摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第12-21页 |
第一章 绪论 | 第21-35页 |
1.1 哮喘及气道重建疾病的治疗现状 | 第21-22页 |
1.2 哮喘与过敏性炎症的发病机制 | 第22-23页 |
1.3 哮喘与过敏原 | 第23页 |
1.4 支气管上皮细胞结构 | 第23-24页 |
1.5 哮喘与炎症细胞、免疫细胞及炎症因子 | 第24-30页 |
1.5.1 炎症细胞 | 第24-25页 |
1.5.2 免疫细胞与哮喘 | 第25-26页 |
1.5.3 哮喘与IL-8、IL-10 | 第26-27页 |
1.5.4 哮喘与IL-13、IL-33 | 第27-28页 |
1.5.5 IL-17细胞分化 | 第28页 |
1.5.6 IL-17细胞与IL-21、IL-23 | 第28-29页 |
1.5.7 Th17细胞与IL-6、TGF-β1 | 第29-30页 |
1.5.8 Th17细胞生物效应 | 第30页 |
1.6 TGF-β及其生物学作用 | 第30-31页 |
1.7 哮喘与气道重构 | 第31-33页 |
1.7.1 气道重构 | 第31页 |
1.7.2 气道重构的发病机制 | 第31-32页 |
1.7.3 支气管气道结构的变化 | 第32页 |
1.7.4 气道重构的病理症状 | 第32-33页 |
1.8 三七的药理活性 | 第33-35页 |
第二章 理论分析 | 第35-45页 |
2.1 气道重建与TGF-β1 | 第35-36页 |
2.2 Th17细胞与哮喘 | 第36-37页 |
2.3 慢性哮喘小鼠气道重建模型研究 | 第37-38页 |
2.4 活血化瘀药物与哮喘关系 | 第38-39页 |
2.5 三七与气道重建相关因素研究 | 第39-40页 |
2.6 蛋白质组学技术在中药作用机理研究中的应用 | 第40-45页 |
2.6.1 中药单体研究 | 第41页 |
2.6.2 单味中药研究 | 第41-42页 |
2.6.3 中药复方研究 | 第42页 |
2.6.4 实验设计方案 | 第42-45页 |
第三章 哮喘模型的建立 | 第45-49页 |
3.1 材料与方法 | 第45-46页 |
3.1.1 实验动物 | 第45页 |
3.1.2 药物和试剂 | 第45页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第45页 |
3.1.4 主要溶液配制 | 第45-46页 |
3.2 动物分组、模型建立及药物干预 | 第46-47页 |
3.2.1 动物分组 | 第46页 |
3.2.2 模型建立及药物干预 | 第46-47页 |
3.2.3 药物干预试验 | 第47页 |
3.3 标本的获得、处理与检测 | 第47-48页 |
3.3.1 取材时间 | 第47页 |
3.3.2 肺组织的获得与处理 | 第47-48页 |
3.4 肺组织灌洗后的大体观图 | 第48页 |
3.5 结果及讨论 | 第48-49页 |
第四章 H&E染色病理学观察 | 第49-57页 |
4.1 实验原理 | 第49页 |
4.2 石蜡切片的制备 | 第49-51页 |
4.2.1 试剂 | 第49页 |
4.2.2 主要仪器及设备 | 第49-50页 |
4.2.3 组织脱水、浸蜡 | 第50页 |
4.2.3.1 依次梯度酒精脱水 | 第50页 |
4.2.3.2 过二甲苯 | 第50页 |
4.2.3.3 浸蜡 | 第50页 |
4.2.4 石蜡包埋 | 第50页 |
4.2.5 石蜡切片的制作 | 第50-51页 |
4.2.6 切片过程 | 第51页 |
4.3 HE染色过程 | 第51-52页 |
4.3.1 试剂的配制 | 第51-52页 |
4.3.2 染色操作步骤 | 第52页 |
4.4 H&E染色组织病理学评分标准 | 第52-53页 |
4.5 H&E染色评分结果及讨论 | 第53-57页 |
第五章 免疫组化及特殊染色 | 第57-65页 |
5.1 免疫组化染色 | 第57-58页 |
5.1.1 实验原理 | 第57页 |
5.1.2 主要试剂 | 第57页 |
5.1.3 试剂配制 | 第57页 |
5.1.4 实验步骤 | 第57-58页 |
5.2 特殊染色 | 第58-60页 |
5.2.1 预期用途 | 第58页 |
5.2.2 检验原理 | 第58页 |
5.2.3 主要组成成份 | 第58-59页 |
5.2.4 储存条件及有效期 | 第59页 |
5.2.5 适用仪器 | 第59页 |
5.2.6 样本要求 | 第59页 |
5.2.7 染色步骤 | 第59页 |
5.2.8 染色流程 | 第59页 |
5.2.9 染色结果 | 第59-60页 |
5.3 数据的获得 | 第60页 |
5.3.1 免疫组化测定TGF-β1及collagen Ⅲ含量 | 第60页 |
5.3.2 特殊染色测定基底膜厚度 | 第60页 |
5.4 结果及讨论 | 第60-65页 |
5.4.1 气道特殊染色及转化生长因子免疫组化检测 | 第60-62页 |
5.4.2 免疫组化测定三型胶原含量 | 第62-65页 |
第六章 ELISA法测定IL-17含量 | 第65-71页 |
6.1 肺组织全蛋白浓度的定量 | 第65页 |
6.1.1 试剂 | 第65页 |
6.1.2 仪器 | 第65页 |
6.1.3 组织的预处理 | 第65页 |
6.1.3.1 肺组织的裂解 | 第65页 |
6.1.3.2 全蛋白定量 | 第65页 |
6.2 IL-17细胞因子的检测 | 第65-68页 |
6.2.1 实验原理 | 第66页 |
6.2.2 试剂 | 第66页 |
6.2.3 实验仪器及耗材 | 第66-67页 |
6.2.4 试剂的准备和保存 | 第67页 |
6.2.5 操作程序 | 第67-68页 |
6.2.6 统计分析 | 第68页 |
6.3 结果及讨论 | 第68-71页 |
第七章 iTRAQ蛋白质组学技术分析差异蛋白 | 第71-117页 |
7.1 实验原理及步骤 | 第71-79页 |
7.1.1 实验原理 | 第71页 |
7.1.2 利用iTRAQ技术进行蛋白质组定量的优点 | 第71-72页 |
7.1.3 iTRAQ定量蛋白质组学实验的基本流程 | 第72页 |
7.1.4 标准生物信息分析 | 第72-73页 |
7.1.5 实验方法-蛋白质处理过程 | 第73-74页 |
7.1.5.1 蛋白提取 | 第73页 |
7.1.5.2 仪器及试剂 | 第73页 |
7.1.5.3 细胞破碎及蛋白提取 | 第73页 |
7.1.5.4 蛋白质定量 | 第73页 |
7.1.5.5 仪器及试剂 | 第73-74页 |
7.1.5.6 定量 | 第74页 |
7.1.6 蛋白FASP方法酶解及iTRAQ试剂标记 | 第74-75页 |
7.1.6.1 仪器及试剂 | 第74页 |
7.1.6.2 FASP方法酶解 | 第74-75页 |
7.1.6.3 iTRAQ试剂标记 | 第75页 |
7.1.7 第一维高pH-RP液相分离 | 第75-76页 |
7.1.7.1 仪器及试剂 | 第75-76页 |
7.1.7.2 操作步骤 | 第76页 |
7.1.7.3 参数 | 第76页 |
7.1.8 第二维反相液质联用RPLC-MS | 第76-79页 |
7.1.8.1 仪器及试剂 | 第76页 |
7.1.8.2 具体操作步骤 | 第76页 |
7.1.8.3 液相参数 | 第76-77页 |
7.1.8.4 质谱参数 | 第77页 |
7.1.8.5 实验流程图 | 第77-79页 |
7.2 蛋白总体统计分析 | 第79页 |
7.3 GO基因本体分析 | 第79页 |
7.4 KEGG通路分析 | 第79-80页 |
7.5 蛋白质相互作用分析 | 第80页 |
7.6 蛋白质组学分析组别的选择 | 第80-117页 |
7.7.1 蛋白质总体统计分析 | 第81-88页 |
7.7.1.1 蛋白质基本鉴定分析 | 第81-82页 |
7.7.1.2 蛋白质相对分子质量分布 | 第82页 |
7.7.1.3 蛋白质等电点分布 | 第82-83页 |
7.7.1.4 肽段序列长度分布 | 第83页 |
7.7.1.5 鉴定肽段数量分布 | 第83-84页 |
7.7.1.6 肽段序列覆盖度 | 第84页 |
7.7.1.7 蛋白质鉴定质量评估 | 第84-85页 |
7.7.1.8 差异蛋白统计 | 第85-86页 |
7.7.1.9 蛋白质丰度比分布 | 第86-88页 |
7.7.2 蛋白GO功能注释和分类 | 第88-101页 |
7.7.3 String蛋白质相互作用图谱 | 第101-104页 |
7.7.4 KEGG注释和通路分析 | 第104-117页 |
第八章 结果分析及讨论 | 第117-123页 |
第九章 结论 | 第123-125页 |
致谢 | 第125-127页 |
参考文献 | 第127-135页 |
附录A | 第135页 |