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柞蚕Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因克隆及表达特征分析

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
1 文献综述第7-13页
   ·先天免疫第7页
   ·细胞免疫第7页
   ·体液免疫第7页
   ·蛋白酶抑制剂简述第7-8页
   ·丝氨酸蛋白酶抑制剂分布第8页
   ·丝氨酸蛋白酶抑制剂的分类第8-11页
     ·Kazal家族第9-10页
     ·Bowman-Birk家族第10页
     ·Kunitz家族第10页
     ·PI-I和PI-II第10-11页
   ·其他相关免疫基因简述第11-13页
     ·抗菌肽第11-12页
     ·抗病毒因子第12页
     ·凝集素第12页
       ·外源凝集素第12页
     ·溶菌酶第12-13页
2 引言第13-15页
   ·研究的目的及意义第13页
   ·研究内容第13-15页
     ·柞蚕ApKTSPI基因的克隆第13-14页
     ·ApKTSPI基因在柞蚕不同组织的表达分析第14页
     ·柞蚕免疫刺激处理后ApKTSPI基因表达模式分析第14页
     ·ApKTSPI基因的原核表达第14页
     ·技术路线第14-15页
3 材料与方法第15-27页
   ·实验材料第15页
   ·仪器与试剂第15-18页
     ·主要实验仪器第15页
     ·主要生化试剂第15-16页
     ·常用溶液的配置第16-18页
   ·实验方法第18-27页
     ·柞蚕饲养第18页
     ·柞蚕组织的收集第18页
     ·柞蚕总RNA的提取第18页
     ·提取的总RNA的质量检测第18-19页
     ·引物设计第19页
     ·ApKTSPI cDNA 3’端序列扩增第19-20页
     ·ApKTSPI cDNA 5’端序列扩增第20-23页
     ·PCR产物的纯化第23页
     ·目的片段与pMD-19T连接和转化第23页
     ·序列的测序,拼接与分析第23-24页
     ·实时定量PCR方法第24页
     ·ApKTSPI基因在柞蚕不同组织的表达分析第24页
     ·柞蚕免疫刺激处理后ApKTSPI基因表达模式分析第24-25页
     ·ApKTSPI基因的原核表达载体构建第25-26页
     ·ApKTSPI重组蛋白诱导表达第26页
     ·重组蛋白检测第26-27页
4 结果第27-35页
   ·ApKTSPI基因克隆与序列分析第27-30页
   ·ApKTSPI基因在柞蚕幼虫组织的表达分布第30-31页
   ·免疫刺激后ApKTSPI基因在柞蚕幼虫脂肪体中的表达第31-33页
   ·ApKTSPI的原核表达第33-35页
     ·ApKTSPI基因在T载体上的克隆鉴定第33页
     ·重组ApKTSPI蛋白的SDS-PAGE检测第33-35页
5 讨论第35-36页
6 结论第36-37页
参考文献第37-44页
致谢第44-45页
个人简介第45页
读研期间发表的论文第45页

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