| 中文摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第16-24页 |
| 1.1 兽药残留的现状和危害 | 第16-17页 |
| 1.1.1 兽药残留的概述 | 第16页 |
| 1.1.2 兽药残留的危害 | 第16-17页 |
| 1.2 兽药残留检测方法及发展现状 | 第17-19页 |
| 1.2.1 仪器分析法 | 第18页 |
| 1.2.2 免疫分析法 | 第18-19页 |
| 1.3 氟苯尼考基本理化性质以及检测方法 | 第19-21页 |
| 1.3.1 氟苯尼考理化性质及毒性 | 第19页 |
| 1.3.2 FFC消除规律以及检测方法 | 第19-20页 |
| 1.3.3 氟苯尼考残留检测方法 | 第20-21页 |
| 1.4 人工抗原的合成的原则与方法 | 第21-22页 |
| 1.5 选题内容与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 氟苯尼考人工抗原的合成以及多克隆抗体的制备 | 第24-38页 |
| 2.1 材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 主要仪器与试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.2 溶液配制 | 第25-26页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 FFC-HS的合成 | 第26页 |
| 2.2.2 混合酸酐法FFC抗原合成 | 第26页 |
| 2.2.3 人工抗原的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.4 完全抗原结合比的计算: | 第27页 |
| 2.2.5 多克隆抗体的制备 | 第27页 |
| 2.2.6 抗血清采集与保存 | 第27-28页 |
| 2.2.7 抗体效价检测步骤 | 第28页 |
| 2.2.8 抗体特异性 | 第28页 |
| 2.2.9 多克隆抗体的纯化 | 第28-29页 |
| 2.2.10 多克隆抗体纯度测定 | 第29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-35页 |
| 2.3.1 紫外扫描鉴定结果 | 第29-31页 |
| 2.3.2 红外扫描鉴定结果 | 第31-33页 |
| 2.3.3 人工抗原结合比 | 第33页 |
| 2.3.4 抗血清效价测定 | 第33-34页 |
| 2.3.5 抗体特异性评判 | 第34页 |
| 2.3.6 多克隆抗体的纯化 | 第34-35页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第35-38页 |
| 第三章 氟苯尼考残留ELISA检测法的建立与应用 | 第38-50页 |
| 3.1 材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 主要试剂与仪器 | 第38页 |
| 3.1.2 溶液体系 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-42页 |
| 3.2.1 间接ELISA法建立 | 第39页 |
| 3.2.2 酶标板内均一性测定 | 第39页 |
| 3.2.3 最佳抗血清浓度与最佳包被浓度的选择 | 第39-40页 |
| 3.2.4 包被条件的选择 | 第40页 |
| 3.2.5 封闭液的选择 | 第40页 |
| 3.2.6 封闭时间的选择 | 第40页 |
| 3.2.7 竞争反应时间选择 | 第40页 |
| 3.2.8 标准品溶液PH选择 | 第40页 |
| 3.2.9 二抗反应时间的选择 | 第40页 |
| 3.2.10 洗液中吐温的含量的选择 | 第40页 |
| 3.2.11 TMB与底物液比例的选择 | 第40-41页 |
| 3.2.12 显色时间的选择 | 第41页 |
| 3.2.13 标准曲线的绘制 | 第41页 |
| 3.2.14 检测限的测定 | 第41页 |
| 3.2.15 ELISA方法特异行评价 | 第41页 |
| 3.2.16 方法精密度实验 | 第41-42页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第42-49页 |
| 3.3.1 酶标板均一性测定 | 第42页 |
| 3.3.2 棋盘法 | 第42-43页 |
| 3.3.3 包被条件的选择 | 第43页 |
| 3.3.4 封闭液的确定 | 第43-44页 |
| 3.3.5 封闭时间的优化 | 第44页 |
| 3.3.6 竞争时间的确定 | 第44页 |
| 3.3.7 标准品溶液pH的优化 | 第44-45页 |
| 3.3.8 二抗反应时间 | 第45页 |
| 3.3.9 吐温含量的确定 | 第45-46页 |
| 3.3.10 TMB与底物液浓度比例的确定 | 第46页 |
| 3.3.11 显色时间的优化 | 第46-47页 |
| 3.3.12 标准曲线 | 第47页 |
| 3.3.13 检测限的测定 | 第47-48页 |
| 3.3.14 ELISA方法特异行评价讨论 | 第48页 |
| 3.3.15 准确性和精密度 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 氟苯尼考残留BA-ELISA检测法的建立 | 第50-62页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第50页 |
| 4.1.1 试剂与仪器 | 第50页 |
| 4.1.2 溶液体系 | 第50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-53页 |
| 4.2.1 检测步骤 | 第50-51页 |
| 4.2.2 酶标板的均一性 | 第51页 |
| 4.2.3 抗原与抗体的最佳浓度 | 第51页 |
| 4.2.4 包被条件的选择 | 第51页 |
| 4.2.5 封闭液的选择 | 第51页 |
| 4.2.6 封闭时间的选择 | 第51-52页 |
| 4.2.7 亲和素BA反应时间选择 | 第52页 |
| 4.2.8 标准品溶液pH选择 | 第52页 |
| 4.2.9 洗液中吐温的含量的选择 | 第52页 |
| 4.2.10 SA-HRP作用时间的选择 | 第52页 |
| 4.2.11 TMB与底物液比例的选择 | 第52页 |
| 4.2.12 显色时间的选择 | 第52页 |
| 4.2.13 标准曲线的绘制 | 第52页 |
| 4.2.14 ELISA方法特异行评价 | 第52-53页 |
| 4.2.15 检测限 | 第53页 |
| 4.2.16 准确性和精密度检测 | 第53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-60页 |
| 4.3.1 酶标板均一性 | 第53页 |
| 4.3.2 最佳抗原抗体浓度选择 | 第53-54页 |
| 4.3.3 包被条件的选择 | 第54页 |
| 4.3.4 封闭液的选择 | 第54-55页 |
| 4.3.5 封闭时间选择 | 第55页 |
| 4.3.6 SA-HRP反应时间 | 第55-56页 |
| 4.3.7 标品溶液pH的选择 | 第56页 |
| 4.3.8 洗液中吐温含量的确定 | 第56-57页 |
| 4.3.9 BA反应时间的选择 | 第57页 |
| 4.3.10 TMB与底物液的比例的选择 | 第57-58页 |
| 4.3.11 显色时间的选择 | 第58页 |
| 4.3.12 标准曲线 | 第58-59页 |
| 4.3.13 BA-ELISA方法特异性评价 | 第59页 |
| 4.3.14 检测限的测定 | 第59-60页 |
| 4.3.15 准确性精密度 | 第60页 |
| 4.4 讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 结论与展望 | 第62-64页 |
| 符号说明 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 个人简历及联系方式 | 第73-75页 |