| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| ·血流切应力对ECs的影响 | 第12-13页 |
| ·代谢组学的研究状况 | 第13-14页 |
| ·丹参作用机理的研究进展 | 第14-15页 |
| ·牛磺酸研究进展 | 第15页 |
| ·miRNA的研究现状 | 第15-18页 |
| ·miRNA细胞功能调节中的作用 | 第16页 |
| ·miRNA在切应力作用下的表达及作用 | 第16-17页 |
| ·miR-21、miR-24的研究进展 | 第17-18页 |
| ·eNOS与转录因子Sp1的研究现状 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第19-33页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·主要试剂的成分及配制 | 第19-20页 |
| ·细胞培养 | 第20-21页 |
| ·原代细胞培养 | 第20页 |
| ·细胞传代 | 第20-21页 |
| ·细胞鉴定 | 第21页 |
| ·内皮细胞切应力加载 | 第21-23页 |
| ·细胞培养 | 第21-22页 |
| ·切应力加载 | 第22-23页 |
| ·低切应力作用下VCAM、ICAM、eNOS的RT-PCR检测 | 第23-25页 |
| ·内皮细胞生长因子ICAM、VCAM、eNOS的设计和合成 | 第23页 |
| ·各组细胞总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·逆转录cDNA | 第24-25页 |
| ·切应力诱导内皮细胞的GS-MS代谢组学研究 | 第25-28页 |
| ·样品前处理 | 第25页 |
| ·上机检测 | 第25-26页 |
| ·数据预处理 | 第26页 |
| ·代谢组学检测结果 | 第26-28页 |
| ·牛磺酸转运体及牛磺酸限速酶基因mRNA的表达差异 | 第28-29页 |
| ·牛磺酸转运体及限速酶引物的设计与合成 | 第28-29页 |
| ·各组细胞总RNA提取 | 第29页 |
| ·逆转录cDNA | 第29页 |
| ·RT-PCR扩增目的片段 | 第29页 |
| ·PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳实验 | 第29页 |
| ·实时荧光定量PCR检测内皮细胞miR-21、miR-24的表达水平 | 第29-32页 |
| ·Taut 靶基因预测 | 第29页 |
| ·细胞准备 | 第29-30页 |
| ·细胞miRNA的抽提 | 第30页 |
| ·逆转录反应 | 第30页 |
| ·实时荧光定量PCR反应 | 第30-31页 |
| ·miRNA 转染实验 | 第31-32页 |
| ·统计学分析 | 第32-33页 |
| 第三章 实验结果 | 第33-42页 |
| ·原代脐静脉内皮细胞的形态学观察和鉴定 | 第33页 |
| ·低切应力下内皮细胞几种生长因子基因的表达的影响 | 第33-34页 |
| ·丹参对低切应力下生长因子表达的影响 | 第34-35页 |
| ·低切应力对Taut和两种限速酶CDO、CSAD-3 的表达影响 | 第35页 |
| ·丹参对Taut和两种限速酶CDO、CSAD-3 的表达影响 | 第35-36页 |
| ·Q-PCR预实验荧光染色 | 第36-37页 |
| ·si RNA 片段转染对 Taut 表达的影响 | 第37-38页 |
| ·si RNA 片段转染对 VCAM、ICAM、e NOS 表达的影响 | 第38页 |
| ·mir-21、mir-24 在内皮细胞中的表达 | 第38-39页 |
| ·mir-24 对 Taut、e NOS 的 m RNA 表达影响 | 第39-42页 |
| 第四章 讨论 | 第42-46页 |
| ·切应力调控血管细胞中VCAM、ICAM、eNOS的表达 | 第42-44页 |
| ·丹参对VCAM、ICAM mRNA表达的影响 | 第44页 |
| ·代谢组学结果的分析 | 第44-45页 |
| ·丹参对Taut、CDO表达的影响 | 第45页 |
| ·mi R-24对在内皮细胞中的表达结果 | 第45-46页 |
| 总结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 附录 | 第55-57页 |
| 附录A：缩略词 | 第55-56页 |
| 附录B：攻读学位期间取得的研究成果 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
