摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
1 前言 | 第13-31页 |
·栉孔扇贝养殖现状 | 第13-15页 |
·栉孔扇贝养殖地位 | 第13-14页 |
·栉孔扇贝养殖病害现状 | 第14-15页 |
·贝类免疫系统概述 | 第15-26页 |
·细胞免疫 | 第15-20页 |
·体液免疫 | 第20-26页 |
·凝集素的研究进展 | 第26-30页 |
·凝集素的定义 | 第26页 |
·凝集素的分类与结构 | 第26-28页 |
·凝集素的分布和功能 | 第28-29页 |
·凝集素的分离纯化 | 第29-30页 |
·本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
2 栉孔扇贝血淋巴以及其它组织凝集活性分析 | 第31-45页 |
·实验材料 | 第31-32页 |
·实验动物和菌株 | 第31-32页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-36页 |
·血淋巴以及其它组织蛋白粗提液的制备 | 第32-33页 |
·血淋巴以及其它组织蛋白粗提液的凝血活性分析 | 第33页 |
·CFH、血细胞和不同组织蛋白粗提液细菌凝集活性 | 第33-35页 |
·EDTA 对血淋巴以及其它组织蛋白粗提液凝集活性的影响 | 第35页 |
·糖溶液对血淋巴以及其它组织蛋白粗提液凝集活性的影响 | 第35-36页 |
·结果 | 第36-38页 |
·血淋巴以及其它组织蛋白粗提液的凝血活性 | 第36页 |
·血淋巴以及其它组织蛋白粗提液的细菌凝集活性 | 第36-37页 |
·EDTA 对血淋巴以及其它组织蛋白粗提液凝集活性的影响 | 第37-38页 |
·糖溶液对血淋巴以及其它组织蛋白粗提液凝集活性的影响 | 第38页 |
·讨论 | 第38-44页 |
·血淋巴以及其它组织蛋白粗提液凝集活性分析 | 第38-39页 |
·EDTA、糖溶液对凝集活性的影响 | 第39-44页 |
小结 | 第44-45页 |
3 甘露聚糖结合凝集素的分离纯化及特性分析 | 第45-53页 |
·实验材料 | 第46页 |
·实验动物和菌种 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-50页 |
·栉孔扇贝血淋巴上清的制备 | 第46页 |
·栉孔扇贝血淋巴上清细菌凝集活性的分析 | 第46-47页 |
·硫酸铵盐析初步纯化 | 第47页 |
·甘露聚糖亲和层析纯化 | 第47-48页 |
·甘露聚糖结合凝集素的特性分析 | 第48页 |
·蛋白纯度鉴定及相对分子量分析 | 第48-50页 |
·实验结果 | 第50-51页 |
·分级纯化栉孔扇贝血淋巴凝集活性测定 | 第50页 |
·甘露聚糖结合凝集素的纯度鉴定及分子量分析 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
小结 | 第52-53页 |
4 抗 C-型凝集素 CfLec290 单克隆抗体的制备 | 第53-70页 |
·实验材料 | 第53-55页 |
·实验动物及细胞株 | 第53-54页 |
·主要实验试剂 | 第54页 |
·主要仪器 | 第54-55页 |
·实验方法 | 第55-63页 |
·栉孔扇贝 C-型凝集素 Cflec290 成熟肽段基因克隆 | 第55-57页 |
·重组表达载体 pET32a-Cflec290 的构建 | 第57-58页 |
·重组蛋白的表达、分离纯化 | 第58-59页 |
·重组蛋白 rCfLec290 凝集活性分析 | 第59页 |
·免疫实验动物 | 第59-60页 |
·骨髓瘤细胞的复苏及培养 | 第60页 |
·抗重组蛋白 rCfLec290 多抗的收集 | 第60页 |
·细胞融合 | 第60-61页 |
·ELISA 筛选抗 rCfLec290 阳性杂交瘤细胞 | 第61-62页 |
·有限稀释法克隆阳性杂交瘤细胞 | 第62页 |
·免疫印迹检测(Western blotting) | 第62-63页 |
·实验结果 | 第63-67页 |
·栉孔扇贝 Cflec290 基因克隆、蛋白重组表达以及纯化 | 第63-64页 |
·重组蛋白 rCfLec90 的凝集活性分析 | 第64-65页 |
·ELISA 筛选抗 rCfLec290 单克隆抗体 | 第65-66页 |
·Western Blotting 检测 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-69页 |
·栉孔扇贝 C-型凝集素 CfLec290 的重组表达 | 第67-68页 |
·抗栉孔扇贝 C-型凝集素 rCfLec290 的单抗的制备 | 第68-69页 |
小结 | 第69-70页 |
5 栉孔扇贝 C-凝集素 Cflec290 的组织分布特性 | 第70-86页 |
·实验材料 | 第70-71页 |
·实验动物及菌株 | 第70页 |
·主要实验试剂 | 第70-71页 |
·主要仪器 | 第71页 |
·实验方法 | 第71-78页 |
·半定量 RT-PCR 检测不同组织 Cflec290 mRNA 的表达 | 第71-72页 |
·原位杂交检测不同组织 Cflec290 mRNA 的表达 | 第72-77页 |
·单抗检测 CfLec290 蛋白在不同组织中的分布 | 第77-78页 |
·实验结果 | 第78-82页 |
·半定量 RT-PCR 检测不同组织 Cflec290 mRNA 的表达 | 第78-79页 |
·原位杂交检测不同组织 Cflec290 mRNA 的表达 | 第79页 |
·Western blotting 检测 | 第79-81页 |
·间接免疫荧光检测 | 第81-82页 |
·讨论 | 第82-85页 |
小结 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
个人简历 | 第100页 |
发表的学术论文 | 第100-101页 |