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代谢工程改造大肠杆菌合成β-丙氨酸

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第8-14页
    1.1 β-丙氨酸的概述第8-10页
        1.1.1 β-丙氨酸的理化性质第8页
        1.1.2 β-丙氨酸的应用及市场需求第8-9页
        1.1.3 β-氨基丙酸的制备与生产第9-10页
    1.2 大肠杆菌代谢调节策略第10-12页
        1.2.1 切断支路代谢第10页
        1.2.2 增加前体物的合成第10-11页
        1.2.3 辅因子的平衡第11-12页
        1.2.4 启动子的改造第12页
    1.3 立题依据和意义第12页
    1.4 主要研究内容第12-14页
第二章 材料与方法第14-26页
    2.1 实验材料第14-18页
        2.1.1 菌株和质粒第14-15页
        2.1.2 实验所用引物第15-16页
        2.1.3 主要培养基第16页
        2.1.4 主要材料第16-17页
        2.1.5 主要仪器第17-18页
    2.2 重组质粒及菌株构建方法第18-23页
        2.2.1 质粒的构建和表达方法第18-21页
        2.2.2 大肠杆菌Red基因敲除方法第21-23页
        2.2.3 染色体整合方法第23页
    2.3 菌株培养方法第23-24页
        2.3.1 摇瓶培养方法第23-24页
        2.3.2 发酵罐培养方法第24页
    2.4 分析方法第24-26页
        2.4.1 菌体浓度(OD600)的测定第24页
        2.4.2 葡萄糖浓度的测定第24-25页
        2.4.3 甘油的测定方法第25页
        2.4.4 β-丙氨酸测定方法第25-26页
第三章 结果与讨论第26-42页
    3.1 重组大肠杆菌厌氧发酵合成 β-丙氨酸的研究第26-34页
        3.1.1 lysC、panC、ptsG和aspA基因敲除对 β-丙氨酸厌氧发酵的作用第27-29页
        3.1.2 panD、aspDH、pck和pyc基因的过表达对 β-丙氨酸厌氧发酵的作用第29-31页
        3.1.3 NADH、ATP和CO2对 β-丙氨酸发酵合成的作用第31-33页
        3.1.4 厌氧发酵合成 β-丙氨酸的条件优化第33-34页
    3.2 重组大肠杆菌好氧发酵合成 β-丙氨酸的研究第34-42页
        3.2.1 重组B0016-080BB好氧菌株的构建及摇瓶发酵第35-36页
        3.2.2 panD基因过表达对 β-丙氨酸好氧合成的影响第36-37页
        3.2.3 panD基因的染色体整合对 β-丙氨酸好氧合成的影响第37-38页
        3.2.4 aspDH、pck和pyc基因在B0016-080BB-PL-panD中过表达的影响第38页
        3.2.5 好氧摇瓶发酵条件优化第38-40页
        3.2.6 5L发酵罐好氧发酵验证第40-42页
主要结论与展望第42-43页
    主要结论第42页
    展望第42-43页
致谢第43-45页
参考文献第45-48页
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第48页

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