摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
·疟疾 | 第11页 |
·青蒿 | 第11-12页 |
·青蒿素 | 第12-13页 |
·青蒿素衍生物 | 第13-14页 |
·青蒿素的合成、储存部位——腺毛体 | 第14-16页 |
·青蒿素的生物合成途径 | 第16-25页 |
·青蒿素生物合成上游途径 | 第16-22页 |
·青蒿素生物合成下游途径 | 第22-25页 |
第二章 绪论 | 第25-29页 |
·研究目的与意义 | 第25-26页 |
·研究范围与内容 | 第26-27页 |
·技术路线 | 第27-29页 |
第三章 材料与方法 | 第29-53页 |
·实验材料及试剂耗材 | 第29-30页 |
·植物材料 | 第29页 |
·菌株和质粒 | 第29页 |
·仪器和设备 | 第29页 |
·试剂及试剂盒 | 第29-30页 |
·自配试剂 | 第30页 |
·常规方法与步骤 | 第30-36页 |
·RNA提取 | 第30-31页 |
·RNA反转录为cDNA | 第31-33页 |
·CTAB法提DNA | 第33页 |
·目的条带胶回收 | 第33页 |
·目的片段与克隆载体T连接 | 第33-34页 |
·大肠杆菌感受态制备(CaCl2法) | 第34页 |
·连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第34-35页 |
·农杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) | 第35页 |
·植物表达载体转化农杆菌感受态细胞 | 第35页 |
·质粒提取 | 第35-36页 |
·基因克隆 | 第36-40页 |
·青蒿cDNA第一链的合成 | 第36页 |
·青蒿AaMCT基因的克隆 | 第36-38页 |
·青蒿AaCMK基因的克隆 | 第38-39页 |
·青蒿AaMCS基因的克隆 | 第39-40页 |
·生物信息学分析 | 第40页 |
·AaMCT、AaCMK、AaMCS的组织表达分析 | 第40-42页 |
·青蒿腺毛体的分离 | 第40-41页 |
·荧光定量cDNA的合成 | 第41页 |
·qPCR反应 | 第41-42页 |
·AaMCT、AaCMK、AaMCS的诱导表达分析 | 第42页 |
·亚细胞定位 | 第42-46页 |
·AaMCT亚细胞定位载体构建 | 第42-45页 |
·AaCMK亚细胞定位载体构建 | 第45页 |
·AaMCS亚细胞定位载体构建 | 第45页 |
·瞬时转化烟草叶片 | 第45-46页 |
·植物表达载体的构建和叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的测定 | 第46-50页 |
·AaMCT超量表达载体的构建 | 第46-48页 |
·AaCMK超量表达载体的构建 | 第48页 |
·AaMCS超量表达载体的构建 | 第48-49页 |
·拟南芥的转化 | 第49页 |
·拟南芥阳性植株的筛选 | 第49页 |
·叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量的测定 | 第49-50页 |
·青蒿AaMCS基因的功能互补实验 | 第50-53页 |
·原核表达载体的构建 | 第50-52页 |
·AaMCS基因的功能验证 | 第52-53页 |
第四章 结果与讨论 | 第53-75页 |
·青蒿AaMCT基因克隆与分析 | 第53-56页 |
·AaMCT基因的克隆 | 第53页 |
·AaMCT生物信息学分析 | 第53-56页 |
·青蒿AaCMK基因克隆与分析 | 第56-60页 |
·AaCMK基因的克隆 | 第56-57页 |
·AaCMK生物信息学分析 | 第57-60页 |
·青蒿AaMCS基因克隆与分析 | 第60-64页 |
·AaMCS基因的克隆 | 第60-61页 |
·AaMCS生物信息学分析 | 第61-64页 |
·AaMCT、AaCMK、AaMCS的组织表达分析 | 第64-65页 |
·AaMCT、AaCMK、AaMCS的诱导表达分析 | 第65-67页 |
·AaMCT、AaCMK、AaMCS的亚细胞定位 | 第67-69页 |
·转基因拟南芥中叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的测定 | 第69-73页 |
·转AaMCT拟南芥中叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的测定 | 第69-70页 |
·转AaCMK拟南芥中叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的测定 | 第70-72页 |
·转AaMCS拟南芥中叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的测定 | 第72-73页 |
·AaMCS基因的功能验证 | 第73-75页 |
第五章 结论与展望 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-87页 |
附录 | 第87-92页 |
附录 1:常用抗生素及培养基的配置 | 第87-88页 |
附录 2:MS培养基配方 | 第88-89页 |
附录 3: 缩略词表 | 第89-91页 |
附录 4:硕士期间发表论文 | 第91-92页 |
致谢 | 第92页 |