |
3.7 细胞凋亡检测 | 第26页 |
3.8 裸鼠成瘤实验 | 第26页 |
3.9 细胞划痕实验 | 第26-27页 |
3.10 免疫荧光实验 | 第27页 |
3.11 Western blot实验 | 第27页 |
3.12 统计学分析 | 第27-28页 |
第二部分 结果与分析 | 第28-38页 |
1.Eps8在乳腺癌组织和高侵袭性细胞株中高表达 | 第28-30页 |
2.Eps8的过量表达促进乳腺癌细胞MCF7的增殖 | 第30-32页 |
3. Eps8的敲低抑制MDA-MB-231细胞在体内、体外的增殖和存活 | 第32-34页 |
4. Eps8的敲低抑制乳腺癌细胞的侵袭能力,减少EGF诱导的丝状伪足大小和数量,并增强乳腺癌细胞对顺铂的敏感性 | 第34-36页 |
5. Eps8影响ERK信号通路以及MMP9、p53和EMT蛋白的表达 | 第36-38页 |
讨论 | 第38-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
附录 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |