| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-25页 |
| 1.1 叶球发育机理 | 第15-16页 |
| 1.1.1 植物器官分化学说 | 第15页 |
| 1.1.2 甘蓝的进化过程与叶球发育 | 第15-16页 |
| 1.2 植物叶片卷曲发育分子机制 | 第16-20页 |
| 1.2.1 叶片卷曲相关突变体研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.2 叶片皱缩或波浪卷曲研究进展 | 第17页 |
| 1.2.3 叶片极性发育研究现状 | 第17-18页 |
| 1.2.4 bHLH转录因子与植物叶片卷曲 | 第18-19页 |
| 1.2.5 生长素响应因子与植物叶片卷曲 | 第19-20页 |
| 1.3 植物转录组学研究现状 | 第20-22页 |
| 1.3.1 高通量测序技术 | 第20-21页 |
| 1.3.2 基因表达系列分析技术 | 第21页 |
| 1.3.3 基因芯片技术 | 第21-22页 |
| 1.4 两种常用基因功能研究策略 | 第22-25页 |
| 1.4.1 目的基因超量表达 | 第22-23页 |
| 1.4.2 反义抑制技术 | 第23-25页 |
| 第2章 引言 | 第25-27页 |
| 2.1 研究的目的与意义 | 第25页 |
| 2.2 研究内容 | 第25-26页 |
| 2.3 技术路线 | 第26-27页 |
| 第3章 基于转录组分析和qRT-PCR的甘蓝卷叶关联基因筛选 | 第27-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 3.1.2 主要生化试剂 | 第27页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 3.2 方法 | 第28-31页 |
| 3.2.1 用于转录组分析叶片形态学特征的观察与卷曲指数测定 | 第28页 |
| 3.2.2 甘蓝组织总RNA的提取 | 第28页 |
| 3.2.3 合成cDNA第一链 | 第28-29页 |
| 3.2.4 甘蓝转录组测序试验 | 第29页 |
| 3.2.5 甘蓝两类差异基因的表达分析与基因筛选 | 第29-31页 |
| 3.3 结果与分析 | 第31-39页 |
| 3.3.1 甘蓝不同时期叶片差异性分析 | 第31-32页 |
| 3.3.2 甘蓝总RNA质量检测 | 第32-34页 |
| 3.3.3 甘蓝转录组测序数据分析 | 第34-36页 |
| 3.3.4 基于转录组试验筛选的差异基因的qRT-PCR表达分析 | 第36-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39页 |
| 3.5 小结 | 第39-41页 |
| 第4章 甘蓝BoLH27和BoSF21编码基因的克隆与序列分析 | 第41-53页 |
| 4.1 材料 | 第41页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 4.1.2 菌株和载体 | 第41页 |
| 4.1.3 主要生化试剂 | 第41页 |
| 4.1.4 主要溶液及培养基 | 第41页 |
| 4.2 方法 | 第41-44页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第41-42页 |
| 4.2.2 甘蓝BoLH27和BoSF21的克隆 | 第42-43页 |
| 4.2.3 生物信息学分析 | 第43-44页 |
| 4.3 结果与分析 | 第44-51页 |
| 4.3.1 BoLH27 | 第44-48页 |
| 4.3.2 BoSF21 | 第48-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-52页 |
| 4.5 小结 | 第52-53页 |
| 第5章 植物表达载体构建与甘蓝遗传转化 | 第53-65页 |
| 5.1 材料 | 第53-54页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第53页 |
| 5.1.2 菌株与质粒 | 第53页 |
| 5.1.3 主要生化试剂 | 第53页 |
| 5.1.4 激素、抗生素和再生体系培养基 | 第53-54页 |
| 5.2 方法 | 第54-58页 |
| 5.2.1 植物表达载体的构建 | 第54-57页 |
| 5.2.2 甘蓝遗传转化 | 第57-58页 |
| 5.3 结果与分析 | 第58-62页 |
| 5.3.1 含BoLH27和BoSF21的正反义重组质粒的构建 | 第58-59页 |
| 5.3.2 含BoLH27和BoSF21的正反义重组质粒转化农杆菌 | 第59-60页 |
| 5.3.3 转基因甘蓝的获得 | 第60-62页 |
| 5.4 讨论 | 第62-63页 |
| 5.5 小结 | 第63-65页 |
| 第6章 甘蓝转基因植株的分子检测与表型分析 | 第65-73页 |
| 6.1 材料 | 第65页 |
| 6.2 方法 | 第65-66页 |
| 6.2.1 植物总DNA提取 | 第65页 |
| 6.2.2 转基因植株的PCR检测 | 第65-66页 |
| 6.2.3 转基因植株的荧光定量PCR | 第66页 |
| 6.3 结果与分析 | 第66-70页 |
| 6.3.1 转基因甘蓝gDNA PCR检测 | 第66-68页 |
| 6.3.2 转基因甘蓝的qRT-PCR表达分析 | 第68-69页 |
| 6.3.3 转基因甘蓝表型初步观察 | 第69-70页 |
| 6.4 讨论 | 第70-71页 |
| 6.5 小结 | 第71-72页 |
| 6.6 展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
| 附录 | 第87-93页 |
