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草鱼Ajuba蛋白在草鱼呼肠孤病毒感染CIK细胞过程中的表达及功能探讨

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-21页
 1 LIM蛋白的研究第11-13页
   ·LIM蛋白的结构与分类第11-12页
   ·LIM蛋白的功能第12-13页
 2 Ajuba蛋白的结构、功能及免疫应答第13-15页
   ·Ajuba蛋白的结构第13页
   ·Ajuba的生物学功能第13-15页
   ·Ajuba参与免疫应答第15页
 3 草鱼呼肠孤病毒研究进展第15-19页
 4 预防和治疗第19页
 5 本文研究的目的与意义第19-21页
第二章 草鱼Ajuba基因的克隆与表达第21-35页
 1. 材料和方法第21-29页
   ·仪器与设备第21页
   ·材料与试剂第21-22页
   ·软件和在线分析工具第22页
   ·实验方法第22-29页
     ·草鱼CIK细胞培养第22-23页
     ·草鱼总RNA提取第23-24页
     ·PCR产物纯化第24页
     ·TA克隆和转化第24页
     ·利用RACE技术获得Ajuba基因cDNA全长第24-28页
     ·草鱼Ajuba基因的生物信息学分析第28-29页
 2. 结果与分析第29-33页
   ·草鱼Ajuba基因cDNA全长第29-30页
   ·草鱼Ajuba基因cDNA结构分析第30-31页
   ·草鱼Ajuba的蛋白序列和同源分析第31-33页
 3. 讨论第33-35页
第三章 病毒感染条件下Ajuba基因的表达研究第35-42页
 1 材料和方法第35-39页
   ·仪器与设备第35页
   ·材料与试剂第35页
   ·所用软件第35页
   ·实验方法第35-39页
     ·病毒毒株GCRV-JX01 的扩增第35页
     ·病毒滴度测定第35-36页
     ·病毒感染条件下样品的收集第36页
     ·RNA提取第36页
     ·cDNA合成第36-37页
     ·实时荧光定量PCR第37-39页
 2 结果与分析第39-40页
   ·病毒感染细胞产生CPE现象第39页
   ·gcAjuba在GCRV-JX01 感染下的表达第39-40页
 3. 讨论第40-42页
第四章Ajuba与NS26 相互作用的初步探究第42-51页
 1 材料和方法第42-47页
   ·仪器与设备第42页
   ·材料与试剂第42页
   ·使用软件第42页
   ·实验方法第42-47页
     ·获得草鱼基因组cDNA第42页
     ·获得病毒株GCRV-JX01 基因组cDNA第42页
     ·质粒提取第42-43页
     ·重组质粒构建第43-44页
     ·重组质粒转染第44-45页
     ·DAPI染色第45页
     ·间接免疫荧光实验第45页
     ·蛋白印迹实验第45-47页
     ·免疫共沉淀实验第47页
 2 结果与分析第47-49页
   ·gcAjuba与GCRV NS26 共定位第47-49页
   ·CO-IP第49页
 3 讨论第49-51页
结论第51-52页
参考文献第52-61页
附录:论文发表情况第61-62页
致谢第62-63页

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