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碳纳米管载药系统构建及其对草鱼出血病防控研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 文献综述第14-24页
    1.1 草鱼出血病研究历史第14页
    1.2 草鱼出血病流行病学研究第14页
    1.3 草鱼呼肠孤病毒生物学研究第14-16页
        1.3.1 草鱼呼肠孤病毒形态特征第14-15页
        1.3.2 草鱼呼肠孤病毒理化特性第15页
        1.3.3 草鱼呼肠孤病毒细胞培养和感染特征第15页
        1.3.4 草鱼呼肠孤病毒分子生物学特征第15页
        1.3.5 草鱼呼肠孤病毒转录和翻译第15-16页
    1.4 草鱼呼肠孤病毒检测第16页
    1.5 草鱼出血病防控技术研究进展第16-17页
        1.5.1 草鱼出血病药物防控第16页
        1.5.2 草鱼出血病疫苗预防第16-17页
        1.5.3 疫苗免疫途径研究第17页
    1.6 碳纳米管纳米载体研究第17-20页
        1.6.1 碳纳米管作为药物载体研究第18页
        1.6.2 碳纳米管作为多肽和蛋白质载体研究第18-19页
        1.6.3 碳纳米管作为基因载体研究第19-20页
    1.7 碳纳米管跨膜转运第20-21页
        1.7.1 直接穿透细胞膜第20页
        1.7.2 能量介导的内吞作用第20页
        1.7.3 不依赖能量的非内吞作用机制第20-21页
        1.7.4 穿过脂双层的扩散作用第21页
    1.8 碳纳米管毒性研究第21-23页
        1.8.1 碳纳米管细胞毒性第21页
        1.8.2 碳纳米管动物毒性第21-23页
    1.9 选题的目的和意义第23-24页
第二章 草鱼无特定病原携带苗种研究第24-48页
    2.1 材料与方法第25-30页
        2.1.1 碳纳米管样品第25页
        2.1.2 碳纳米管结构修饰第25-26页
        2.1.3 抗病毒药物修饰第26页
        2.1.4 碳纳米管载药系统构建第26页
        2.1.5 碳纳米管载药系统合成效果检测第26-27页
        2.1.6 实验病毒与动物第27页
        2.1.7 病毒感染与抗病毒评价第27-29页
        2.1.8 药物代谢动力学第29-30页
    2.2 实验结果与分析第30-46页
        2.2.1 碳纳米管载药系统合成效果检测第30-34页
        2.2.2 碳纳米管载三氮唑核苷系统抗病毒效果评价第34-37页
        2.2.3 碳纳米管载吗啉胍系统抗病毒效果评价第37-41页
        2.2.4 碳纳米管载药系统在草鱼仔鱼体内药物代谢动力学第41-42页
        2.2.5 碳纳米管载药系统在草鱼鱼种体内药物代谢动力学第42-46页
    2.3 讨论第46-47页
    2.4 小结第47-48页
第三章 碳纳米管载亚单位疫苗免疫效果研究第48-68页
    3.1 材料与方法第49-53页
        3.1.1 实验病毒与动物第49页
        3.1.2 VP7目的基因扩增第49页
        3.1.3 VP7蛋白原核表达菌株构建第49页
        3.1.4 VP7蛋白诱导表达第49-50页
        3.1.5 VP7蛋白制备第50页
        3.1.6 碳纳米管载VP7亚单位疫苗系统构建第50页
        3.1.7 碳纳米管载VP7亚单位疫苗系统合成效果检测第50-51页
        3.1.8 草鱼VP7亚单位疫苗免疫第51页
        3.1.9 免疫抗体效价测定第51-52页
        3.1.10免疫相关生理指标测定第52页
        3.1.11免疫相关基因表达测定第52-53页
        3.1.12免疫草鱼病毒攻毒实验第53页
    3.2 实验结果与分析第53-67页
        3.2.1 重组VP7蛋白表达第53-54页
        3.2.2 碳纳米管载VP7亚单位疫苗系统合成效果检测第54-56页
        3.2.3 免疫草鱼抗体效价测定第56页
        3.2.4 免疫相关生理指标测定第56-63页
        3.2.5 免疫相关基因表达测定第63-65页
        3.2.6 免疫保护效果第65-67页
    3.3 讨论第67页
    3.4 小结第67-68页
第四章 碳纳米管载核酸疫苗免疫效果研究第68-84页
    4.1 材料与方法第68-71页
        4.1.1 实验病毒与动物第68页
        4.1.2 VP7目的基因扩增第68-69页
        4.1.3 重组真核表达质粒构建第69页
        4.1.4 核酸疫苗制备第69页
        4.1.5 碳纳米管载核酸疫苗系统构建第69页
        4.1.6 草鱼核酸疫苗免疫第69-70页
        4.1.7 重组质粒检测第70页
        4.1.8 重组质粒表达检测第70页
        4.1.9 免疫草鱼抗体效价测定第70页
        4.1.10免疫相关生理指标测定第70页
        4.1.11免疫相关基因表达测定第70-71页
        4.1.12免疫草鱼病毒攻毒实验第71页
    4.2 实验结果与分析第71-83页
        4.2.1 重组质粒构建第71-72页
        4.2.2 肌肉组织中重组质粒检测第72-74页
        4.2.3 肌肉组织中重组质粒表达检测第74页
        4.2.4 免疫草鱼抗体效价测定第74-76页
        4.2.5 免疫相关生理指标测定第76-78页
        4.2.6 免疫相关基因表达测定第78-81页
        4.2.7 免疫保护效果第81-83页
    4.3 讨论第83页
    4.4 小结第83-84页
第五章 碳纳米管细胞跨膜及代谢作用研究第84-104页
    5.1 材料与方法第85-88页
        5.1.1 细胞培养第85页
        5.1.2 碳纳米管荧光标记第85页
        5.1.3 碳纳米管细胞跨膜流式细胞仪分析第85-86页
        5.1.4 碳纳米管细胞跨膜荧光分析第86-87页
        5.1.5 碳纳米管细胞代谢分析第87-88页
    5.2 实验结果与分析第88-102页
        5.2.1 碳纳米管细胞跨膜流式细胞仪分析第88-90页
        5.2.2 碳纳米管细胞跨膜荧光分析第90-95页
        5.2.3 碳纳米管细胞代谢荧光观察第95-98页
        5.2.4 碳纳米管细胞代谢拉曼光谱检测第98-101页
        5.2.5 碳纳米管细胞代谢电镜观察第101-102页
    5.3 讨论第102-103页
    5.4 小结第103-104页
第六章 碳纳米管对鱼类安全性评价第104-122页
    6.1 材料与方法第104-108页
        6.1.1 实验动物第104-105页
        6.1.2 稀有鮈鲫人工催产授精第105页
        6.1.3 碳纳米管修饰第105页
        6.1.4 碳纳米管结构分析第105页
        6.1.5 稀有鮈鲫发育毒性评价第105-106页
        6.1.6 形态与行为学分析第106页
        6.1.7 生理活性指标测定第106-107页
        6.1.8 DNA损伤第107页
        6.1.9 基因表达分析第107-108页
        6.1.10碳纳米管仔鱼体内代谢第108页
    6.2 实验结果与分析第108-119页
        6.2.1 碳纳米管结构分析第108-110页
        6.2.2 毒性观测第110页
        6.2.3 仔鱼形态学分析第110-111页
        6.2.4 生理指标测定第111-115页
        6.2.5 相关基因表达变化第115-116页
        6.2.6 碳纳米管仔鱼体内代谢第116-119页
    6.3 讨论第119-120页
    6.4 小结第120-122页
结论第122-123页
参考文献第123-137页
附录第137-139页
致谢第139-140页
作者简介第140-142页

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