摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
引言 | 第11-16页 |
1 美洲蟑螂 | 第11页 |
·美洲蟑螂的分布及危害 | 第11页 |
·美洲蟑螂的分子研究进展 | 第11页 |
2 乙酰胆碱酯酶 | 第11-14页 |
·乙酰胆碱酯酶的来源 | 第11-12页 |
·乙酰胆碱酯酶的纯化 | 第12-13页 |
·乙酰胆碱酯酶的抑制动力学 | 第13-14页 |
3 农药残留检测方法 | 第14-16页 |
·常见农残速测方法 | 第14-15页 |
·酶抑制法改进 | 第15-16页 |
4 本研究课题目的和意义 | 第16页 |
第一章 美洲蟑螂 AChE 的酶活反应条件的优化 | 第16-24页 |
前言 | 第16-17页 |
1 实验材料 | 第17-18页 |
·实验虫源 | 第17页 |
·主要实验试剂 | 第17页 |
·主要实验仪器 | 第17-18页 |
2 实验方法 | 第18-20页 |
·AChE 粗酶液的提取制备 | 第18页 |
·蛋白质含量的测定 | 第18页 |
·美洲蟑螂 AChE 的酶活测定 | 第18-19页 |
·美洲蟑螂 AChE 酶活反应条件的优化 | 第19-20页 |
·单因素实验 | 第19页 |
·正交实验 | 第19-20页 |
3 结果与分析 | 第20-22页 |
·单因素试验结果与分析 | 第20-22页 |
·pH 对酶比活力的影响 | 第20页 |
·温度对酶比活力的影响 | 第20-21页 |
·时间对酶活的影响 | 第21-22页 |
·正交实验结果与分析 | 第22页 |
4 本章小结 | 第22-24页 |
第二章 美洲蟑螂 AChE 的分离纯化及特性研究 | 第24-36页 |
前言 | 第24页 |
1 实验材料 | 第24-26页 |
·实验虫源 | 第24页 |
·主要实验试剂 | 第24-25页 |
·主要实验仪器 | 第25页 |
·主要试剂配制方法 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-30页 |
·盐酸普鲁卡因胺亲和层析柱的制备 | 第26页 |
·美洲蟑螂 AChE 的纯化 | 第26-27页 |
·AChE 粗酶液的制备 | 第26页 |
·盐酸普鲁卡因胺亲和层析柱的平衡 | 第26页 |
·样品的过柱与洗涤 | 第26-27页 |
·AChE 的洗脱 | 第27页 |
·亲和层析柱的清洗 | 第27页 |
·透析 | 第27页 |
·浓缩 | 第27页 |
·纯化酶蛋白质含量的测定 | 第27-28页 |
·美洲蟑螂 AChE 纯化酶活测定 | 第28页 |
·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE 电泳) | 第28-29页 |
·动力学参数 Km的测定 | 第29-30页 |
·底物特异性测定 | 第30页 |
3 结果与分析 | 第30-35页 |
·亲和层析纯化结果与分析 | 第30-33页 |
·SDS-PAGE 电泳图谱分析 | 第33页 |
·动力学特性分析 | 第33-34页 |
·底物特异性分析 | 第34-35页 |
4 本章小结 | 第35-36页 |
第三章 美洲蟑螂 AChE 对农药敏感性研究 | 第36-48页 |
前言 | 第36页 |
1 实验材料 | 第36-38页 |
·实验虫源 | 第36页 |
·主要实验试剂 | 第36-37页 |
·主要实验仪器 | 第37页 |
·主要试剂配制方法 | 第37-38页 |
2 实验方法 | 第38-39页 |
·酶液的制备 | 第38页 |
·AChE 对农药敏感性(IC50)测定 | 第38-39页 |
3 结果与分析 | 第39-46页 |
·两种纯酶对 8 种有机磷农药敏感性测定 | 第39-41页 |
·两种纯酶对 8 种有机磷农药的抑制能力 | 第39-40页 |
·两种纯酶对 8 种有机磷农药敏感性 | 第40-41页 |
·两种纯酶对 8 种氨基甲酸酯类农药敏感性测定 | 第41-45页 |
·两种纯酶对 8 种氨基甲酸酯类农药的抑制能力 | 第41-44页 |
·两种纯酶对 8 种氨基甲酸酯类农药敏感性 | 第44-45页 |
·美洲蟑螂 AChE 粗酶与纯化酶敏感性比较 | 第45-46页 |
4 本章小结 | 第46-48页 |
结论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
攻读硕士学位期间发表论文及科研成果 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-57页 |