摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 引言 | 第11-34页 |
第一节 内质网 | 第11-20页 |
·内质网的形态结构 | 第11-16页 |
·细胞周期中的内质网 | 第16-17页 |
·内质网的动态变化 | 第17-20页 |
第二节 生物膜融合 | 第20-26页 |
·生物膜融合的机制 | 第20-22页 |
·病毒与宿主细胞的膜融合 | 第22-23页 |
·线粒体膜融合 | 第23-24页 |
·突触小泡的膜融合 | 第24-26页 |
第三节 Dynamin GTP酶超家族 | 第26-31页 |
·Dynamin超家族分类 | 第26-27页 |
·Dynamin超家族成员的生物化学性质 | 第27-29页 |
·Dynamin超家族成员的主要功能 | 第29-31页 |
第四节 介导内质网膜融合的dynamin超家族成员 | 第31-33页 |
·Atlastin | 第31-32页 |
·Sey1 | 第32页 |
·RHD3 | 第32-33页 |
第五节 本论文研究意义 | 第33-34页 |
第二章 实验材料、原理及方法 | 第34-49页 |
第一节 质粒的构建 | 第34页 |
第二节 蛋白的表达与纯化 | 第34-38页 |
第三节 蛋白结晶 | 第38-39页 |
第四节 数据收集与结构解析 | 第39页 |
第五节 胰蛋白酶保护实验 | 第39-40页 |
第六节 等温滴定量热法 | 第40页 |
第七节 分析性超离心 | 第40-41页 |
第八节 GTP酶活性测量 | 第41页 |
第九节 化学交联实验 | 第41-42页 |
第十节 脂蛋白体的制作 | 第42页 |
第十一节 重组效率的检测 | 第42-43页 |
第十二节 Lipid-mixing实验 | 第43-44页 |
第十三节 Dithionite淬灭实验 | 第44页 |
第十四节 Content-mixing实验 | 第44-45页 |
第十五节 动态光散射 | 第45-46页 |
第十六节 Doxyl淬灭实验 | 第46页 |
第十七节 圆二色谱 | 第46-47页 |
第十八节 Calcein-leakage实验 | 第47页 |
第十九节 荧光显微镜观察酵母 | 第47页 |
第二十节 Membrane-association实验 | 第47-48页 |
第二十一节 蔗糖密度梯度离心 | 第48页 |
第二十二节 细胞培养、转染和免疫共沉淀 | 第48-49页 |
第三章 实验结果 | 第49-88页 |
第一节 ATL的N端结构域的功能分析 | 第49-65页 |
·人类ATL1胞浆段晶体结构 | 第49-56页 |
·二聚体的形成与核苷酸的结合 | 第56页 |
·磷酸释放引起的构象变化 | 第56-63页 |
·在体外融合实验中检测ATL突变 | 第63-64页 |
·ATL1的疾病突变 | 第64-65页 |
第二节 分析ATL的C端尾巴在融合中的作用 | 第65-73页 |
第三节 分析ATL的跨膜区在融合中的作用 | 第73-78页 |
第四节 分析ATL如何介导膜泡拴连 | 第78-88页 |
第四章 结论 | 第88-93页 |
参考文献 | 第93-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第103页 |