| 中文摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 参考文献 | 第16-18页 |
| 第一部分 EGFP-EGF1蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸—聚羟基乙酸纳米粒的构建和表征 | 第18-38页 |
| 1 仪器和材料 | 第19-20页 |
| ·仪器 | 第19页 |
| ·材料和试剂 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-27页 |
| ·EGFP-EGF1融合蛋白的制备及纯化 | 第20-22页 |
| ·PEG化PLGA纳米粒(NP)的制备 | 第22-23页 |
| ·EGFP-EGF1蛋白的巯基化及巯基化程度鉴定 | 第23-24页 |
| ·EGFP-EGF1结合的PLGA纳米粒(EGF1-EGFP-NP)的制备 | 第24-25页 |
| ·EGF1-EGFP-NP的表征 | 第25-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-33页 |
| ·EGFP-EGF1融合蛋白的制备与鉴定 | 第27-29页 |
| ·EGF1-EGFP-NP制备条件的筛选 | 第29-31页 |
| ·NP和EGF1-EGFP-NP的表征 | 第31-32页 |
| ·EGF1-EGFP-NP表面共价连接EGFP-EGF1的鉴定 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| ·EGFP-EGF1融合蛋白的纯化、鉴定 | 第33-34页 |
| ·聚合物材料的选择 | 第34页 |
| ·EGFP-EGF1巯基化条件的选择 | 第34页 |
| ·EGF1-EGFP-NP制备条件的优化 | 第34-35页 |
| ·EGF1-EGFP-NP的Zeta电位 | 第35页 |
| 5 小结 | 第35页 |
| 参考文献 | 第35-38页 |
| 第二部分 EGFP-EGF1蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸—聚羟基乙酸纳米粒组织因子靶向性及毒性的体外评价 | 第38-61页 |
| 1 仪器和材料 | 第39-41页 |
| ·仪器 | 第39页 |
| ·试剂和材料 | 第39-40页 |
| ·实验动物 | 第40页 |
| ·试剂的配制 | 第40-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-47页 |
| ·大鼠BCEC的培养、鉴定与体外表达TF模型的制备与鉴定 | 第41-43页 |
| ·载6-香豆素的NP和EGF1-EGFP-NP的制备与表征 | 第43页 |
| ·6-香豆素体外HPLC分析方法的建立与评价 | 第43-45页 |
| ·6-香豆素载药量和包封率测定 | 第45-46页 |
| ·6-香豆素的体外泄漏试验 | 第46页 |
| ·大鼠BCEC对载6-香豆素NP和EGF1-EGFP-NP的摄取实验 | 第46-47页 |
| ·EGF1-EGFP-NP的体外毒性考察 | 第47页 |
| 3 实验结果 | 第47-56页 |
| ·大鼠BCEC的培养、鉴定与体外表达TF模型的制备与鉴定 | 第47-49页 |
| ·载6-香豆素的EGF1-EGFP-NP和NP的粒径与Zeta电位 | 第49-50页 |
| ·6-香豆素体外HPLC分析方法的建立与评价 | 第50-52页 |
| ·载药量和包封率测定 | 第52页 |
| ·6-香豆素的体外泄漏测定 | 第52-53页 |
| ·大鼠BCEC对载6-香豆素NP和EGF1-EGFP-NP的摄取 | 第53-55页 |
| ·EGF1-EGFP-NP的体外毒性考察 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| ·大鼠脑毛细血管内皮细胞(BCEC)的原代培养 | 第56-57页 |
| ·BCEC对载6-香豆素的NP和EGF1-EGFP-NP的摄取 | 第57页 |
| ·EGF1-EGFP-NP对BCEC的细胞毒性 | 第57-58页 |
| 5 小结 | 第58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 第三部分 EGFP-EGF1蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸—聚羟基乙酸纳米粒组织因子靶向性及毒性的体内评价 | 第61-100页 |
| 1 仪器和试剂 | 第62-63页 |
| ·仪器 | 第62页 |
| ·材料和试剂 | 第62-63页 |
| ·实验动物 | 第63页 |
| 2 实验方法 | 第63-70页 |
| ·光化学法大鼠脑血栓模型的复制与鉴定 | 第63-64页 |
| ·载6-香豆素纳米粒在大鼠体内药动学及组织分布HPLC研究 | 第64-67页 |
| ·载Dir的NP和EGF1-EGFP-NP的制备与表征 | 第67-68页 |
| ·载Dir的NP与EGF1-EGFP-NP在大鼠体内组织分布成像实验 | 第68-69页 |
| ·载Fe_3O_4的EGF1-EGFP-NP在大鼠脑组织中的微观分布实验 | 第69-70页 |
| ·EGF1-EGFP-NP的体内毒性实验 | 第70页 |
| 3 实验结果 | 第70-94页 |
| ·光化学法大鼠脑血栓模型的复制与鉴定 | 第70-71页 |
| ·纳米粒在大鼠血及各组织中的药动学 | 第71-77页 |
| ·载Dir的EGF1-EGFP-NP的表征和Dir的体外释放 | 第77-79页 |
| ·载Dir的NP与EGF1-EGFP-NP在大鼠体内组织分布成像实验 | 第79-83页 |
| ·载Fe_3O_4的EGF1-EGFP-NP在大鼠脑组织中的微观分布实验 | 第83-84页 |
| ·EGF1-EGFP-NP的体内毒性实验 | 第84-94页 |
| 4 讨论 | 第94-96页 |
| ·EGF1-EGFP-NP的脑血栓靶向递药特性 | 第94-96页 |
| ·EGF1-EGFP-NP在其他组织的分布 | 第96页 |
| 5 小结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-100页 |
| 第四部分 EGFP-EGF1蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸—聚羟基乙酸纳米粒介导NF-KB DECOY ODNS靶向干预脑血栓形成 | 第100-122页 |
| 1 仪器和试剂 | 第101-103页 |
| ·仪器 | 第101页 |
| ·材料和试剂 | 第101-103页 |
| ·实验动物 | 第103页 |
| 2 实验方法 | 第103-107页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs基因治疗系统的制备和表征 | 第103-104页 |
| ·EGF1-EGFP-NP介导ODNs传递的细胞内示踪 | 第104-105页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs对TNF-α诱导BCEC表达TF mRNA水平的干预 | 第105页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs对TNF-α诱导BCEC TF蛋白表达的影响 | 第105-106页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs的体外毒性实验 | 第106页 |
| ·EGFl-EGFP-NP-ODNs对脑血栓的靶向干预 | 第106-107页 |
| 3 实验结果 | 第107-118页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs的表征 | 第107-110页 |
| ·载6-香豆素的EGF1-EGFP-NP-CY3-ODNs的细胞内示踪 | 第110-111页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs对TNF-α诱导BCEC表达TF mRNA水平的干预 | 第111-112页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs对TNF-α诱导BCEC表达TF蛋白水平的干预 | 第112-113页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs的体外毒性实验 | 第113-114页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs对光化学法大鼠脑血栓的靶向干预 | 第114-118页 |
| 4 讨论 | 第118-120页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs干预TF表达的体外实验 | 第118-119页 |
| ·EGF1-EGFP-NP-ODNs对光化学法大鼠脑血栓的靶向干预 | 第119-120页 |
| 5 小结 | 第120页 |
| 参考文献 | 第120-122页 |
| 总结 | 第122-124页 |
| 课题的创新性 | 第124-125页 |
| 综述 | 第125-131页 |
| 参考文献 | 第127-131页 |
| 英文缩略词表 | 第131-133页 |
| 附录一 在读期间参加的科研项目和会议报告 | 第133-134页 |
| 附录二 在读期间已发表和拟投稿论文及专利情况 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135-136页 |
