| 英文缩略词表 | 第8-11页 |
| 第一部分MANF对Aβ1-42诱导的神经毒性的抑制作用 | 第11-47页 |
| 中文摘要 | 第11-15页 |
| 英文摘要 | 第15-19页 |
| 1，引言 | 第19-21页 |
| 2，材料与方法 | 第21-31页 |
| 2.1 细胞株、引物、siRNA及质粒 | 第21页 |
| 2.2 实验动物 | 第21页 |
| 2.3 抗体 | 第21-22页 |
| 2.4 主要试剂 | 第22页 |
| 2.5 主要仪器与设备 | 第22-23页 |
| 2.6 主要试剂及溶液配方 | 第23-24页 |
| 2.7 细胞培养和药物干预 | 第24-25页 |
| 2.7.1 细胞培养 | 第24页 |
| 2.7.2 Aβ1-42寡聚体的制备 | 第24-25页 |
| 2.8 MTT法检测细胞存活率 | 第25页 |
| 2.9 PI染色检测细胞死亡率 | 第25页 |
| 2.10 小鼠脑组织切片处理 | 第25页 |
| 2.11 免疫组织化学 | 第25-26页 |
| 2.12 细胞免疫荧光 | 第26-27页 |
| 2.13 细胞转染 | 第27-28页 |
| 2.14 免疫印迹法检测蛋白的表达 | 第28-29页 |
| 2.14.1 蛋白质样品的制备 | 第28页 |
| 2.14.2 SDS-PAGE凝胶制备 | 第28-29页 |
| 2.14.3 上样和电泳分离 | 第29页 |
| 2.14.4 转膜 | 第29页 |
| 2.14.5 IB检测 | 第29页 |
| 2.15 MANF-siRNA的合成 | 第29-31页 |
| 2.15.1 合成小鼠MANF基因不同位点siRNA靶序列 | 第29-30页 |
| 2.15.2 检测MANF-si RNA转染效率 | 第30页 |
| 2.15.3 筛选有效的MANF-siRNA | 第30-31页 |
| 2.16 统计方法 | 第31页 |
| 3，结果 | 第31-42页 |
| 3.1 Aβ1-42诱导SH-SY5Y细胞损伤 | 第31-33页 |
| 3.2 Aβ1-42诱导神经细胞发生ER应激并诱导MANF表达上调 . 26 | 第33-35页 |
| 3.3 APP/PS1小鼠海马及大脑皮质神经元中MANF表达上调 .. 283.4 MANF对Aβ1-42神经毒性的抑制作用 | 第35-36页 |
| 3.4 MANF 对 Aβ1-42 神经毒性的抑制作用 | 第36-42页 |
| 3.4.1 验证MANF基因沉默 | 第36-37页 |
| 3.4.2 过表达或沉默MANF基因对ER应激相关蛋白及促凋亡蛋白的影响 | 第37-38页 |
| 3.4.3 MANF过表达减弱Aβ1-42 诱导的神经毒性 | 第38-40页 |
| 3.4.4 敲减内源性的MANF增加Aβ1-42 诱导的神经毒性 | 第40-42页 |
| 4,讨论 | 第42-47页 |
| 第二部分MANF对糖氧剥夺/再灌注诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用 | 第47-63页 |
| 中文摘要 | 第47-50页 |
| 英文摘要 | 第50-52页 |
| 1,引言 | 第52-53页 |
| 2,材料与方法 | 第53-55页 |
| 2.1 细胞株 | 第53页 |
| 2.2 抗体 | 第53页 |
| 2.3 主要试剂 | 第53页 |
| 2.4 主要仪器与设备 | 第53-54页 |
| 2.5 主要试剂及溶液配方 | 第54页 |
| 2.6 细胞培养和OGD/R干预 | 第54页 |
| 2.6.1 细胞培养 | 第54页 |
| 2.6.2 缺血/再灌注损伤细胞模型的建立 | 第54页 |
| 2.7 MTT | 第54页 |
| 2.8 PI染色 | 第54-55页 |
| 2.9 细胞免疫荧光 | 第55页 |
| 2.10 免疫印迹 | 第55页 |
| 2.11 统计方法 | 第55页 |
| 3,实验结果 | 第55-61页 |
| 3.1 重组人MANF改善OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞增殖活性损伤 | 第55-57页 |
| 3.2 重组人MANF抑制OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞死亡 | 第57-58页 |
| 3.3 OGD/R诱导的ER应激相关蛋白表达及MANF的作用 | 第58-59页 |
| 3.4 OGD/R诱导的促凋亡蛋白表达及MANF的作用 | 第59-61页 |
| 4,讨论 | 第61-63页 |
| 结论 | 第63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
| 个人简历 | 第69-70页 |
| 在学期间的研究成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 综述 | 第72-87页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
