| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| ·耐受菌株的研究现状和挑战 | 第11-15页 |
| ·耐受菌株发育策略 | 第11页 |
| ·菌株耐受性的基因工程改造 | 第11-14页 |
| ·耐受菌株发育的局限 | 第14-15页 |
| ·强化菌株目标性能的组学指导策略 | 第15-19页 |
| ·组学指导菌株构建的研究进展 | 第15-18页 |
| ·代谢组学在菌株构建中的应用与研究 | 第18-19页 |
| ·全局转录调控在强化菌株性能中的应用与研究 | 第19-20页 |
| ·强化菌株目标性能的工程化策略 | 第20-21页 |
| ·基因表达强度的调控与适配 | 第20-21页 |
| ·蛋白的理性和非理性设计 | 第21页 |
| ·本课题的研究意义和主要内容 | 第21-24页 |
| ·研究意义 | 第21-22页 |
| ·主要研究内容 | 第22-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-37页 |
| ·菌株 | 第24-26页 |
| ·主要设备 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·培养基及试剂配制 | 第27-28页 |
| ·培养基配制 | 第27-28页 |
| ·生化试剂配制 | 第28页 |
| ·酵母菌株改造分子操作 | 第28-31页 |
| ·PCR扩增 | 第28-30页 |
| ·产物回收和酶切连接 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化和筛选 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌中质粒的提取和验证 | 第31页 |
| ·酵母转化 | 第31页 |
| ·酵母质粒及基因组提取 | 第31页 |
| ·细胞培养和取样 | 第31-33页 |
| ·代谢组分析 | 第33-36页 |
| ·胞内小分子代谢物的提取与衍生化 | 第33-34页 |
| ·胞内代谢物的检测 | 第34-35页 |
| ·多元统计分析 | 第35-36页 |
| ·ROS检测 | 第36页 |
| ·基因表达分析 | 第36-37页 |
| 第三章 酿酒酵母耐受复合抑制剂相关生物标志物的挖掘 | 第37-55页 |
| ·酿酒酵母对复合抑制剂的快速适应过程 | 第38-40页 |
| ·工业安琪酵母适应复合抑制剂过程中的代谢差异响应 | 第40-45页 |
| ·总体代谢水平变化 | 第40-42页 |
| ·中心碳代谢和氮代谢变化 | 第42-44页 |
| ·工业菌株适应复合抑制剂过程中的差异响应代谢物 | 第44-45页 |
| ·实验室酵母适应复合抑制剂过程中的代谢差异响应 | 第45-47页 |
| ·复合抑制剂耐受相关生物标志物的验证 | 第47-54页 |
| ·丙氨酸代谢、甘油代谢和谷氨酸、γ-氨基丁酸代谢 | 第48-50页 |
| ·脯氨酸代谢和肌醇代谢 | 第50-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第四章 基于脯氨酸和肌醇强化酵母细胞抑制剂耐受性的研究 | 第55-67页 |
| ·外源添加脯氨酸和肌醇对细胞抑制剂条件下生存能力的影响 | 第55-56页 |
| ·强化肌醇合成路径对细胞耐受性的影响 | 第56-59页 |
| ·强化脯氨酸合成路径对细胞耐受性的影响 | 第59-63页 |
| ·过表达PRO1基因对细胞耐受性的影响 | 第59-60页 |
| ·PRO1基因的突变对细胞耐受性的影响 | 第60-63页 |
| ·脯氨酸合成调控细胞抑制剂耐受性的作用机制 | 第63-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 第五章 异源γ-氨基丁酸反向转运蛋白强化酵母菌株抑制剂耐受性的研究 | 第67-80页 |
| ·酿酒酵母中依赖于谷氨酸脱羧酶系统的质子泵组建策略 | 第68-69页 |
| ·GadC模块对细胞耐酸性的影响研究 | 第69-72页 |
| ·GadC模块与胞内谷氨酸和GABA代谢的相互影响 | 第72-75页 |
| ·重组酵母和对照菌株代谢水平上对乙酸的差异响应分析 | 第75-79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 第六章 异源全局调控因子IrrE强化酵母菌株抑制剂耐受性的研究 | 第80-94页 |
| ·IrrE强化酵母细胞抑制剂耐受性的研究策略 | 第80-81页 |
| ·IrrE功能模块对细胞耐受性的影响 | 第81-82页 |
| ·IrrE蛋白的定向进化筛选抑制剂耐受性增强的菌株 | 第82-83页 |
| ·突变菌株对复合抑制剂耐受性的比较分析 | 第83-86页 |
| ·温度对突变菌株抑制剂耐受性的影响 | 第86-90页 |
| ·IrrE突变位点分析 | 第90-93页 |
| ·小结 | 第93-94页 |
| 第七章 五六碳糖共发酵时影响菌株抑制剂耐受性的限制因素解析 | 第94-112页 |
| ·木糖发酵菌株抑制剂环境下五六碳糖发酵特性 | 第94-97页 |
| ·影响木糖发酵菌株葡萄糖阶段耐受性的关键因素 | 第97-104页 |
| ·影响木糖发酵菌木糖发酵阶段耐受性的关键因素 | 第104-110页 |
| ·木糖代谢所引起的特异代谢响应分析 | 第104-106页 |
| ·木糖代谢阶段菌株在代谢水平上对复合抑制剂的显著响应 | 第106-110页 |
| ·讨论 | 第110-111页 |
| ·小结 | 第111-112页 |
| 第八章 结论与展望 | 第112-115页 |
| ·结论 | 第112-113页 |
| ·创新点 | 第113-114页 |
| ·展望 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-128页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第128-130页 |
| 附录 | 第130-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
