| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 第—部分 HBV precore蛋白及其剪切体调控细胞凋亡及p53稳定性的分子机制研究 | 第15-92页 |
| 第—章 乙型肝炎病毒与肝细胞疾病 | 第15-30页 |
| ·HBV的发现与分类 | 第15页 |
| ·HBV的分子生物学概述 | 第15-18页 |
| ·HBV的形态结构与理化性质 | 第15-16页 |
| ·HBV的基因组 | 第16-17页 |
| ·HBV的抗原成分 | 第17-18页 |
| ·乙肝病毒的转录 | 第18-20页 |
| ·乙肝病毒的转录产物 | 第18-19页 |
| ·乙肝病毒的转录调节 | 第19-20页 |
| ·HBV的复制 | 第20-21页 |
| ·前基因组RNA的合成 | 第20页 |
| ·负链DNA合成 | 第20页 |
| ·正链DNA的合成 | 第20-21页 |
| ·HBV编码蛋白的结构和功能 | 第21-25页 |
| ·核心蛋白和e抗原 | 第21-22页 |
| ·聚合酶蛋白 | 第22页 |
| ·包膜蛋白 | 第22-24页 |
| ·X蛋白 | 第24-25页 |
| ·慢性HBV感染的自然史 | 第25-26页 |
| ·HBV相关的肝细胞癌 | 第26-30页 |
| ·慢性炎症与肝硬化 | 第26-27页 |
| ·HBV DNA整合进宿主基因组 | 第27页 |
| ·HBV编码蛋白在肝癌发生中的作用 | 第27-29页 |
| ·HBV复制与肝癌的关系 | 第29-30页 |
| 第二章 p53蛋白 | 第30-42页 |
| ·p53蛋白的生物学特性 | 第30-32页 |
| ·p53蛋白结构 | 第30-31页 |
| ·p53翻译后修饰 | 第31页 |
| ·p53基因功能 | 第31-32页 |
| ·TP53基因网络调控 | 第32-36页 |
| ·TP53基因网络的激活 | 第32-34页 |
| ·p53稳定性调控 | 第34-35页 |
| ·p53在细胞内的活性调控 | 第35-36页 |
| ·Numb对p53通路的调控 | 第36-42页 |
| ·Numb的分子生物学特性 | 第37页 |
| ·Numb蛋白结构与功能 | 第37-39页 |
| ·Numb以及其细胞不对称分裂对癌症的影响 | 第39页 |
| ·Numb对发育信号通路的影响 | 第39-40页 |
| ·Numb调控p53蛋白稳定性 | 第40-42页 |
| 第三章 实验材料与方法 | 第42-68页 |
| ·实验材料 | 第42-47页 |
| ·质粒与菌种 | 第42页 |
| ·细胞系 | 第42页 |
| ·相关溶液与培养基配制 | 第42-46页 |
| ·试剂与抗体 | 第46页 |
| ·工具酶与试剂盒 | 第46页 |
| ·化学药品 | 第46页 |
| ·实验仪器 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-68页 |
| ·引物设计 | 第47-51页 |
| ·质粒构建 | 第51-56页 |
| ·Inoue法制备超级感受态DH5 α | 第56-57页 |
| ·酵母质粒小量转化 | 第57页 |
| ·酵母菌的人类脾脏cDNA文库转化 | 第57-58页 |
| ·哺乳动物细胞传代培养 | 第58页 |
| ·细胞冻存 | 第58页 |
| ·细胞复苏 | 第58-59页 |
| ·转染 | 第59-60页 |
| ·荧光素酶检测 | 第60页 |
| ·细胞内蛋白表达水平检测 | 第60-62页 |
| ·细胞内目的蛋白mRNA水平检测 | 第62-63页 |
| ·蛋白免疫共沉淀 | 第63-64页 |
| ·细胞内p53泛素化检测 | 第64页 |
| ·GST precore蛋白与GST p53蛋白纯化 | 第64-65页 |
| ·免疫荧光 | 第65-66页 |
| ·细胞增殖与流式检测细胞凋亡 | 第66页 |
| ·慢病毒载体构建稳定表达precore,core,P22,E的HepG2稳定细胞系 | 第66-68页 |
| 第四章 实验结果与讨论 | 第68-92页 |
| ·酵母双杂交系统研究HBV precore与Numb相互作用 | 第68-70页 |
| ·在晡孰动物细胞中研究precore蛋白与Numb蛋白相互作用 | 第70-72页 |
| ·precore蛋白抑制p53的转录活性 | 第72-77页 |
| ·precore蛋白影响Numb与p53-MDM2复合体的相互作用 | 第77-80页 |
| ·precore蛋白降低p53的稳定性 | 第80-82页 |
| ·precore通过Numb促进MDM2对p53的泛素化 | 第82-85页 |
| ·precore蛋白促进细胞生长 | 第85-87页 |
| ·precore蛋白抑制细胞凋亡 | 第87-89页 |
| ·讨论 | 第89-92页 |
| 第二部分 SARS冠状病毒核衣壳蛋白抑制RNA干扰的功能研究 | 第92-120页 |
| 第五章 研究背景 | 第92-108页 |
| ·冠状病毒概述 | 第92-100页 |
| ·冠状病毒的分类 | 第92-93页 |
| ·冠状病毒的研究历史 | 第93-94页 |
| ·冠状病毒基因组结构 | 第94-95页 |
| ·冠状病毒的生活周期 | 第95-96页 |
| ·冠状病毒的复制与转录 | 第96-97页 |
| ·冠状病毒编码的N蛋白 | 第97-100页 |
| ·宿主RNAi天然免疫与病毒RNAi抑制因子 | 第100-108页 |
| ·小RNA介导的抗病毒免疫 | 第100-103页 |
| ·病毒编码的RNA沉默抑制因子(Viral suppressors of RNAsilencing,VSR) | 第103-108页 |
| 第六章 实验材料与方法 | 第108-110页 |
| ·实验材料 | 第108-109页 |
| ·质粒菌种与细胞系 | 第108页 |
| ·试剂与抗体 | 第108-109页 |
| ·实验方法 | 第109-110页 |
| ·siRNA转染 | 第109页 |
| ·其他 | 第109-110页 |
| 第七章 实验结果与讨论 | 第110-118页 |
| ·SARS N蛋白抑制shRNA介导的RNA沉默 | 第110-112页 |
| ·SARS N蛋白回复shRNA沉默的eGFP mRNA水平 | 第112-113页 |
| ·SARS N蛋白对shRNA介导的eGFP沉默的抑制呈剂量依赖性 | 第113-115页 |
| ·SARS N蛋白抑制siRNA介导的eGFP沉默 | 第115-116页 |
| ·讨论 | 第116-118页 |
| 第八章 研究总结与展望 | 第118-120页 |
| ·研究总结 | 第118-119页 |
| ·研究意义与展望 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-135页 |
| 攻博期间发表与待发表论文目录 | 第135-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
