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猪增生性肠炎诊断方法的初步建立及胞内劳森氏菌LI0065基因的克隆与表达

摘要第4-5页
Abstract第5页
第一章 绪论第9-15页
    1.1 病原学第9-10页
    1.2 发病机理第10页
    1.3 流行情况第10-11页
    1.4 临床症状和病变第11-12页
    1.5 诊断方法第12-13页
    1.6 防治措施第13页
    1.7 展望第13-15页
第二章 猪增生性肠炎诊断方法的初步建立第15-30页
    2.1 材料与方法第15-16页
        2.1.1 主要试剂第15页
        2.1.2 主要仪器第15-16页
        2.1.3 临床样本采集与处理第16页
        2.1.4 引物设计与合成第16页
    2.2 实验方法第16-21页
        2.2.1 分子生物学诊断第16-20页
        2.2.2 组织病理学诊断第20-21页
    2.3 结果与分析第21-27页
        2.3.1 粪便基因组DNA质量检测第21-22页
        2.3.2 巢式PCR扩增结果及测序第22页
        2.3.3 巢式PCR扩增条件优化结果第22-23页
        2.3.4 敏感性第23-24页
        2.3.5 特异性第24页
        2.3.6 重复性第24页
        2.3.7 临床样本的检测第24-25页
        2.3.8 临床上劳森氏菌感染病猪的肠道病理变化第25-26页
        2.3.9 组织学病变第26-27页
    2.4 讨论第27-30页
第三章 LI0065基因的克隆与表达第30-51页
    3.1 实验材料与方法第30-34页
        3.1.1 材料、载体及菌种第30页
        3.1.2 主要试剂第30页
        3.1.3 主要仪器第30-31页
        3.1.4 试剂的配制第31-33页
        3.1.5 引物设计与合成根据第33-34页
    3.2 实验方法第34-40页
        3.2.1 粪便总DNA的提取第34页
        3.2.2 LI0065全长基因的扩增及回收第34-35页
        3.2.3 LI0065目的基因TA克隆第35-36页
        3.2.4 原核表达载体的构建及测序第36-38页
        3.2.5 LI0065生物信息学分析第38页
        3.2.6 LI0065-P的原核诱导表达及鉴定第38-40页
    3.3 结果与分析第40-49页
        3.3.1 LI0065全长基因扩增结果第40页
        3.3.2 TA克隆载体双酶切结果第40-41页
        3.3.3 PET-28a~((+))空载体双酶切结果第41页
        3.3.4 LI0065-P重组子的鉴定结果第41-43页
        3.3.5 LI0065生物信息学分析结果第43-47页
        3.3.6 SDS-PAGE凝胶电泳结果第47-48页
        3.3.7 WB鉴定结果第48-49页
    3.4 讨论第49-51页
结论第51-52页
参考文献第52-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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