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苦荞BAC文库的构建及BAC末端序列分析

缩略词表第1-8页
摘要第8-9页
ABSTRACT第9-11页
1 引言第11-23页
   ·荞麦简介第11-14页
     ·荞麦的分类第11页
     ·荞麦的分布第11-12页
     ·苦荞的营养价值和药用价值第12-14页
     ·苦荞的育种现状第14页
   ·基因组文库的研究进展第14-17页
     ·噬菌体系列第14-15页
     ·人工染色体系列第15-16页
     ·多元载体BIBAC、TAC文库第16-17页
   ·BAC文库的应用第17-19页
     ·基因的图位克隆第17-18页
     ·物理图谱的构建第18页
     ·全基因组测序第18-19页
     ·比较基因组学研究第19页
   ·BAC末端序列研究进展第19-21页
     ·DNA测序技术的研究进展第19-20页
     ·BAC末端序列测序第20-21页
   ·实时荧光定量PCR原理及应用第21-23页
     ·实时荧光定量PCR的原理第21页
     ·实时荧光定量PCR技术的几个重要参数第21-22页
     ·定量方法第22页
     ·实时荧光定量PCR技术的应用第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23页
2 材料和方法第23-33页
   ·试验材料第23-24页
   ·试验主要试剂及仪器第24-25页
   ·苦荞BAC文库构建及质量鉴定第25-29页
     ·高分子量核DNA的制备第25-26页
     ·高分子量核DNA的酶切第26-28页
     ·大量酶切第28页
     ·大片段DNA的选择第28页
     ·BAC文库的构建第28-29页
     ·BAC文库的质量检测第29页
     ·BAC文库克隆的挑取第29页
   ·BAC末端序列和BAC全长序列测序及Blastn分析第29-30页
   ·目的基因实时荧光定量PCR分析第30-33页
     ·总RNA的提取第30页
     ·总RNA完整性检测第30页
     ·引物设计第30-31页
     ·cDNA第一链合成第31页
     ·目的基因全长序列的扩增分析第31-32页
     ·目的基因的实时荧光定量PCR分析第32-33页
3 结果与分析第33-45页
   ·苦荞BAC文库构建及质量鉴定第33-35页
     ·高分子量核DNA经过酶切后检测酶切质量第33-34页
     ·BAC文库的构建第34页
     ·BAC克隆插入片段大小及空载率的检测第34-35页
   ·BAC末端序列的比对结果第35-38页
   ·BAC克隆全长序列测序分析第38-39页
   ·实时定量PCR分析第39-45页
     ·引物设计第39-40页
     ·RNA样品质量检测第40-41页
     ·目的基因普通PCR扩增第41-42页
     ·荧光定量PCR扩增曲线和溶解曲线的鉴定第42-43页
     ·目的基因的实时荧光定量PCR分析结果第43-45页
4 讨论第45-48页
   ·BAC文库的构建第45-46页
   ·BAC末端序列及全长序列BLAST结果第46-47页
   ·与开花、种子发育和脯氨酸合成相关基因表达的实时荧光定量PCR分析第47-48页
5 结论第48-49页
参考文献第49-57页
致谢第57-58页
攻读硕士学位期间发表的论文第58-59页
作者简介第59-60页
附表及附图第60-96页

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