英文缩略词 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
引言 | 第8-11页 |
实验材料 | 第11-17页 |
1 动物及细胞株 | 第11页 |
2 实验器材 | 第11-12页 |
3 主要试剂 | 第12-13页 |
4 试剂配制 | 第13-17页 |
实验方法 | 第17-25页 |
1 慢病毒载体构建与鉴定 | 第17-19页 |
·PCR扩增目的基因DNA | 第17-18页 |
·双酶切载体 | 第18页 |
·目的基因与载体连接和重组载体鉴定 | 第18-19页 |
·慢病毒包装 | 第19页 |
2 STIM1/Orai1 在大鼠 PASMCs 中的表达 | 第19-22页 |
·分离和培养PASMCs | 第19-20页 |
·慢病毒感染PASMCs | 第20页 |
·Western Blot检测STIM1/Orai1蛋白的表达 | 第20-21页 |
·细胞内钙测定 | 第21-22页 |
3 STIM1/Orai1蛋白相互作用 | 第22-25页 |
·免疫荧光共定位 | 第22-23页 |
·免疫共沉淀 | 第23-25页 |
实验结果 | 第25-33页 |
1 慢病毒载体构建和鉴定 | 第25-26页 |
·PCR扩增基因DNA | 第25页 |
·重组载体酶切鉴定 | 第25-26页 |
·重组载体测序 | 第26页 |
2 STIM1/Orai1在大鼠PASMCs中的表达 | 第26-30页 |
·病毒载体在PASMCs中的感染 | 第26-27页 |
·病毒载体STIM1/Orai1蛋白在PASMCs中的表达 | 第27-29页 |
·钙荧光测定 | 第29-30页 |
3 大鼠PASMCs中STIM1/Orai1的相互关系 | 第30-33页 |
·STIM1/Orai1在PASMCs的定位 | 第30-31页 |
·STIM1/Orai1相互结合作用 | 第31-33页 |
讨论 | 第33-37页 |
结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
附录 | 第43-45页 |
综述 | 第45-54页 |
参考文献 | 第50-54页 |