摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-10页 |
材料与方法 | 第10-16页 |
1 菌株与细胞株 | 第10页 |
2 质粒 | 第10页 |
3 细胞培养试剂 | 第10页 |
4 分子生物学试剂和化学试剂 | 第10页 |
5 抗体 | 第10-11页 |
6 主要实验仪器 | 第11页 |
7 常用溶液配方 | 第11页 |
8 慢病毒的包装 | 第11-12页 |
9 流式细胞分选术 | 第12页 |
10 western blot印记 | 第12-13页 |
11 荧光实时定量RT-PCR | 第13-14页 |
11.1 提取RNA | 第13页 |
11.2 反转录 | 第13页 |
11.3 Real-Time PCR | 第13-14页 |
12 成管实验 | 第14页 |
13 成球实验 | 第14页 |
14 免疫荧光 | 第14-16页 |
结果 | 第16-26页 |
1 EK在乳腺癌细胞向乳腺癌干细胞转化中的作用 | 第16-18页 |
1.1 高表达DEK稳定细胞株的获得 | 第16页 |
1.2 高表达DEK稳定细胞株干细胞含量的测定 | 第16-17页 |
1.3 高表达DEK稳定细胞株形成乳腺微球体 | 第17-18页 |
2 DEK调控nanog的表达 | 第18-20页 |
2.1 DEK干性基因转录水平的筛选 | 第18页 |
2.2 DEK干性基因蛋白水平的筛选 | 第18-19页 |
2.3 高表达DEK促进nanog在蛋白及转录水平的表达 | 第19-20页 |
3 DEK能促进内皮细胞marker的表达 | 第20-22页 |
3.1 高表达DEK促进内皮细胞marker在转录水平的表达 | 第20页 |
3.2 内皮细胞marker在细胞中的定位 | 第20-21页 |
3.3 高表达DEK促进内皮细胞marker在蛋白水平的表达 | 第21页 |
3.4 高表达DEK可以调控内皮细胞在体外形成脉管样结构 | 第21-22页 |
4 nanog siRNA调控DEK介导的乳腺癌细胞向内皮细胞转化 | 第22-26页 |
4.1 敲低nanog影响DEK蛋白及转录水平的表达 | 第22页 |
4.2 敲低nanog影响DEK内皮细胞marker的表达 | 第22-24页 |
4.3 敲低nanog影响DEK内皮细胞marker在细胞中的定位 | 第24页 |
4.4 敲低nanog影响内皮细胞在体外形成脉管样结构 | 第24-26页 |
讨论 | 第26-29页 |
结论 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-32页 |
综述 | 第32-43页 |
综述参考文献 | 第39-43页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
缩略词表 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |