| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 英文缩略词 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1. 昆虫先天免疫 | 第13-18页 |
| 1.1 昆虫先天免疫 | 第13-14页 |
| 1.2 免疫信号途径 | 第14-18页 |
| 2. 斜纹夜蛾 | 第18页 |
| 3. 本研究的目的与意义 | 第18-21页 |
| 第二章 Relish和Dorsal及其剪切体基因克隆 | 第21-39页 |
| 1. 材料与方法 | 第22-30页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第22页 |
| 1.2 主要试剂和仪器设备 | 第22-23页 |
| 1.3 Relish和Dorsal基因片段的克隆和验证 | 第23-27页 |
| 1.4 斜纹夜蛾Dorsal和Relish基因的末端克隆 | 第27-29页 |
| 1.5 Dorsal和Relish系统发育分析 | 第29-30页 |
| 2. 结果与分析 | 第30-37页 |
| 2.1 Dorsal和Relish序列分析 | 第30页 |
| 2.2 进化分析 | 第30-37页 |
| 3. 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 Dorsal和Relish的时空表达特征和诱导表达研究 | 第39-53页 |
| 1. 材料与方法 | 第40-44页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第40页 |
| 1.2 微生物 | 第40-41页 |
| 1.3 试剂和仪器设备 | 第41页 |
| 1.4 实时定量PCR | 第41-43页 |
| 1.4.1 引物设计 | 第41页 |
| 1.4.2 总RNA提取 | 第41-43页 |
| 1.5 微生物对基因表达的诱导 | 第43-44页 |
| 1.6 数据分析 | 第44页 |
| 2. 结果与分析 | 第44-51页 |
| 2.1 斜纹夜蛾Dorsal和Relish基因的时空表达 | 第44-48页 |
| 2.2 斜纹夜蛾当被微生物侵染后dorsal和relish的表达谱 | 第48-51页 |
| 3. 讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 Dorsal和Relish及其剪切体功能研究 | 第53-65页 |
| 1. 材料和方法 | 第53-59页 |
| 1.1 昆虫和微生物 | 第53-54页 |
| 1.2 RNA引物设计 | 第54-55页 |
| 1.3 模板DNA的合成 | 第55页 |
| 1.4 dsRNA的体外转录合成 | 第55-56页 |
| 1.5 dsRNA的注射及取样 | 第56-57页 |
| 1.6 dsRNA和微生物悬浮液共同注射及统计死亡率 | 第57页 |
| 1.7 RNAi效率的检测 | 第57-59页 |
| 1.8 RNAi处理后注射微生物生物测定 | 第59页 |
| 2. 结果与分析 | 第59-61页 |
| 2.1 RNAi效率的检测 | 第59-61页 |
| 2.2 RNAi处理后注射微生物悬浮液生物测定 | 第61页 |
| 3. 讨论 | 第61-65页 |
| 第五章 表达Dorsal dsRNA载体的构建 | 第65-79页 |
| 1. 实验材料和主要器材 | 第65页 |
| 1.1 实验材料 | 第65页 |
| 1.2 主要试剂 | 第65页 |
| 1.3 培养基和缓冲液 | 第65页 |
| 2. 实验方法 | 第65-72页 |
| 2.1 P-F-R质粒构建技术路线 | 第65-66页 |
| 2.2 总RNA提取 | 第66-67页 |
| 2.3 cDNA第一条链的合成 | 第67页 |
| 2.4 正反向片段的扩增 | 第67-68页 |
| 2.5 回收目标DNA的PCR产物 | 第68-69页 |
| 2.6 目标PCR产物的连接和连接产物的转化 | 第69页 |
| 2.7 菌液PCR、凝胶电泳检测 | 第69-70页 |
| 2.8 pSilent-1质粒小量提取 | 第70页 |
| 2.9 P-F重组质粒的构建 | 第70-71页 |
| 2.10 P-F-R重组质粒的构建 | 第71-72页 |
| 2.11 检测方案 | 第72页 |
| 2.12 序列测定 | 第72页 |
| 3. 结果及分析 | 第72-76页 |
| 3.1 克隆的斜纹夜蛾Dorsal加酶切位点 | 第72-73页 |
| 3.2 测序结果 | 第73-75页 |
| 3.3 P-F-R结构图 | 第75-76页 |
| 4. 讨论 | 第76-79页 |
| 第六章 全文总结 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
