荜茇根提取物对胆汁反流性胃炎物质基础和药效学初步研究

【摘要】：目的:对维药荜茇根(Piper longum of root)进行物质基础的初步研究并探讨荜茇根提取物对胆汁反流性胃炎(BRG)模型大鼠的影响及其作用机制。方法:对荜茇根乙醇提取后进行二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇梯度萃取,将所得乙酸乙酯及正丁醇提取物通过BRG模型大鼠进行药效学筛选,利用放免法、病理组织学、免疫组化等技术,从病理组织学改变、胃肠激素、炎症介质等角度研究荜茇根提取物对BRG的作用及初步的作用机制。结果:1.通过高效液相色谱法对三批荜茇根中的胡椒碱进行含量测定,测得1g荜茇根中含有0.23mg的胡椒碱。2.荜茇根乙醇提取的优选工艺:乙醇浓度70%,溶媒量为10倍量,提取次数为2次,提取时间为4h。3.(1)与模型组相比,荜茇根乙酸乙酯提取物中(250mg﹒kg-1)、低(125 mg﹒kg-1)剂量组及荜茇根正丁醇提取物高剂量组(400 mg﹒kg-1)对BRG模型大鼠血清中GAS有抑制作用(P0.05);与模型组相比,荜茇根乙酸乙酯提取物低(125 mg﹒kg-1)剂量组及荜茇根正丁醇提取物高(400 mg﹒kg-1)、中(250 mg﹒kg-1)、低(125 mg﹒kg-1)剂量组对BRG模型大鼠血清中TNF-α有明显的抑制作用(P0.01)。(2)在光镜下观察胃粘膜病理组织,与模型组相比,荜茇根乙酸乙酯提取物低(125 mg﹒kg-1)剂量组及荜茇根正丁醇提取物高(400 mg﹒kg-1)剂量组对胃粘膜有保护作用(P0.05)。(3)利用免疫组化技术检测发现,与模型组相比,多潘立酮组、荜茇根乙酸乙酯提取物低剂量(125 mg﹒kg-1)组及荜茇根正丁醇高剂量(400 mg﹒kg-1)组可以减少癌基因表达产物C-erb-B2蛋白阳性表达量(P0.05);荜茇根正丁醇提取物高剂量(400 mg﹒kg-1)组可以减少癌基因表达产物PCNA蛋白阳性表达量(P0.05)。结论:荜茇根乙酸乙酯及正丁醇提取物对BRG模型大鼠胃粘膜有一定的保护作用,其中荜茇根乙酸乙酯提取物低剂量组及正丁醇提取物高剂量组对胃粘膜的保护作用最为明显,其作用机制可能是通过抑制炎性介质GAS、TNF-α及癌基因C-erb-B2、PCNA蛋白表达产生胃粘膜的保护作用。
【关键词】：胆汁反流性胃炎 荜茇根 病理组织学 放免法 免疫组化
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5