| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第10-31页 |
| 1.1 肿瘤的研究进展 | 第10页 |
| 1.2 microRNAs与肿瘤的研究进展 | 第10-19页 |
| 1.2.1 microRNAs的生成 | 第10-11页 |
| 1.2.2 microRNAs与肿瘤的相关性 | 第11页 |
| 1.2.3 microRNAs作为原癌基因或抑癌基因 | 第11-14页 |
| 1.2.4 microRNAs的调控机制 | 第14-15页 |
| 1.2.5 microRNAs作为肿瘤诊断的分子标志物 | 第15-16页 |
| 1.2.6 microRNAs作为治疗靶标 | 第16-19页 |
| 1.3 miR-490-3p与肿瘤的相关性研究 | 第19-20页 |
| 1.4 miR-490-3p与心脏疾病的相关性研究 | 第20-21页 |
| 1.5 PKM与肿瘤的研究进展 | 第21-29页 |
| 1.5.1 肿瘤的代谢与增殖 | 第21-22页 |
| 1.5.2 PK结构与功能 | 第22-25页 |
| 1.5.3 PKM的选择性剪接与hnRNPA1 | 第25-27页 |
| 1.5.4 PKM2和PKM1的代谢功能与非代谢功能 | 第27-29页 |
| 1.6 本论文的研究目的与意义 | 第29-31页 |
| 2 材料和方法 | 第31-41页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.1 实验材料和试剂 | 第31页 |
| 2.1.2 所用仪器 | 第31页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法与步骤 | 第32-41页 |
| 2.2.1 细胞培养、冻存与复苏 | 第32-33页 |
| 2.2.2 细胞的瞬时转染 | 第33页 |
| 2.2.3 慢病毒载体的构建及慢病毒的包装与感染 | 第33页 |
| 2.2.4 感受态的制备 | 第33-34页 |
| 2.2.5 质粒的转化与提取 | 第34页 |
| 2.2.6 细胞与小鼠组织RNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.2.7 心肌梗病人和健康对照外周血血清miRNAs的提取 | 第35页 |
| 2.2.8 cDNA的制备 | 第35-36页 |
| 2.2.9 半定量与定量分析 | 第36-37页 |
| 2.2.10 蛋白样品的制备与Western blotting杂交 | 第37-38页 |
| 2.2.11 细胞计数 | 第38-39页 |
| 2.2.12 划痕实验 | 第39页 |
| 2.2.13 流式细胞仪检测细胞周期 | 第39页 |
| 2.2.14 葡萄糖含量测定 | 第39-40页 |
| 2.2.15 乳酸含量测定 | 第40-41页 |
| 3. 结果 | 第41-52页 |
| 3.1 miR-490-3p调控肿瘤细胞增殖 | 第41-48页 |
| 3.1.1 miR-490-3p过表达效率的定量检测 | 第41页 |
| 3.1.2 miR-490-3p抑制肿瘤细胞hnRPNA1的表达 | 第41-42页 |
| 3.1.3 miR-490-3p抑制hnRNPA1的表达,改变PKM表达的比例 | 第42-43页 |
| 3.1.4 miR-490-3p抑制HeLa和786-O细胞的生长 | 第43-45页 |
| 3.1.5 miR-490-3p抑制HeLa和786-O细胞的迁移 | 第45-46页 |
| 3.1.6 miR-490-3p延缓HeLa和786-O细胞的周期进程 | 第46-47页 |
| 3.1.7 miR-490-3p抑制HeLa和786-O细胞的上皮间质转换 | 第47页 |
| 3.1.8 miR-490-3p影响HeLa和786-O细胞的代谢 | 第47-48页 |
| 3.2 miR-490-3p调控心肌细胞代谢 | 第48-52页 |
| 3.2.1 心肌梗病人外周血血清中miR-490-3p表达量上调 | 第48-49页 |
| 3.2.2 小鼠不同时期心脏中miR-490-3p、hnRNPA1、PKM1和PKM2 mRNA的表达 | 第49-51页 |
| 3.2.3 miR-490-3p影响H9C2细胞的代谢水平 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| 4.1 miR-490-3p在不同肿瘤细胞中的影响与作用 | 第52页 |
| 4.2 miR-490-3p对肿瘤细胞周期的影响 | 第52-53页 |
| 4.3 miR-490-3p对上皮间质转换的影响 | 第53-54页 |
| 4.4 miR-490-3p对代谢的影响与作用 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
