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三七总皂苷对哮喘小鼠支气管重建的影响及分子机制初探

摘要第6-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第12-21页
第一章 绪论第21-35页
    1.1 哮喘及气道重建疾病的治疗现状第21-22页
    1.2 哮喘与过敏性炎症的发病机制第22-23页
    1.3 哮喘与过敏原第23页
    1.4 支气管上皮细胞结构第23-24页
    1.5 哮喘与炎症细胞、免疫细胞及炎症因子第24-30页
        1.5.1 炎症细胞第24-25页
        1.5.2 免疫细胞与哮喘第25-26页
        1.5.3 哮喘与IL-8、IL-10第26-27页
        1.5.4 哮喘与IL-13、IL-33第27-28页
        1.5.5 IL-17细胞分化第28页
        1.5.6 IL-17细胞与IL-21、IL-23第28-29页
        1.5.7 Th17细胞与IL-6、TGF-β1第29-30页
        1.5.8 Th17细胞生物效应第30页
    1.6 TGF-β及其生物学作用第30-31页
    1.7 哮喘与气道重构第31-33页
        1.7.1 气道重构第31页
        1.7.2 气道重构的发病机制第31-32页
        1.7.3 支气管气道结构的变化第32页
        1.7.4 气道重构的病理症状第32-33页
    1.8 三七的药理活性第33-35页
第二章 理论分析第35-45页
    2.1 气道重建与TGF-β1第35-36页
    2.2 Th17细胞与哮喘第36-37页
    2.3 慢性哮喘小鼠气道重建模型研究第37-38页
    2.4 活血化瘀药物与哮喘关系第38-39页
    2.5 三七与气道重建相关因素研究第39-40页
    2.6 蛋白质组学技术在中药作用机理研究中的应用第40-45页
        2.6.1 中药单体研究第41页
        2.6.2 单味中药研究第41-42页
        2.6.3 中药复方研究第42页
        2.6.4 实验设计方案第42-45页
第三章 哮喘模型的建立第45-49页
    3.1 材料与方法第45-46页
        3.1.1 实验动物第45页
        3.1.2 药物和试剂第45页
        3.1.3 主要仪器设备第45页
        3.1.4 主要溶液配制第45-46页
    3.2 动物分组、模型建立及药物干预第46-47页
        3.2.1 动物分组第46页
        3.2.2 模型建立及药物干预第46-47页
        3.2.3 药物干预试验第47页
    3.3 标本的获得、处理与检测第47-48页
        3.3.1 取材时间第47页
        3.3.2 肺组织的获得与处理第47-48页
    3.4 肺组织灌洗后的大体观图第48页
    3.5 结果及讨论第48-49页
第四章 H&E染色病理学观察第49-57页
    4.1 实验原理第49页
    4.2 石蜡切片的制备第49-51页
        4.2.1 试剂第49页
        4.2.2 主要仪器及设备第49-50页
        4.2.3 组织脱水、浸蜡第50页
            4.2.3.1 依次梯度酒精脱水第50页
            4.2.3.2 过二甲苯第50页
            4.2.3.3 浸蜡第50页
        4.2.4 石蜡包埋第50页
        4.2.5 石蜡切片的制作第50-51页
        4.2.6 切片过程第51页
    4.3 HE染色过程第51-52页
        4.3.1 试剂的配制第51-52页
        4.3.2 染色操作步骤第52页
    4.4 H&E染色组织病理学评分标准第52-53页
    4.5 H&E染色评分结果及讨论第53-57页
第五章 免疫组化及特殊染色第57-65页
    5.1 免疫组化染色第57-58页
        5.1.1 实验原理第57页
        5.1.2 主要试剂第57页
        5.1.3 试剂配制第57页
        5.1.4 实验步骤第57-58页
    5.2 特殊染色第58-60页
        5.2.1 预期用途第58页
        5.2.2 检验原理第58页
        5.2.3 主要组成成份第58-59页
        5.2.4 储存条件及有效期第59页
        5.2.5 适用仪器第59页
        5.2.6 样本要求第59页
        5.2.7 染色步骤第59页
        5.2.8 染色流程第59页
        5.2.9 染色结果第59-60页
    5.3 数据的获得第60页
        5.3.1 免疫组化测定TGF-β1及collagen Ⅲ含量第60页
        5.3.2 特殊染色测定基底膜厚度第60页
    5.4 结果及讨论第60-65页
        5.4.1 气道特殊染色及转化生长因子免疫组化检测第60-62页
        5.4.2 免疫组化测定三型胶原含量第62-65页
第六章 ELISA法测定IL-17含量第65-71页
    6.1 肺组织全蛋白浓度的定量第65页
        6.1.1 试剂第65页
        6.1.2 仪器第65页
        6.1.3 组织的预处理第65页
            6.1.3.1 肺组织的裂解第65页
            6.1.3.2 全蛋白定量第65页
    6.2 IL-17细胞因子的检测第65-68页
        6.2.1 实验原理第66页
        6.2.2 试剂第66页
        6.2.3 实验仪器及耗材第66-67页
        6.2.4 试剂的准备和保存第67页
        6.2.5 操作程序第67-68页
        6.2.6 统计分析第68页
    6.3 结果及讨论第68-71页
第七章 iTRAQ蛋白质组学技术分析差异蛋白第71-117页
    7.1 实验原理及步骤第71-79页
        7.1.1 实验原理第71页
        7.1.2 利用iTRAQ技术进行蛋白质组定量的优点第71-72页
        7.1.3 iTRAQ定量蛋白质组学实验的基本流程第72页
        7.1.4 标准生物信息分析第72-73页
        7.1.5 实验方法-蛋白质处理过程第73-74页
            7.1.5.1 蛋白提取第73页
            7.1.5.2 仪器及试剂第73页
            7.1.5.3 细胞破碎及蛋白提取第73页
            7.1.5.4 蛋白质定量第73页
            7.1.5.5 仪器及试剂第73-74页
            7.1.5.6 定量第74页
        7.1.6 蛋白FASP方法酶解及iTRAQ试剂标记第74-75页
            7.1.6.1 仪器及试剂第74页
            7.1.6.2 FASP方法酶解第74-75页
            7.1.6.3 iTRAQ试剂标记第75页
        7.1.7 第一维高pH-RP液相分离第75-76页
            7.1.7.1 仪器及试剂第75-76页
            7.1.7.2 操作步骤第76页
            7.1.7.3 参数第76页
        7.1.8 第二维反相液质联用RPLC-MS第76-79页
            7.1.8.1 仪器及试剂第76页
            7.1.8.2 具体操作步骤第76页
            7.1.8.3 液相参数第76-77页
            7.1.8.4 质谱参数第77页
            7.1.8.5 实验流程图第77-79页
    7.2 蛋白总体统计分析第79页
    7.3 GO基因本体分析第79页
    7.4 KEGG通路分析第79-80页
    7.5 蛋白质相互作用分析第80页
    7.6 蛋白质组学分析组别的选择第80-117页
        7.7.1 蛋白质总体统计分析第81-88页
            7.7.1.1 蛋白质基本鉴定分析第81-82页
            7.7.1.2 蛋白质相对分子质量分布第82页
            7.7.1.3 蛋白质等电点分布第82-83页
            7.7.1.4 肽段序列长度分布第83页
            7.7.1.5 鉴定肽段数量分布第83-84页
            7.7.1.6 肽段序列覆盖度第84页
            7.7.1.7 蛋白质鉴定质量评估第84-85页
            7.7.1.8 差异蛋白统计第85-86页
            7.7.1.9 蛋白质丰度比分布第86-88页
        7.7.2 蛋白GO功能注释和分类第88-101页
        7.7.3 String蛋白质相互作用图谱第101-104页
        7.7.4 KEGG注释和通路分析第104-117页
第八章 结果分析及讨论第117-123页
第九章 结论第123-125页
致谢第125-127页
参考文献第127-135页
附录A第135页

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