摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1 LIM蛋白的研究 | 第11-13页 |
·LIM蛋白的结构与分类 | 第11-12页 |
·LIM蛋白的功能 | 第12-13页 |
2 Ajuba蛋白的结构、功能及免疫应答 | 第13-15页 |
·Ajuba蛋白的结构 | 第13页 |
·Ajuba的生物学功能 | 第13-15页 |
·Ajuba参与免疫应答 | 第15页 |
3 草鱼呼肠孤病毒研究进展 | 第15-19页 |
4 预防和治疗 | 第19页 |
5 本文研究的目的与意义 | 第19-21页 |
第二章 草鱼Ajuba基因的克隆与表达 | 第21-35页 |
1. 材料和方法 | 第21-29页 |
·仪器与设备 | 第21页 |
·材料与试剂 | 第21-22页 |
·软件和在线分析工具 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-29页 |
·草鱼CIK细胞培养 | 第22-23页 |
·草鱼总RNA提取 | 第23-24页 |
·PCR产物纯化 | 第24页 |
·TA克隆和转化 | 第24页 |
·利用RACE技术获得Ajuba基因cDNA全长 | 第24-28页 |
·草鱼Ajuba基因的生物信息学分析 | 第28-29页 |
2. 结果与分析 | 第29-33页 |
·草鱼Ajuba基因cDNA全长 | 第29-30页 |
·草鱼Ajuba基因cDNA结构分析 | 第30-31页 |
·草鱼Ajuba的蛋白序列和同源分析 | 第31-33页 |
3. 讨论 | 第33-35页 |
第三章 病毒感染条件下Ajuba基因的表达研究 | 第35-42页 |
1 材料和方法 | 第35-39页 |
·仪器与设备 | 第35页 |
·材料与试剂 | 第35页 |
·所用软件 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-39页 |
·病毒毒株GCRV-JX01 的扩增 | 第35页 |
·病毒滴度测定 | 第35-36页 |
·病毒感染条件下样品的收集 | 第36页 |
·RNA提取 | 第36页 |
·cDNA合成 | 第36-37页 |
·实时荧光定量PCR | 第37-39页 |
2 结果与分析 | 第39-40页 |
·病毒感染细胞产生CPE现象 | 第39页 |
·gcAjuba在GCRV-JX01 感染下的表达 | 第39-40页 |
3. 讨论 | 第40-42页 |
第四章Ajuba与NS26 相互作用的初步探究 | 第42-51页 |
1 材料和方法 | 第42-47页 |
·仪器与设备 | 第42页 |
·材料与试剂 | 第42页 |
·使用软件 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-47页 |
·获得草鱼基因组cDNA | 第42页 |
·获得病毒株GCRV-JX01 基因组cDNA | 第42页 |
·质粒提取 | 第42-43页 |
·重组质粒构建 | 第43-44页 |
·重组质粒转染 | 第44-45页 |
·DAPI染色 | 第45页 |
·间接免疫荧光实验 | 第45页 |
·蛋白印迹实验 | 第45-47页 |
·免疫共沉淀实验 | 第47页 |
2 结果与分析 | 第47-49页 |
·gcAjuba与GCRV NS26 共定位 | 第47-49页 |
·CO-IP | 第49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
附录:论文发表情况 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |