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青蒿AaCMK、AaMCT、AaMCS基因的克隆与功能分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-25页
   ·疟疾第11页
   ·青蒿第11-12页
   ·青蒿素第12-13页
   ·青蒿素衍生物第13-14页
   ·青蒿素的合成、储存部位——腺毛体第14-16页
   ·青蒿素的生物合成途径第16-25页
     ·青蒿素生物合成上游途径第16-22页
     ·青蒿素生物合成下游途径第22-25页
第二章 绪论第25-29页
   ·研究目的与意义第25-26页
   ·研究范围与内容第26-27页
   ·技术路线第27-29页
第三章 材料与方法第29-53页
   ·实验材料及试剂耗材第29-30页
     ·植物材料第29页
     ·菌株和质粒第29页
     ·仪器和设备第29页
     ·试剂及试剂盒第29-30页
     ·自配试剂第30页
   ·常规方法与步骤第30-36页
     ·RNA提取第30-31页
     ·RNA反转录为cDNA第31-33页
     ·CTAB法提DNA第33页
     ·目的条带胶回收第33页
     ·目的片段与克隆载体T连接第33-34页
     ·大肠杆菌感受态制备(CaCl2法)第34页
     ·连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞第34-35页
     ·农杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法)第35页
     ·植物表达载体转化农杆菌感受态细胞第35页
     ·质粒提取第35-36页
   ·基因克隆第36-40页
     ·青蒿cDNA第一链的合成第36页
     ·青蒿AaMCT基因的克隆第36-38页
     ·青蒿AaCMK基因的克隆第38-39页
     ·青蒿AaMCS基因的克隆第39-40页
   ·生物信息学分析第40页
   ·AaMCT、AaCMK、AaMCS的组织表达分析第40-42页
     ·青蒿腺毛体的分离第40-41页
     ·荧光定量cDNA的合成第41页
     ·qPCR反应第41-42页
   ·AaMCT、AaCMK、AaMCS的诱导表达分析第42页
   ·亚细胞定位第42-46页
     ·AaMCT亚细胞定位载体构建第42-45页
     ·AaCMK亚细胞定位载体构建第45页
     ·AaMCS亚细胞定位载体构建第45页
     ·瞬时转化烟草叶片第45-46页
   ·植物表达载体的构建和叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的测定第46-50页
     ·AaMCT超量表达载体的构建第46-48页
     ·AaCMK超量表达载体的构建第48页
     ·AaMCS超量表达载体的构建第48-49页
     ·拟南芥的转化第49页
     ·拟南芥阳性植株的筛选第49页
     ·叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量的测定第49-50页
   ·青蒿AaMCS基因的功能互补实验第50-53页
     ·原核表达载体的构建第50-52页
     ·AaMCS基因的功能验证第52-53页
第四章 结果与讨论第53-75页
   ·青蒿AaMCT基因克隆与分析第53-56页
     ·AaMCT基因的克隆第53页
     ·AaMCT生物信息学分析第53-56页
   ·青蒿AaCMK基因克隆与分析第56-60页
     ·AaCMK基因的克隆第56-57页
     ·AaCMK生物信息学分析第57-60页
   ·青蒿AaMCS基因克隆与分析第60-64页
     ·AaMCS基因的克隆第60-61页
     ·AaMCS生物信息学分析第61-64页
   ·AaMCT、AaCMK、AaMCS的组织表达分析第64-65页
   ·AaMCT、AaCMK、AaMCS的诱导表达分析第65-67页
   ·AaMCT、AaCMK、AaMCS的亚细胞定位第67-69页
   ·转基因拟南芥中叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的测定第69-73页
     ·转AaMCT拟南芥中叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的测定第69-70页
     ·转AaCMK拟南芥中叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的测定第70-72页
     ·转AaMCS拟南芥中叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的测定第72-73页
   ·AaMCS基因的功能验证第73-75页
第五章 结论与展望第75-77页
参考文献第77-87页
附录第87-92页
 附录 1:常用抗生素及培养基的配置第87-88页
 附录 2:MS培养基配方第88-89页
 附录 3: 缩略词表第89-91页
 附录 4:硕士期间发表论文第91-92页
致谢第92页

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