| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 肝癌概述 | 第12页 |
| 1.2 肝癌休眠的概念 | 第12-13页 |
| 1.3 肝癌休眠的机制 | 第13-14页 |
| 1.3.1 血管生成 | 第13页 |
| 1.3.2 免疫编辑 | 第13-14页 |
| 1.3.3 肿瘤干细胞 | 第14页 |
| 1.3.4 微环境 | 第14页 |
| 1.4 B7-H1/PD-1信号通路可能是肝癌休眠的关键 | 第14-15页 |
| 1.5 B7-H1/PD-1信号通路相关MIRNA的讨论 | 第15-16页 |
| 1.6 中医对肝癌休眠的认识 | 第16-18页 |
| 第二章 MIRNA570在肝癌细胞层面对B7-H1/PD-1通路的调控机制 | 第18-37页 |
| 1 材料 | 第18-21页 |
| 1.1 细胞株 | 第18页 |
| 1.2 实验试剂及主要仪器 | 第18-21页 |
| 1.3 耗材 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-27页 |
| 2.1 细胞培养 | 第21页 |
| 2.2 细胞冻存 | 第21页 |
| 2.3 细胞复苏 | 第21页 |
| 2.4 miRNA转染 | 第21-22页 |
| 2.5 B7-H1突变型载体构建 | 第22-23页 |
| 2.6 Real-time PCR检测miRNA的表达水平 | 第23-25页 |
| 2.7 Western bolt检测蛋白表达水平 | 第25-26页 |
| 2.8 MTT法检测细胞增殖活性 | 第26-27页 |
| 2.9 细胞周期检测 | 第27页 |
| 2.10 细胞迁移实验(TRANSWELL) | 第27页 |
| 2.11 统计学处理 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-35页 |
| 3.1 人源肝癌细胞HepG2中B7-H1蛋白的表达最高,miRNA-570的表达最低 | 第27-29页 |
| 3.2 B7-H1突变型载体构建结果 | 第29页 |
| 3.3 miRNA570与B7-H1有直接靶向作用 | 第29-31页 |
| 3.4 miRNA-570在HepG-2中与B7-H1/PD-1通路呈负调控关系 | 第31-33页 |
| 3.5 B7-H1逆转miRNA-570的作用 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 健脾化瘀方抗肝癌细胞侵袭和转移及对肝癌术后休眠的干预作用 | 第37-46页 |
| 1 材料 | 第37-38页 |
| 1.1 细胞株 | 第37页 |
| 1.2 实验试剂及主要仪器 | 第37-38页 |
| 1.3 实验动物 | 第38页 |
| 1.4 动物饲养场所 | 第38页 |
| 1.5 健脾化瘀方制备 | 第38页 |
| 1.6 耗材 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-41页 |
| 2.1 细胞培养 | 第38-39页 |
| 2.2 CCK8检测细胞增殖 | 第39页 |
| 2.3 细胞周期检测 | 第39-40页 |
| 2.4 细胞迁移实验(Transwell) | 第40页 |
| 2.5 裸鼠肝癌术后休眠模型的建立 | 第40页 |
| 2.6 给药方法 | 第40-41页 |
| 2.7 统计学分析 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-44页 |
| 3.1 CCK8对细胞增殖的抑制作用 | 第41页 |
| 3.2 Transwell实验测定健脾化瘀方对细胞迁移能力的影响 | 第41-42页 |
| 3.3 健脾化瘀方对细胞凋亡的影响 | 第42-44页 |
| 3.4 健脾化瘀方对肝癌术后休眠的影响 | 第44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 本研究创新及不足之处 | 第46-47页 |
| 结语 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 在校期间发表文章情况 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 统计学审核证明 | 第57页 |
