摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
第1章 文献综述 | 第13-27页 |
1.1 植物自交不亲和性概述 | 第13-14页 |
1.2 SSI的分子研究及其相关调控网络 | 第14-21页 |
1.2.1 S位点上的连锁基因 | 第14-17页 |
1.2.2 非S位点连锁的相关基因 | 第17-19页 |
1.2.3 其他影响因子 | 第19页 |
1.2.4 SSI的信号传导网络 | 第19-21页 |
1.3 自交不亲和性的鉴定方法 | 第21-22页 |
1.3.1 荧光显微法 | 第21-22页 |
1.3.2 等电聚焦电泳法 | 第22页 |
1.3.3 亲和指数法 | 第22页 |
1.4 反义RNA干扰和RNA干扰简介 | 第22-23页 |
1.4.1 反义RNA干扰技术 | 第22-23页 |
1.4.2 RNA干扰 | 第23页 |
1.5 Cre/loxP重组系统 | 第23-25页 |
1.6 乙醇诱导系统 | 第25-27页 |
第2章 引言 | 第27-31页 |
2.1 研究的目的与意义 | 第27页 |
2.2 研究的思路与技术路线 | 第27-29页 |
2.2.1 研究思路 | 第27-28页 |
2.2.2 技术路线 | 第28-29页 |
2.3 研究内容 | 第29-31页 |
2.3.1 植物表达载体的构建 | 第29页 |
2.3.2 农杆菌介导转化法获得转基因植株 | 第29-30页 |
2.3.3 转基因植株的自交不亲和鉴定 | 第30页 |
2.3.4 乙醇诱导删除的T_1代转基因植株研究及鉴定 | 第30-31页 |
第3章 MLPK反义基因对甘蓝自交不亲和性的影响 | 第31-47页 |
3.1 试验材料和用具 | 第31-32页 |
3.1.1 植物材料 | 第31页 |
3.1.2 菌株与质粒 | 第31页 |
3.1.3 主要试剂 | 第31页 |
3.1.4 培养基与溶液 | 第31-32页 |
3.1.5 主要仪器 | 第32页 |
3.2 试验方法 | 第32-39页 |
3.2.1 植物表达载体的构建 | 第32-35页 |
3.2.2 转基因植株的获得 | 第35-37页 |
3.2.3 转基因植株的自交不亲和性鉴定 | 第37-39页 |
3.3 结果与分析 | 第39-45页 |
3.3.1 pCABarMLPK植物表达载体的构建 | 第39-40页 |
3.3.2 农杆菌介导转化法获得转基因植株 | 第40-41页 |
3.3.3 pCABarMLPK转基因甘蓝的PCR鉴定 | 第41-42页 |
3.3.4 pCABarMLPK转基因甘蓝自交不亲和性的鉴定 | 第42-45页 |
3.4 讨论 | 第45-46页 |
3.5 小结 | 第46-47页 |
第4章 SLG-RNAi干扰基因对甘蓝自交不亲和性的影响 | 第47-55页 |
4.1 试验材料和用具 | 第47-48页 |
4.1.1 试验材料 | 第47页 |
4.1.2 主要试剂 | 第47页 |
4.1.3 培养基与溶液 | 第47-48页 |
4.1.4 主要仪器 | 第48页 |
4.2 试验方法 | 第48-49页 |
4.2.1 转基因植株的获得 | 第48页 |
4.2.2 转基因植株的自交不亲和性鉴定 | 第48-49页 |
4.3 结果与分析 | 第49-53页 |
4.3.1 pCABarSLGi转基因甘蓝的PCR鉴定 | 第49-50页 |
4.3.2 pCABarSLGi转基因甘蓝自交不亲和性的鉴定 | 第50-53页 |
4.4 讨论 | 第53-54页 |
4.5 小结 | 第54-55页 |
第5章 基于乙醇诱导表达和Cre/loxP重组删除系统的甘蓝自交不亲和性的人工调控 | 第55-77页 |
5.1 试验材料和用具 | 第55-56页 |
5.1.1 试验材料 | 第55页 |
5.1.2 主要试剂 | 第55页 |
5.1.3 培养基与溶液 | 第55-56页 |
5.1.4 主要仪器 | 第56页 |
5.2 试验方法 | 第56-59页 |
5.2.1 转基因植株的获得 | 第56页 |
5.2.2 转基因植株的自交不亲和性鉴定 | 第56-57页 |
5.2.3 转基因T_1代植株乙醇诱导删除的研究及鉴定 | 第57-59页 |
5.3 结果与分析 | 第59-74页 |
5.3.1 pCABaralcRSLGi植物表达载体 | 第59页 |
5.3.2 pCABaralcRSLGi转基因甘蓝的PCR鉴定 | 第59-60页 |
5.3.3 pCABaralcRSLGi转基因甘蓝自交不亲和性的鉴定 | 第60-64页 |
5.3.4 转基因T_1代植株乙醇诱导删除的研究及鉴定 | 第64-74页 |
5.4 讨论 | 第74-75页 |
5.5 小结 | 第75-77页 |
第6章 结论及创新点 | 第77-79页 |
6.1 结论 | 第77页 |
6.1.1 MLPK反义表达可部分打破甘蓝自交不亲和性 | 第77页 |
6.1.2 SLG-RNAi干扰基因表达可打破甘蓝自交不亲和性 | 第77页 |
6.1.3 基于乙醇诱导表达和Cre/loxP重组删除系统的甘蓝自交不亲和性的人工调控 | 第77页 |
6.2 创新点 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-87页 |
附录 | 第87-101页 |
附录1 pCABaralcRSLGi转基因甘蓝植株Bar基因的PCR鉴定 | 第87-89页 |
附录2 pCABaralcRSLGi转基因甘蓝植株SLG-RNAi基因的PCR鉴定 | 第89-91页 |
附录3 T_1代pCABaralcRSLGi转基因甘蓝植株Bar基因的PCR鉴定 | 第91-92页 |
附录4 T_1代pCABaralcRSLGi转基因甘蓝植SLG-RNAi基因的PCR鉴定 | 第92-93页 |
附录5 T_1代pCABaralcRSLGi转基因甘蓝植株PCR鉴定(Bar基因) | 第93-94页 |
附录6 T_1代pCABaralcRSLGi转基因甘蓝植株PCR鉴定(SLG-RNAi基因) | 第94-95页 |
附录7 T_1代pCABaralcRSLGi转基因甘蓝植株叶片离体PPT鉴定 | 第95-98页 |
附录8 删除残余序列 | 第98-99页 |
附录9 缩写词 | 第99-101页 |
致谢 | 第101-103页 |
在学期间发表的文章、参加项目及会议情况 | 第103页 |