| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要符号对照表 | 第12-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 多杀性巴氏杆菌 | 第13-15页 |
| 1.2 OmpH的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3 细胞培养技术的研究 | 第17-18页 |
| 1.3.1 细胞培养 | 第17页 |
| 1.3.2 细胞生命周期性变化 | 第17-18页 |
| 1.3.3 细胞培养的环境与生长条件 | 第18页 |
| 1.4 细胞培养技术应用的研究 | 第18-21页 |
| 1.4.1 细胞培养发展史 | 第18页 |
| 1.4.2 细胞培养技术的应用 | 第18-21页 |
| 1.5 气管-支气管黏膜上皮细胞 | 第21-22页 |
| 1.6 小鼠腹腔巨噬细胞 | 第22-24页 |
| 第2章 血清抵抗性试验 | 第24-27页 |
| 2.1 材料 | 第24页 |
| 2.1.1 菌株与血清 | 第24页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第24页 |
| 2.2 方法 | 第24-25页 |
| 2.2.1 P0910菌株的培养 | 第24页 |
| 2.2.2 牦牛血清的灭活 | 第24页 |
| 2.2.3 血清抵抗性试验 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25页 |
| 2.3.1 P0910株对牦牛血清的抵抗性分析 | 第25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-27页 |
| 第3章 制备重组OmpH蛋白 | 第27-41页 |
| 3.1 材料 | 第27-29页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第27页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 3.1.3 常用溶液的配置 | 第27-29页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第29页 |
| 3.2 方法 | 第29-34页 |
| 3.2.1 ompH引物设计 | 第29-30页 |
| 3.2.2 菌株的培养 | 第30页 |
| 3.2.3 P0910基因组的提取 | 第30页 |
| 3.2.4 PCR扩增目的条带 | 第30-31页 |
| 3.2.5 PCR产物ompH片段的回收 | 第31页 |
| 3.2.6 构建pET-28a-ompH重组质粒 | 第31-33页 |
| 3.2.7 重组质粒pET-28a-ompH的PCR鉴定 | 第33页 |
| 3.2.8 重组质粒pET-28a-ompH的小量提取 | 第33-34页 |
| 3.2.9 重组质粒pET-28a-ompH的表达 | 第34页 |
| 3.2.10 菌体破碎与Ni柱纯化 | 第34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-39页 |
| 3.3.1 ompH基因PCR扩增及产物胶回收 | 第34-35页 |
| 3.3.2 重组质粒的构建图 | 第35-36页 |
| 3.3.3 pET-28a载体的反向PCR扩增 | 第36-37页 |
| 3.3.4 重组质粒的PCR鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3.5 序列测定 | 第38页 |
| 3.3.6 重组质粒pET-28a-ompH的表达 | 第38-39页 |
| 3.3.7 Ni柱纯化 | 第39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第4章 制备重组OmpH抗血清 | 第41-45页 |
| 4.1 材料 | 第41页 |
| 4.1.2 实验动物与菌株 | 第41页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第41页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第41页 |
| 4.2 方法 | 第41-42页 |
| 4.2.1 动物免疫 | 第41页 |
| 4.2.2 抗血清免疫原性的检测 | 第41-42页 |
| 4.3 结果与分析 | 第42-43页 |
| 4.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第5章 吞噬试验 | 第45-50页 |
| 5.1 材料 | 第45页 |
| 5.1.1 实验动物与菌株 | 第45页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第45页 |
| 5.2 方法 | 第45-47页 |
| 5.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养 | 第45-46页 |
| 5.2.2 H.E.染色 | 第46页 |
| 5.2.3 P0910菌株培养 | 第46页 |
| 5.2.4 吞噬能力的测定 | 第46-47页 |
| 5.3 结果与分析 | 第47-49页 |
| 5.3.1 巨噬细胞的形态学鉴定 | 第47页 |
| 5.3.2 H.E.染色 | 第47-48页 |
| 5.3.3 小鼠腹腔巨噬细胞对P0910株的吞噬作用 | 第48-49页 |
| 5.4 讨论 | 第49-50页 |
| 第6章 牦牛支气管黏膜上皮细胞的分离培养及黏附模型的建立 | 第50-64页 |
| 6.1 牦牛支气管黏膜上皮细胞的分离培养与鉴定 | 第50-57页 |
| 6.1.1 材料 | 第50-51页 |
| 6.1.2 方法 | 第51-53页 |
| 6.1.3 结果与分析 | 第53-57页 |
| 6.2 P0910株对牦牛支气管黏膜上皮细胞粘附能力的研究 | 第57-64页 |
| 6.2.1 材料 | 第57页 |
| 6.2.2 方法 | 第57-58页 |
| 6.2.3 结果与分析 | 第58-62页 |
| 6.2.4 讨论 | 第62-64页 |
| 全文总结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |
