| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩写表 | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 病原微生物的危害 | 第13页 |
| 1.2 病原微生物的检测方法 | 第13-17页 |
| 1.2.1 传统的病原微生物检测方法 | 第13-14页 |
| 1.2.2 基于抗体和适体的检测方法 | 第14-15页 |
| 1.2.3 基于核酸的检测方法 | 第15-16页 |
| 1.2.4 质谱法 | 第16-17页 |
| 1.3 编码磁性微粒及其在生物检测中的应用 | 第17-18页 |
| 1.3.1 编码磁性微粒的特点 | 第17页 |
| 1.3.2 编码磁性微粒在生物检测中的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 本课题涉及的致泻性大肠埃希氏菌简介 | 第18-22页 |
| 1.4.1 产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC) | 第19-20页 |
| 1.4.2 肠致病性大肠埃希氏菌(EPEC) | 第20页 |
| 1.4.3 肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC) | 第20-21页 |
| 1.4.4 肠侵袭性大肠埃希式菌(EIEC) | 第21-22页 |
| 1.5 本课题的主要研究意义和思路 | 第22-25页 |
| 1.5.1 本课题的研究意义 | 第22-24页 |
| 1.5.2 本课题的研究思路 | 第24-25页 |
| 第二章 致泻性大肠埃希氏菌多重PCR检测方法的构建 | 第25-41页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.2.1 实验菌株 | 第25-26页 |
| 2.2.2 生化试剂及试剂盒 | 第26页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.3.1 引物设计与合成 | 第27页 |
| 2.3.2 致泻性大肠埃希氏菌的培养、计数和DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.3.3 引物特异性检测及单基因PCR条件优化 | 第28-31页 |
| 2.3.4 多重PCR及条件优化 | 第31-33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-40页 |
| 2.4.1 引物设计与合成 | 第33-35页 |
| 2.4.2 菌落计数及DNA提取 | 第35-36页 |
| 2.4.3 引物特异性检测及单基因PCR条件优化 | 第36-38页 |
| 2.4.4 多重PCR反应条件的优化 | 第38-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 多重PCR结合基因芯片检测致泻性大肠埃希氏菌的研究 | 第41-56页 |
| 3.1 引言 | 第41页 |
| 3.2 实验材料 | 第41-43页 |
| 3.2.1 本部分实验涉及的探针序列 | 第41-42页 |
| 3.2.2 生化试剂 | 第42页 |
| 3.2.3 配制试剂成分 | 第42页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第42-43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-47页 |
| 3.3.1 本实验流程设计 | 第43-44页 |
| 3.3.2 多重PCR扩增 | 第44-45页 |
| 3.3.3 基因芯片的制备 | 第45-46页 |
| 3.3.4 芯片的杂交及结果判定 | 第46-47页 |
| 3.3.5 基因芯片的特异性检测 | 第47页 |
| 3.3.6 基因芯片的灵敏度检测 | 第47页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第47-55页 |
| 3.4.1 探针及互补序列的合成 | 第47页 |
| 3.4.2 基因芯片的制备 | 第47-48页 |
| 3.4.3 多重PCR扩增及基因芯片特异性分析 | 第48页 |
| 3.4.4 基因芯片灵敏度分析 | 第48-55页 |
| 3.5 本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 多重PCR结合编码磁性微粒芯片检测致泻性大肠埃希氏菌的研究 | 第56-71页 |
| 4.1 引言 | 第56页 |
| 4.2 实验材料 | 第56-58页 |
| 4.2.1 生化试剂 | 第56-57页 |
| 4.2.2 配制试剂成分 | 第57-58页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第58页 |
| 4.3 实验方法 | 第58-61页 |
| 4.3.1 本实验流程设计 | 第58-59页 |
| 4.3.2 多重PCR扩增 | 第59页 |
| 4.3.3 编码磁性微粒芯片的制备 | 第59-60页 |
| 4.3.4 编码磁性微粒芯片的杂交及结果判定 | 第60-61页 |
| 4.3.5 编码磁性微粒芯片的特异性检测 | 第61页 |
| 4.3.6 基因芯片的灵敏度检测 | 第61页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第61-70页 |
| 4.4.1 编码磁性微粒芯片的制备 | 第62-63页 |
| 4.4.2 编码磁性微粒芯片的特异性分析 | 第63页 |
| 4.4.3 编码磁性微粒芯片的灵敏度分析 | 第63-70页 |
| 4.5 本章小结 | 第70-71页 |
| 第五章 总结与展望 | 第71-74页 |
| 5.1 总结 | 第71-72页 |
| 5.1.1 多重PCR体系的构建及条件优化 | 第71页 |
| 5.1.2 多重PCR结合基因芯片检测方法的构建 | 第71-72页 |
| 5.1.3 多重PCR结合编码磁性微粒芯片检测方法的构建 | 第72页 |
| 5.2 展望 | 第72-74页 |
| 5.2.1 本研究中需要进一步完善的实验 | 第73页 |
| 5.2.2 本研究的应用前景 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
