| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 一、前 言 | 第13-14页 |
| 二、课题设计 | 第14-16页 |
| （一）转移性肾透明细胞癌相关的长链非编码RNA的筛选 | 第14-15页 |
| （二）长链非编码RNA编码能力预测、全长扩增及细胞定位 | 第15页 |
| （三）长链非编码RNA与肾透明细胞癌细胞转移功能关系的验证 | 第15页 |
| （四）长链非编码RNA参与肾透明细胞癌转移的相关通路的探索 | 第15-16页 |
| （五）长链非编码RNA促进肾透明细胞癌转移机制的探究 | 第16页 |
| （六）长链非编码RNA表达量与肾透明细胞癌患者预后的相关性分析 | 第16页 |
| 三、实验材料 | 第16-27页 |
| （一）主要实验试剂 | 第16-18页 |
| （二）主要常规实验仪器 | 第18-19页 |
| （三）细胞株 | 第19-20页 |
| （四）RNA芯片 | 第20页 |
| （五）肾透明细胞癌组织 | 第20-23页 |
| （六）实验动物 | 第23页 |
| （七）引物及siRNA干扰序列 | 第23-24页 |
| （八）质粒和菌株及慢病毒包装 | 第24-27页 |
| （九）常规分子试剂 | 第27页 |
| 四、实验方法 | 第27-57页 |
| （一）lncRNA芯片筛选 | 第27-30页 |
| （二）细胞复苏 | 第30-31页 |
| （三）细胞传代 | 第31-32页 |
| （四）细胞的冻存 | 第32页 |
| （五）细胞计数 | 第32-33页 |
| （六）细胞培养、转染与慢病毒感染 | 第33-45页 |
| （七）细胞增殖实验 | 第45-46页 |
| （八）细胞迁移实验 | 第46页 |
| （九）细胞侵袭实验 | 第46-47页 |
| （十）RNA提取 | 第47-49页 |
| （十一）反转录 | 第49-50页 |
| （十二）实时定量PCR | 第50页 |
| （十三）Western blot实验 | 第50-52页 |
| （十四）5' and 3' RACE扩增分析 | 第52-53页 |
| （十五）RNA pull-down | 第53-55页 |
| （十六）RNA免疫共沉淀(RIP) | 第55-56页 |
| （十七）染色质免疫共沉淀（ChIP） | 第56页 |
| （十八）动物体内实验 | 第56-57页 |
| （十九）统计方法 | 第57页 |
| 五、实验结果 | 第57-78页 |
| （一）肾透明细胞癌转移相关的长链非编码RNA芯片筛选 | 第57-60页 |
| （二）MRCCAT1与肾透明细胞癌病理分级、肿瘤大小及预后的关系 | 第60-62页 |
| （三）MRCCAT1特点 | 第62-64页 |
| （四）下调MRCCAT1可以抑制肾透明细胞癌细胞的转移 | 第64-66页 |
| （五）上调MRCCAT1可以促进肾透明细胞癌细胞的转移 | 第66-68页 |
| （六）下调MRCCAT1抑制肾透明细胞癌细胞在裸鼠体内的转移 | 第68-70页 |
| （七）MRCCAT1通过下调NPR3的表达而促进肾透明细胞癌转移64 | 第70-73页 |
| （八）MRCCAT1 通过抑制NPR3的表达而激活了p38-MAPK信号通路 | 第73-76页 |
| （九）MRCCAT1通过招募Polycomb Repressive Complex 2 至NPR3启动子区域进而抑制NPR3表达 | 第76-78页 |
| 六、讨论 | 第78-79页 |
| 七、参考文献 | 第79-84页 |
| 综述 | 第84-97页 |
| 参考文献 | 第91-97页 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作情况 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
