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磷脂酶D催化磷脂酰基转移合成磷脂酰丝氨酸反应的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第10-23页
    1.1 磷脂酰丝氨酸的简介第10-18页
        1.1.1 细胞膜中脂质的多样性第10-12页
        1.1.2 磷脂酰丝氨酸的分子结构和性质第12页
        1.1.3 磷脂酰丝氨酸的生理代谢功能第12-15页
        1.1.4 磷脂酰丝氨酸的用途第15-16页
        1.1.5 磷脂酰丝氨酸的制备第16-17页
        1.1.6 磷脂酰丝氨酸分析方法的研究第17-18页
    1.2 磷脂酶D综述第18-21页
        1.2.1 磷脂酶D的简介第19页
        1.2.2 磷脂酶D的催化机理第19-20页
        1.2.3 磷脂酶D对底物的识别第20-21页
        1.2.4 磷脂酶D的特异性第21页
        1.2.5 磷脂酶D的稳定性第21页
    1.3 课题研究目的和内容第21-23页
        1.3.1 研究目的第21-22页
        1.3.2 研究内容第22-23页
第二章 研究方法第23-35页
    2.1 实验设备与试剂第23-24页
        2.1.1 主要实验试剂第23-24页
        2.1.2 主要实验设备第24页
    2.2 游离磷脂酶D的制备第24-28页
        2.2.1 各种培养基的配方及制备过程第24-25页
        2.2.2 游离磷脂酶D的制备第25页
        2.2.3 游离磷脂酶D的纯化第25页
        2.2.4 磷脂酶D活力的测定第25-26页
        2.2.5 蛋白质含量的测定第26-28页
    2.3 磷脂酶D的固定化第28-29页
        2.3.1 固定化磷脂酶D的制备第28页
        2.3.2 固定化磷脂酶D的转磷脂酰基活力测定第28-29页
        2.3.3 固定化磷脂酶D的评价第29页
        2.3.4 固定化磷脂酶D的耐热性第29页
        2.3.5 固定化磷脂酶D的重复使用第29页
        2.3.6 固定化磷脂酶D的保存稳定性第29页
    2.4 磷脂酰丝氨酸的制备及纯化第29-33页
        2.4.1 磷脂酶D催化大豆磷脂的转磷脂酰基反应第29-30页
        2.4.2 产物磷脂酰丝氨酸的检测第30-31页
        2.4.3 磷脂浓度的测定第31-33页
        2.4.4 产物磷脂酰丝氨酸的纯化第33页
    2.5 磷脂酶D催化的酶促反应动力学第33页
        2.5.1 有抑制剂的磷脂酶D的催化反应第33页
        2.5.2 转磷脂酰基反应速率的测定方法第33页
        2.5.3 抑制类型的判断方法第33页
    2.6 本章小结第33-35页
第三章 游离磷脂酶D催化大豆磷脂合成磷脂酰丝氨酸的反应条件研究第35-50页
    3.1 磷脂酶D相关参数的测定第36页
        3.1.1 酶液中蛋白质含量的测定第36页
        3.1.2 磷脂酶D的活力第36页
    3.2 产物磷脂酰丝氨酸的检测第36-37页
        3.2.1 产物磷脂酰丝氨酸的定性分析第36-37页
        3.2.2 产物磷脂酰丝氨酸的定量分析第37页
    3.3 磷脂酶D的转磷脂酰基反应合成PS的反应研究第37-49页
        3.3.1 有机溶剂对大豆磷脂合成PS反应中各组分含量的影响第37-39页
        3.3.2 底物摩尔比对大豆磷脂合成PS反应中各组分含量的影响第39-42页
        3.3.3 pH对大豆磷脂合成PS反应中各组分含量的影响第42-44页
        3.3.4 两相体积比对大豆磷脂合成PS反应中各组分含量的影响第44-47页
        3.3.5 温度对大豆磷脂合成PS反应中各组分含量的影响第47-49页
    3.4 本章小结第49-50页
第四章 磷脂酶D催化磷脂酰胆碱反应的抑制动力学研究第50-58页
    4.1 磷脂酶D催化反应的抑制动力学导论第50-53页
    4.2 酶促反应的抑制动力学分析第53-57页
        4.2.1 底物磷脂酰胆碱的浓度对反应动力学的影响第53-54页
        4.2.2 抑制剂胆碱的浓度对反应动力学的影响第54-55页
        4.2.3 抑制剂存在时的酶反应动力学第55-57页
    4.3 本章小结第57-58页
第五章 固定化磷脂酶D制备磷脂酰丝氨酸的反应研究第58-65页
    5.1 固定化磷脂酶D催化合成磷脂酰丝氨酸第58-60页
        5.1.1 固定化PLD的耐热性实验第58页
        5.1.2 固定化PLD的操作稳定性实验第58-59页
        5.1.3 固定化PLD的保存稳定性实验第59页
        5.1.4 固定化PLD制备磷脂酰丝氨酸实验第59页
        5.1.5 反复分批式反应制备磷脂酰丝氨酸实验第59-60页
    5.2 结果与讨论第60-64页
        5.2.1 固定化PLD的耐热性分析第60页
        5.2.2 固定化PLD的操作稳定性分析第60-61页
        5.2.3 固定化PLD的保存稳定性分析第61-62页
        5.2.4 固定化磷脂酶D制备PS分析第62-63页
        5.2.5 反复分批式反应制备磷脂酰丝氨酸分析第63-64页
    5.3 本章小结第64-65页
第六章 结论与展望第65-67页
    6.1 本文结论第65-66页
    6.2 创新点第66页
    6.3 展望第66-67页
参考文献第67-73页
攻读硕士期间科研成果第73-74页
致谢第74页

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