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栉孔扇贝(Chlamys farreri)组织凝集活性分析及一种C-型凝集素单克隆抗体的研制和特性研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
1 前言第13-31页
   ·栉孔扇贝养殖现状第13-15页
     ·栉孔扇贝养殖地位第13-14页
     ·栉孔扇贝养殖病害现状第14-15页
   ·贝类免疫系统概述第15-26页
     ·细胞免疫第15-20页
     ·体液免疫第20-26页
   ·凝集素的研究进展第26-30页
     ·凝集素的定义第26页
     ·凝集素的分类与结构第26-28页
     ·凝集素的分布和功能第28-29页
     ·凝集素的分离纯化第29-30页
   ·本研究的目的和意义第30-31页
2 栉孔扇贝血淋巴以及其它组织凝集活性分析第31-45页
   ·实验材料第31-32页
     ·实验动物和菌株第31-32页
     ·主要试剂第32页
     ·主要仪器第32页
   ·实验方法第32-36页
     ·血淋巴以及其它组织蛋白粗提液的制备第32-33页
     ·血淋巴以及其它组织蛋白粗提液的凝血活性分析第33页
     ·CFH、血细胞和不同组织蛋白粗提液细菌凝集活性第33-35页
     ·EDTA 对血淋巴以及其它组织蛋白粗提液凝集活性的影响第35页
     ·糖溶液对血淋巴以及其它组织蛋白粗提液凝集活性的影响第35-36页
   ·结果第36-38页
     ·血淋巴以及其它组织蛋白粗提液的凝血活性第36页
     ·血淋巴以及其它组织蛋白粗提液的细菌凝集活性第36-37页
     ·EDTA 对血淋巴以及其它组织蛋白粗提液凝集活性的影响第37-38页
     ·糖溶液对血淋巴以及其它组织蛋白粗提液凝集活性的影响第38页
   ·讨论第38-44页
     ·血淋巴以及其它组织蛋白粗提液凝集活性分析第38-39页
     ·EDTA、糖溶液对凝集活性的影响第39-44页
 小结第44-45页
3 甘露聚糖结合凝集素的分离纯化及特性分析第45-53页
   ·实验材料第46页
     ·实验动物和菌种第46页
     ·主要试剂第46页
     ·主要仪器第46页
   ·实验方法第46-50页
     ·栉孔扇贝血淋巴上清的制备第46页
     ·栉孔扇贝血淋巴上清细菌凝集活性的分析第46-47页
     ·硫酸铵盐析初步纯化第47页
     ·甘露聚糖亲和层析纯化第47-48页
     ·甘露聚糖结合凝集素的特性分析第48页
     ·蛋白纯度鉴定及相对分子量分析第48-50页
   ·实验结果第50-51页
     ·分级纯化栉孔扇贝血淋巴凝集活性测定第50页
     ·甘露聚糖结合凝集素的纯度鉴定及分子量分析第50-51页
   ·讨论第51-52页
 小结第52-53页
4 抗 C-型凝集素 CfLec290 单克隆抗体的制备第53-70页
   ·实验材料第53-55页
     ·实验动物及细胞株第53-54页
     ·主要实验试剂第54页
     ·主要仪器第54-55页
   ·实验方法第55-63页
     ·栉孔扇贝 C-型凝集素 Cflec290 成熟肽段基因克隆第55-57页
     ·重组表达载体 pET32a-Cflec290 的构建第57-58页
     ·重组蛋白的表达、分离纯化第58-59页
     ·重组蛋白 rCfLec290 凝集活性分析第59页
     ·免疫实验动物第59-60页
     ·骨髓瘤细胞的复苏及培养第60页
     ·抗重组蛋白 rCfLec290 多抗的收集第60页
     ·细胞融合第60-61页
     ·ELISA 筛选抗 rCfLec290 阳性杂交瘤细胞第61-62页
     ·有限稀释法克隆阳性杂交瘤细胞第62页
     ·免疫印迹检测(Western blotting)第62-63页
   ·实验结果第63-67页
     ·栉孔扇贝 Cflec290 基因克隆、蛋白重组表达以及纯化第63-64页
     ·重组蛋白 rCfLec90 的凝集活性分析第64-65页
     ·ELISA 筛选抗 rCfLec290 单克隆抗体第65-66页
     ·Western Blotting 检测第66-67页
   ·讨论第67-69页
     ·栉孔扇贝 C-型凝集素 CfLec290 的重组表达第67-68页
     ·抗栉孔扇贝 C-型凝集素 rCfLec290 的单抗的制备第68-69页
 小结第69-70页
5 栉孔扇贝 C-凝集素 Cflec290 的组织分布特性第70-86页
   ·实验材料第70-71页
     ·实验动物及菌株第70页
     ·主要实验试剂第70-71页
     ·主要仪器第71页
   ·实验方法第71-78页
     ·半定量 RT-PCR 检测不同组织 Cflec290 mRNA 的表达第71-72页
     ·原位杂交检测不同组织 Cflec290 mRNA 的表达第72-77页
     ·单抗检测 CfLec290 蛋白在不同组织中的分布第77-78页
   ·实验结果第78-82页
     ·半定量 RT-PCR 检测不同组织 Cflec290 mRNA 的表达第78-79页
     ·原位杂交检测不同组织 Cflec290 mRNA 的表达第79页
     ·Western blotting 检测第79-81页
     ·间接免疫荧光检测第81-82页
   ·讨论第82-85页
 小结第85-86页
参考文献第86-99页
致谢第99-100页
个人简历第100页
发表的学术论文第100-101页

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