摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 草鱼出血病研究历史 | 第14页 |
1.2 草鱼出血病流行病学研究 | 第14页 |
1.3 草鱼呼肠孤病毒生物学研究 | 第14-16页 |
1.3.1 草鱼呼肠孤病毒形态特征 | 第14-15页 |
1.3.2 草鱼呼肠孤病毒理化特性 | 第15页 |
1.3.3 草鱼呼肠孤病毒细胞培养和感染特征 | 第15页 |
1.3.4 草鱼呼肠孤病毒分子生物学特征 | 第15页 |
1.3.5 草鱼呼肠孤病毒转录和翻译 | 第15-16页 |
1.4 草鱼呼肠孤病毒检测 | 第16页 |
1.5 草鱼出血病防控技术研究进展 | 第16-17页 |
1.5.1 草鱼出血病药物防控 | 第16页 |
1.5.2 草鱼出血病疫苗预防 | 第16-17页 |
1.5.3 疫苗免疫途径研究 | 第17页 |
1.6 碳纳米管纳米载体研究 | 第17-20页 |
1.6.1 碳纳米管作为药物载体研究 | 第18页 |
1.6.2 碳纳米管作为多肽和蛋白质载体研究 | 第18-19页 |
1.6.3 碳纳米管作为基因载体研究 | 第19-20页 |
1.7 碳纳米管跨膜转运 | 第20-21页 |
1.7.1 直接穿透细胞膜 | 第20页 |
1.7.2 能量介导的内吞作用 | 第20页 |
1.7.3 不依赖能量的非内吞作用机制 | 第20-21页 |
1.7.4 穿过脂双层的扩散作用 | 第21页 |
1.8 碳纳米管毒性研究 | 第21-23页 |
1.8.1 碳纳米管细胞毒性 | 第21页 |
1.8.2 碳纳米管动物毒性 | 第21-23页 |
1.9 选题的目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 草鱼无特定病原携带苗种研究 | 第24-48页 |
2.1 材料与方法 | 第25-30页 |
2.1.1 碳纳米管样品 | 第25页 |
2.1.2 碳纳米管结构修饰 | 第25-26页 |
2.1.3 抗病毒药物修饰 | 第26页 |
2.1.4 碳纳米管载药系统构建 | 第26页 |
2.1.5 碳纳米管载药系统合成效果检测 | 第26-27页 |
2.1.6 实验病毒与动物 | 第27页 |
2.1.7 病毒感染与抗病毒评价 | 第27-29页 |
2.1.8 药物代谢动力学 | 第29-30页 |
2.2 实验结果与分析 | 第30-46页 |
2.2.1 碳纳米管载药系统合成效果检测 | 第30-34页 |
2.2.2 碳纳米管载三氮唑核苷系统抗病毒效果评价 | 第34-37页 |
2.2.3 碳纳米管载吗啉胍系统抗病毒效果评价 | 第37-41页 |
2.2.4 碳纳米管载药系统在草鱼仔鱼体内药物代谢动力学 | 第41-42页 |
2.2.5 碳纳米管载药系统在草鱼鱼种体内药物代谢动力学 | 第42-46页 |
2.3 讨论 | 第46-47页 |
2.4 小结 | 第47-48页 |
第三章 碳纳米管载亚单位疫苗免疫效果研究 | 第48-68页 |
3.1 材料与方法 | 第49-53页 |
3.1.1 实验病毒与动物 | 第49页 |
3.1.2 VP7目的基因扩增 | 第49页 |
3.1.3 VP7蛋白原核表达菌株构建 | 第49页 |
3.1.4 VP7蛋白诱导表达 | 第49-50页 |
3.1.5 VP7蛋白制备 | 第50页 |
3.1.6 碳纳米管载VP7亚单位疫苗系统构建 | 第50页 |
3.1.7 碳纳米管载VP7亚单位疫苗系统合成效果检测 | 第50-51页 |
3.1.8 草鱼VP7亚单位疫苗免疫 | 第51页 |
3.1.9 免疫抗体效价测定 | 第51-52页 |
3.1.10免疫相关生理指标测定 | 第52页 |
3.1.11免疫相关基因表达测定 | 第52-53页 |
3.1.12免疫草鱼病毒攻毒实验 | 第53页 |
3.2 实验结果与分析 | 第53-67页 |
3.2.1 重组VP7蛋白表达 | 第53-54页 |
3.2.2 碳纳米管载VP7亚单位疫苗系统合成效果检测 | 第54-56页 |
3.2.3 免疫草鱼抗体效价测定 | 第56页 |
3.2.4 免疫相关生理指标测定 | 第56-63页 |
3.2.5 免疫相关基因表达测定 | 第63-65页 |
3.2.6 免疫保护效果 | 第65-67页 |
3.3 讨论 | 第67页 |
3.4 小结 | 第67-68页 |
第四章 碳纳米管载核酸疫苗免疫效果研究 | 第68-84页 |
4.1 材料与方法 | 第68-71页 |
4.1.1 实验病毒与动物 | 第68页 |
4.1.2 VP7目的基因扩增 | 第68-69页 |
4.1.3 重组真核表达质粒构建 | 第69页 |
4.1.4 核酸疫苗制备 | 第69页 |
4.1.5 碳纳米管载核酸疫苗系统构建 | 第69页 |
4.1.6 草鱼核酸疫苗免疫 | 第69-70页 |
4.1.7 重组质粒检测 | 第70页 |
4.1.8 重组质粒表达检测 | 第70页 |
4.1.9 免疫草鱼抗体效价测定 | 第70页 |
4.1.10免疫相关生理指标测定 | 第70页 |
4.1.11免疫相关基因表达测定 | 第70-71页 |
4.1.12免疫草鱼病毒攻毒实验 | 第71页 |
4.2 实验结果与分析 | 第71-83页 |
4.2.1 重组质粒构建 | 第71-72页 |
4.2.2 肌肉组织中重组质粒检测 | 第72-74页 |
4.2.3 肌肉组织中重组质粒表达检测 | 第74页 |
4.2.4 免疫草鱼抗体效价测定 | 第74-76页 |
4.2.5 免疫相关生理指标测定 | 第76-78页 |
4.2.6 免疫相关基因表达测定 | 第78-81页 |
4.2.7 免疫保护效果 | 第81-83页 |
4.3 讨论 | 第83页 |
4.4 小结 | 第83-84页 |
第五章 碳纳米管细胞跨膜及代谢作用研究 | 第84-104页 |
5.1 材料与方法 | 第85-88页 |
5.1.1 细胞培养 | 第85页 |
5.1.2 碳纳米管荧光标记 | 第85页 |
5.1.3 碳纳米管细胞跨膜流式细胞仪分析 | 第85-86页 |
5.1.4 碳纳米管细胞跨膜荧光分析 | 第86-87页 |
5.1.5 碳纳米管细胞代谢分析 | 第87-88页 |
5.2 实验结果与分析 | 第88-102页 |
5.2.1 碳纳米管细胞跨膜流式细胞仪分析 | 第88-90页 |
5.2.2 碳纳米管细胞跨膜荧光分析 | 第90-95页 |
5.2.3 碳纳米管细胞代谢荧光观察 | 第95-98页 |
5.2.4 碳纳米管细胞代谢拉曼光谱检测 | 第98-101页 |
5.2.5 碳纳米管细胞代谢电镜观察 | 第101-102页 |
5.3 讨论 | 第102-103页 |
5.4 小结 | 第103-104页 |
第六章 碳纳米管对鱼类安全性评价 | 第104-122页 |
6.1 材料与方法 | 第104-108页 |
6.1.1 实验动物 | 第104-105页 |
6.1.2 稀有鮈鲫人工催产授精 | 第105页 |
6.1.3 碳纳米管修饰 | 第105页 |
6.1.4 碳纳米管结构分析 | 第105页 |
6.1.5 稀有鮈鲫发育毒性评价 | 第105-106页 |
6.1.6 形态与行为学分析 | 第106页 |
6.1.7 生理活性指标测定 | 第106-107页 |
6.1.8 DNA损伤 | 第107页 |
6.1.9 基因表达分析 | 第107-108页 |
6.1.10碳纳米管仔鱼体内代谢 | 第108页 |
6.2 实验结果与分析 | 第108-119页 |
6.2.1 碳纳米管结构分析 | 第108-110页 |
6.2.2 毒性观测 | 第110页 |
6.2.3 仔鱼形态学分析 | 第110-111页 |
6.2.4 生理指标测定 | 第111-115页 |
6.2.5 相关基因表达变化 | 第115-116页 |
6.2.6 碳纳米管仔鱼体内代谢 | 第116-119页 |
6.3 讨论 | 第119-120页 |
6.4 小结 | 第120-122页 |
结论 | 第122-123页 |
参考文献 | 第123-137页 |
附录 | 第137-139页 |
致谢 | 第139-140页 |
作者简介 | 第140-142页 |