| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 英文缩写词表 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 绪论 | 第13-33页 |
| 1. PRRS和PRRSV的研究进展 | 第13-23页 |
| · | 第13-15页 |
| ·PRRS的起源 | 第13页 |
| ·PRRS的流行病学 | 第13-14页 |
| ·PRRS诊断和防治 | 第14-15页 |
| ·PRRSV的研究进展 | 第15-23页 |
| ·基因组结构 | 第17-20页 |
| ·主要结构蛋白 | 第17-19页 |
| ·次要结构蛋白 | 第19-20页 |
| ·PRRS的免疫学 | 第20-21页 |
| ·PRRSV的变异 | 第21-22页 |
| ·PRRSV的致病机理 | 第22-23页 |
| ·PRRSV的抗体依赖性增强作用 | 第23页 |
| 2 PRRS的疫苗研究进展 | 第23-29页 |
| ·常规疫苗 | 第23-25页 |
| ·灭活疫苗 | 第23-24页 |
| ·弱毒疫苗 | 第24-25页 |
| ·新型疫苗 | 第25-29页 |
| ·亚单位疫苗 | 第25页 |
| ·核酸疫苗 | 第25-28页 |
| ·活载体疫苗 | 第28-29页 |
| 3 腺病毒及腺病毒载体的研究进展 | 第29-33页 |
| 第一章 重组真核表达质粒pacAd5 CMVK-NpA-GP5-M的构建 | 第33-47页 |
| 1 材料和方法 | 第33-47页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·病毒、细胞及菌株 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-46页 |
| ·PRRSV的培养 | 第34页 |
| ·PRRSV总RNA的提取 | 第34页 |
| ·GP5和M基因的扩增 | 第34-37页 |
| ·引物设计 | 第34-35页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第35页 |
| ·DNA连接 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·DNA转化 | 第36-37页 |
| ·重组子鉴定 | 第37-39页 |
| ·重组真核表达载体的构建 | 第39-41页 |
| ·重组真核表达载体pIRES-GP5-M的构建 | 第39-41页 |
| ·试验结果 | 第41-46页 |
| ·重组穿梭质粒的构建 | 第41-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| 第二章 重组病毒的获得、鉴定及部分生物学活性分析 | 第47-56页 |
| 2 材料和方法 | 第47-56页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·细胞,毒株 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·试验方法 | 第47-51页 |
| ·转染 | 第47-48页 |
| ·重组病毒的获得 | 第48页 |
| ·重组病毒的纯化 | 第48页 |
| ·重组病毒的鉴定 | 第48-50页 |
| ·重组病毒生物学活性鉴定 | 第50-51页 |
| ·病毒TCID_(50)测定 | 第50-51页 |
| ·遗传稳定性分析 | 第51页 |
| ·试验结果 | 第51-55页 |
| ·重组病毒的获得 | 第51页 |
| ·电镜观察 | 第51-52页 |
| ·重组病毒的PCR鉴定 | 第52页 |
| ·间接免疫荧光 | 第52-53页 |
| ·Western Blot分析 | 第53-54页 |
| ·TCID_(50)的测定 | 第54页 |
| ·连续传代重组病毒的遗传稳定性检测 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 全文总结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第63页 |
| 附录: 主要试剂的配置 | 第63-65页 |