| 中文摘要 | 第10-15页 |
| 英文摘要 | 第15-20页 |
| 第一部分 miR-138 与HIF-1α 在人心肌梗死组织中的表达意义及相关性分析 | 第21-44页 |
| 前言 | 第21-23页 |
| 材料与方法 | 第23-29页 |
| 1. 材料 | 第23-25页 |
| 2. 免疫组织化学染色（S-P法） | 第25页 |
| 3. 石蜡包埋心肌组织中提取micro RNA | 第25-28页 |
| 3.1 实验材料的处理 | 第25-26页 |
| 3.2 micro RNA的提取 | 第26页 |
| 3.3 Taqman探针法miRNAqRT-PCR | 第26-28页 |
| 4. 结果判定 | 第28页 |
| 4.1 结果判定标准 | 第28页 |
| 4.2 实时定量PCR测定miR-138 的结果 | 第28页 |
| 5. 统计学分析 | 第28-29页 |
| 结果 | 第29-32页 |
| 1. HIF-1α 在早、晚期缺氧猝死组和正常心肌组的表达 | 第29页 |
| 2. Sca-1 在早、晚期缺氧猝死组和正常心肌组的表达 | 第29-30页 |
| 3. Notch1在早、晚期缺氧猝死组和正常心肌组的表达 | 第30页 |
| 4. CTGF在早、晚期缺氧猝死组和正常心肌组的表达 | 第30-31页 |
| 5. HIF-1α 与Sca-1、Notch1、CTGF在各组中表达的相关性分析 | 第31-32页 |
| 6. miR-138、HIF-1α 在各组心肌组织中的表达分析 | 第32页 |
| 讨论 | 第32-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 附图 | 第40-44页 |
| 第二部分 构建携带大鼠miR-138 基因及慢病毒载体，稳定转染大鼠心肌细胞H9C2的研究 | 第44-62页 |
| 前言 | 第44页 |
| 材料与方法 | 第44-53页 |
| 1. 细胞株 | 第44-45页 |
| 2. 主要试剂 | 第45页 |
| 3. 主要仪器设备 | 第45-46页 |
| 4. 质粒选择 | 第46页 |
| 5. PBS液配制 | 第46页 |
| 6. DMEM/F12 培养基的配制 | 第46-47页 |
| 7. MTT配制 | 第47页 |
| 8. DMSO细胞冻存液的配制 | 第47页 |
| 9. 0.25%胰蛋白酶消化液的配制 | 第47页 |
| 10. 主要的细胞培养技术 | 第47-48页 |
| 11. miR-138 真核表达质粒的构建及鉴定 | 第48-51页 |
| 12. 慢病毒载体的构建 | 第51-53页 |
| 13. 统计学分析 | 第53页 |
| 结果 | 第53-56页 |
| 1. 从H9C2细胞基因组中提取的Pre-miR-138 DNA片段的PCR结果 | 第53-54页 |
| 2. 重组质粒pEGFP-miR-138 的双酶切鉴定 | 第54页 |
| 3. 重组质粒pEGFP-miR-138 的测序鉴定 | 第54-55页 |
| 4. 荧光倒置显微镜下观察荧光蛋白的表达情况 | 第55页 |
| 5. 荧光实时定量PCR检测转染H9C2细胞后miR-138 的表达 | 第55-56页 |
| 讨论 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 第三部分 miR-138 与HIF-1α 靶向关系的研究 | 第62-79页 |
| 前言 | 第62页 |
| 材料与方法 | 第62-72页 |
| 1. 材料 | 第62-72页 |
| 1.1 主要试剂 | 第62-64页 |
| 1.2 实验仪器 | 第64页 |
| 1.3 主要试剂 | 第64-66页 |
| 1.4 RNA提取及实时定量PCR反应 | 第66-67页 |
| 1.5 荧光素酶表达报告质粒的构建 | 第67-68页 |
| 1.6 双荧光素酶实验 | 第68-69页 |
| 1.7 pMIR-HIF-1α-ORF1突变质粒的双荧光素酶实验 | 第69-70页 |
| 1.8 HIF-1α 强制表达实验 | 第70-71页 |
| 1.9 Western blot实验 | 第71-72页 |
| 2. 统计学分析 | 第72页 |
| 结果 | 第72-74页 |
| 1. miR-138 的IE基因预测结果 | 第72-73页 |
| 2. HIF-1α3'-UTR-pCHECK-2、HIF-1α Mut3'-UTR-pCHECK-2载体构建结果 | 第73-74页 |
| 讨论 | 第74-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 第四部分 miR-138 通过调节HIF-1α 表达在心肌缺氧梗死后心肌重构的分子机制研究 | 第79-93页 |
| 前言 | 第79-80页 |
| 材料与方法 | 第80-84页 |
| 1. 材料 | 第80-81页 |
| 2. 试剂配制 | 第81页 |
| 3. 缺氧细胞模型的建立 | 第81-83页 |
| 4. 统计学分析 | 第83-84页 |
| 结果 | 第84-87页 |
| 讨论 | 第87-90页 |
| 结论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-93页 |
| 综述 | 第93-104页 |
| 参考文献 | 第100-104页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
