摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-14页 |
1.1 β-丙氨酸的概述 | 第8-10页 |
1.1.1 β-丙氨酸的理化性质 | 第8页 |
1.1.2 β-丙氨酸的应用及市场需求 | 第8-9页 |
1.1.3 β-氨基丙酸的制备与生产 | 第9-10页 |
1.2 大肠杆菌代谢调节策略 | 第10-12页 |
1.2.1 切断支路代谢 | 第10页 |
1.2.2 增加前体物的合成 | 第10-11页 |
1.2.3 辅因子的平衡 | 第11-12页 |
1.2.4 启动子的改造 | 第12页 |
1.3 立题依据和意义 | 第12页 |
1.4 主要研究内容 | 第12-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-26页 |
2.1 实验材料 | 第14-18页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第14-15页 |
2.1.2 实验所用引物 | 第15-16页 |
2.1.3 主要培养基 | 第16页 |
2.1.4 主要材料 | 第16-17页 |
2.1.5 主要仪器 | 第17-18页 |
2.2 重组质粒及菌株构建方法 | 第18-23页 |
2.2.1 质粒的构建和表达方法 | 第18-21页 |
2.2.2 大肠杆菌Red基因敲除方法 | 第21-23页 |
2.2.3 染色体整合方法 | 第23页 |
2.3 菌株培养方法 | 第23-24页 |
2.3.1 摇瓶培养方法 | 第23-24页 |
2.3.2 发酵罐培养方法 | 第24页 |
2.4 分析方法 | 第24-26页 |
2.4.1 菌体浓度(OD600)的测定 | 第24页 |
2.4.2 葡萄糖浓度的测定 | 第24-25页 |
2.4.3 甘油的测定方法 | 第25页 |
2.4.4 β-丙氨酸测定方法 | 第25-26页 |
第三章 结果与讨论 | 第26-42页 |
3.1 重组大肠杆菌厌氧发酵合成 β-丙氨酸的研究 | 第26-34页 |
3.1.1 lysC、panC、ptsG和aspA基因敲除对 β-丙氨酸厌氧发酵的作用 | 第27-29页 |
3.1.2 panD、aspDH、pck和pyc基因的过表达对 β-丙氨酸厌氧发酵的作用 | 第29-31页 |
3.1.3 NADH、ATP和CO2对 β-丙氨酸发酵合成的作用 | 第31-33页 |
3.1.4 厌氧发酵合成 β-丙氨酸的条件优化 | 第33-34页 |
3.2 重组大肠杆菌好氧发酵合成 β-丙氨酸的研究 | 第34-42页 |
3.2.1 重组B0016-080BB好氧菌株的构建及摇瓶发酵 | 第35-36页 |
3.2.2 panD基因过表达对 β-丙氨酸好氧合成的影响 | 第36-37页 |
3.2.3 panD基因的染色体整合对 β-丙氨酸好氧合成的影响 | 第37-38页 |
3.2.4 aspDH、pck和pyc基因在B0016-080BB-PL-panD中过表达的影响 | 第38页 |
3.2.5 好氧摇瓶发酵条件优化 | 第38-40页 |
3.2.6 5L发酵罐好氧发酵验证 | 第40-42页 |
主要结论与展望 | 第42-43页 |
主要结论 | 第42页 |
展望 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |