| 中文摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 一、前言 | 第12-24页 |
| 1 固有免疫细胞 | 第12-17页 |
| 1.1 肥大细胞(MC) | 第13-14页 |
| 1.2 巨噬细胞(MΦ) | 第14-16页 |
| 1.3 粒细胞、树突状(DC)和自然杀伤(NK)细胞 | 第16-17页 |
| 2 Toll样识别受体 | 第17页 |
| 3 造血发生 | 第17-19页 |
| 3.1 小鼠体内造血发生 | 第17-18页 |
| 3.2 人类造血发生 | 第18-19页 |
| 4 人多能干细胞研究进展 | 第19-21页 |
| 4.1 人多能干细胞向血细胞诱导分化研究 | 第19-21页 |
| 4.2 人多能干细胞研究造血发生的优势 | 第21页 |
| 5 固有免疫细胞与疾病 | 第21-23页 |
| 5.1 肥大细胞与疾病 | 第21-22页 |
| 5.2 巨噬细胞与疾病 | 第22-23页 |
| 6 固有免疫细胞发生学存在的科学问题 | 第23页 |
| 7 本研究拟解决的科学问题 | 第23页 |
| 8 研究的基本思路 | 第23-24页 |
| 二、材料与方法 | 第24-46页 |
| 1 主要材料(包括主要仪器、试剂等) | 第24-34页 |
| 1.1 所用细胞系 | 第24页 |
| 1.2 主要耗材 | 第24-25页 |
| 1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
| 1.4 主要试剂 | 第26-31页 |
| 1.5 流式抗体 | 第31-32页 |
| 1.6 免疫染色抗体 | 第32页 |
| 1.7 细胞因子 | 第32-33页 |
| 1.8 实验所用引物序列 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-42页 |
| 2.1 hPSCs无饲养层培养 | 第34页 |
| 2.2 AGM-S3细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.3 hPSCs与AGM-S3共培养 | 第35页 |
| 2.4 肥大细胞定向培养 | 第35页 |
| 2.5 巨噬细胞定向培养 | 第35-36页 |
| 2.6 人脐带血单个核细胞的分离 | 第36页 |
| 2.7 人脐带血CD34~+细胞的磁珠分选 | 第36-37页 |
| 2.8 hCBMC-CD34~+细胞向MΦ诱导的悬浮培养 | 第37页 |
| 2.9 MGG染色方法 | 第37-38页 |
| 2.10 免疫荧光染色 | 第38页 |
| 2.11 流式检测 | 第38-39页 |
| 2.12 巨噬细胞功能刺激实验 | 第39页 |
| 2.13 RT-qPCR | 第39-41页 |
| 2.14 流式分选 | 第41-42页 |
| 2.15 血细胞集落形成实验 | 第42页 |
| 2.16 统计学分析 | 第42页 |
| 3 实验技术 | 第42-46页 |
| 3.1 造血发生过程形态学及表型分子的时序性观察 | 第43-44页 |
| 3.2 共培养14天细胞可形成多种血细胞 | 第44-45页 |
| 3.3 各种血细胞的定向分化 | 第45-46页 |
| 三、实验结果 | 第46-80页 |
| 第一部分 肥大细胞的培养、成熟、功能研究及起源探索 | 第46-66页 |
| 1 hPSCs体外分化肥大细胞培养体系的建立 | 第46-50页 |
| 2 hPSCs来源肥大细胞的特性 | 第50-54页 |
| 3 hPSCs来源肥大细胞的功能 | 第54-56页 |
| 4 不同hPSCs细胞系来源肥大细胞的特性 | 第56-58页 |
| 5 hPSCs来源肥大细胞扩增效率统计 | 第58页 |
| 6 hPSCs来源肥大细胞的起源 | 第58-64页 |
| 7 小结 | 第64-66页 |
| 第二部分 巨噬细胞的培养、功能检测 | 第66-80页 |
| 1 共培养早期巨噬细胞培养体系的建立 | 第66-70页 |
| 2 hPSCs来源巨噬细胞特性 | 第70-73页 |
| 3 hPSCs来源巨噬细胞功能检测 | 第73-77页 |
| 4 hPSCs来源巨噬细胞产量计算 | 第77-78页 |
| 5 小结 | 第78-80页 |
| 四、结论 | 第80-81页 |
| 五、讨论 | 第81-84页 |
| 1 hPSCs可以体外模拟早期胚胎发育过程 | 第81页 |
| 2 hPSCs/AGM-S3共培养产生MC和MΦ初期发育的共性 | 第81-82页 |
| 3 初期发育固有免疫细胞的功能快速成熟和组织特征偏向性 | 第82-83页 |
| 4 hPSCs研究固有免疫细胞的意义 | 第83页 |
| 5 免疫细胞的临床应用及展望 | 第83-84页 |
| 六、创新意义 | 第84-85页 |
| 七、今后工作的延伸 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-95页 |
| 文献综述 | 第95-103页 |
| 参考文献 | 第101-103页 |
| 英文缩略词表 | 第103-104页 |
| 个人简历、在校期间学术成果及获奖情况 | 第104-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
