| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 图表目录 | 第12-14页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-27页 |
| ·呋喃唑酮 | 第16-17页 |
| ·基本情况 | 第16页 |
| ·呋喃唑酮毒性作用 | 第16-17页 |
| ·细胞凋亡 | 第17-20页 |
| ·细胞凋亡的特征 | 第18页 |
| ·细胞凋亡的分子信号通路 | 第18-20页 |
| ·p21~(Waf1/Cip1) | 第20-24页 |
| ·p21的基本结构 | 第21页 |
| ·p21生物学功能 | 第21-23页 |
| ·p21表达的调控 | 第23-24页 |
| ·PI3K/Akt信号通路 | 第24-25页 |
| ·研究目的与意义 | 第25-27页 |
| 第二章 呋喃唑酮对HepG2细胞凋亡的作用研究 | 第27-53页 |
| ·材料 | 第27-29页 |
| ·药物 | 第27页 |
| ·细胞株 | 第27页 |
| ·试剂盒 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-38页 |
| ·溶液配制 | 第29-31页 |
| ·细胞培养 | 第31-32页 |
| ·细胞增殖率测定(MTT法) | 第32页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第32-33页 |
| ·细胞内ROS水平的测定 | 第33页 |
| ·线粒体膜电位的测定 | 第33页 |
| ·caspase酶活性测定 | 第33-34页 |
| ·Real-time qPCR检测凋亡相关基因mRNA的变化 | 第34-36页 |
| ·Western Blot检测凋亡相关蛋白的表达 | 第36-38页 |
| ·自由基清除剂NAC对呋喃唑酮引起凋亡的保护作用 | 第38页 |
| ·数据分析 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-49页 |
| ·呋喃唑酮引起HepG2细胞增殖抑制和凋亡 | 第38-40页 |
| ·NAC对呋喃唑诱导HepG2细胞凋亡的影响 | 第40-42页 |
| ·呋喃唑酮对HepG2细胞内ROS水平的影响 | 第42-43页 |
| ·呋喃唑酮对HepG2细胞线粒体膜电位的影响 | 第43-44页 |
| ·caspase酶活性的变化 | 第44-46页 |
| ·caspase抑制剂对细胞凋亡的影响 | 第46页 |
| ·呋喃唑酮对HepG2细胞内凋亡相关基因mRNA及蛋白水平的影响 | 第46-48页 |
| ·NAC对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·呋喃唑酮的细胞毒性 | 第49-50页 |
| ·呋喃唑酮诱导HepG2细胞凋亡及其分子信号通路 | 第50-51页 |
| ·ROS生成与凋亡 | 第51页 |
| ·小结 | 第51-53页 |
| 第三章 PI3K/Akt信号通路在呋喃唑酮HepG2细胞凋亡中的作用研究 | 第53-67页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·药物 | 第53页 |
| ·细胞株 | 第53页 |
| ·试剂盒 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·溶液配制 | 第54页 |
| ·细胞攻毒 | 第54页 |
| ·细胞增殖率测定(MTT法) | 第54页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量检测细胞凋亡 | 第54页 |
| ·细胞内ROS水平的测定 | 第54页 |
| ·线粒体膜电位的测定 | 第54页 |
| ·caspase酶活性测定 | 第54页 |
| ·Real-time qPCR检测Akt mRNA的变化 | 第54-55页 |
| ·Western Blot检测总Akt,p-Akt以及凋亡相关蛋白的表达 | 第55页 |
| ·数据分析 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-64页 |
| ·呋喃唑酮对PI3K/Akt mRNA及蛋白表达水平的影响 | 第55-56页 |
| ·抗氧化剂NAC对Akt及p-Akt蛋白水平影响 | 第56-57页 |
| ·PI3K/Akt在呋喃唑酮诱导HepG2细胞凋亡中的作用 | 第57-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·呋喃唑酮对PI3K/Akt信号通路的作用 | 第64-65页 |
| ·PI3K/Akt通路对细胞增殖及细胞凋亡的作用 | 第65页 |
| ·小结 | 第65-67页 |
| 第四章 p21在呋喃唑酮诱导HepG2细胞凋亡中的作用 | 第67-98页 |
| ·材料 | 第67-69页 |
| ·药物 | 第67页 |
| ·细胞株 | 第67页 |
| ·菌株 | 第67-68页 |
| ·质粒 | 第68页 |
| ·试剂盒 | 第68页 |
| ·主要试剂 | 第68-69页 |
| ·主要仪器 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-76页 |
| ·溶液的配制 | 第69-70页 |
| ·Real-time qPCR检测p21 mRNA的变化 | 第70页 |
| ·Western Blot检测p21,Nrf2和HO-1蛋白的表达 | 第70页 |
| ·p21蛋白质半衰期测定 | 第70-71页 |
| ·p21蛋白泛素化检测 | 第71-72页 |
| ·免疫荧光 | 第72页 |
| ·胞质胞核蛋白提取 | 第72-73页 |
| ·pCMV-p21表达质粒构建 | 第73-75页 |
| ·质粒提取 | 第75页 |
| ·细胞转染 | 第75-76页 |
| ·细胞增殖率测定(MTT法) | 第76页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量检测细胞凋亡 | 第76页 |
| ·细胞内ROS水平的测定 | 第76页 |
| ·caspase酶活性测定 | 第76页 |
| ·数据分析 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-93页 |
| ·呋喃唑酮对p21基因mRNA和蛋白水平表达的影响 | 第76-77页 |
| ·呋喃唑酮对p21蛋白稳定性的影响 | 第77-79页 |
| ·呋喃唑酮对p21蛋白细胞定位的影响 | 第79-80页 |
| ·PI3K/Akt通路对p21蛋白表达的影响 | 第80-83页 |
| ·pCMV-p21表达质粒鉴定与转染效率检测结果 | 第83-86页 |
| ·p21对呋喃唑酮导致的HepG2细胞增殖抑制以及凋亡的影响 | 第86-88页 |
| ·p21对caspase蛋白的表达以及活性的影响 | 第88-90页 |
| ·p21对细胞ROS水平的影响 | 第90-91页 |
| ·p21对Nrf2/HO-1通路的影响 | 第91-93页 |
| ·讨论 | 第93-97页 |
| ·呋喃唑酮对p21蛋白表达的影响 | 第93-95页 |
| ·PI3K/Akt通路对p21蛋白表达的影响 | 第95页 |
| ·p21对呋喃唑酮诱导的HepG2细胞增殖抑制与凋亡中的作用 | 第95-96页 |
| ·p21对细胞内ROS生成的影响 | 第96-97页 |
| ·小结 | 第97-98页 |
| 第五章 结论及研究展望 | 第98-101页 |
| ·结论 | 第98-100页 |
| ·研究展望 | 第100-101页 |
| 第六章 创新点 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 个人简介 | 第114页 |
