缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-23页 |
·荞麦简介 | 第11-14页 |
·荞麦的分类 | 第11页 |
·荞麦的分布 | 第11-12页 |
·苦荞的营养价值和药用价值 | 第12-14页 |
·苦荞的育种现状 | 第14页 |
·基因组文库的研究进展 | 第14-17页 |
·噬菌体系列 | 第14-15页 |
·人工染色体系列 | 第15-16页 |
·多元载体BIBAC、TAC文库 | 第16-17页 |
·BAC文库的应用 | 第17-19页 |
·基因的图位克隆 | 第17-18页 |
·物理图谱的构建 | 第18页 |
·全基因组测序 | 第18-19页 |
·比较基因组学研究 | 第19页 |
·BAC末端序列研究进展 | 第19-21页 |
·DNA测序技术的研究进展 | 第19-20页 |
·BAC末端序列测序 | 第20-21页 |
·实时荧光定量PCR原理及应用 | 第21-23页 |
·实时荧光定量PCR的原理 | 第21页 |
·实时荧光定量PCR技术的几个重要参数 | 第21-22页 |
·定量方法 | 第22页 |
·实时荧光定量PCR技术的应用 | 第22-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23页 |
2 材料和方法 | 第23-33页 |
·试验材料 | 第23-24页 |
·试验主要试剂及仪器 | 第24-25页 |
·苦荞BAC文库构建及质量鉴定 | 第25-29页 |
·高分子量核DNA的制备 | 第25-26页 |
·高分子量核DNA的酶切 | 第26-28页 |
·大量酶切 | 第28页 |
·大片段DNA的选择 | 第28页 |
·BAC文库的构建 | 第28-29页 |
·BAC文库的质量检测 | 第29页 |
·BAC文库克隆的挑取 | 第29页 |
·BAC末端序列和BAC全长序列测序及Blastn分析 | 第29-30页 |
·目的基因实时荧光定量PCR分析 | 第30-33页 |
·总RNA的提取 | 第30页 |
·总RNA完整性检测 | 第30页 |
·引物设计 | 第30-31页 |
·cDNA第一链合成 | 第31页 |
·目的基因全长序列的扩增分析 | 第31-32页 |
·目的基因的实时荧光定量PCR分析 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-45页 |
·苦荞BAC文库构建及质量鉴定 | 第33-35页 |
·高分子量核DNA经过酶切后检测酶切质量 | 第33-34页 |
·BAC文库的构建 | 第34页 |
·BAC克隆插入片段大小及空载率的检测 | 第34-35页 |
·BAC末端序列的比对结果 | 第35-38页 |
·BAC克隆全长序列测序分析 | 第38-39页 |
·实时定量PCR分析 | 第39-45页 |
·引物设计 | 第39-40页 |
·RNA样品质量检测 | 第40-41页 |
·目的基因普通PCR扩增 | 第41-42页 |
·荧光定量PCR扩增曲线和溶解曲线的鉴定 | 第42-43页 |
·目的基因的实时荧光定量PCR分析结果 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
·BAC文库的构建 | 第45-46页 |
·BAC末端序列及全长序列BLAST结果 | 第46-47页 |
·与开花、种子发育和脯氨酸合成相关基因表达的实时荧光定量PCR分析 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59-60页 |
附表及附图 | 第60-96页 |