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端粒酶逆转录酶基因hTERT在膀胱癌组织中的表达及端粒酶反义基因治疗逆转T24膀胱癌细胞恶性表型的研究

缩略语表第1-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-14页
前言第14-16页
文献回顾第16-34页
第一部分 端粒酶逆转录酶基因hTERT在膀胱癌组织中的表达第34-39页
 一、 材料第34-35页
  (一) 病历标本第34页
  (二) 主要试剂第34-35页
 二、 方法第35页
 三、 结果第35-37页
  (一) hTERT蛋白表达的定位与分布第35-36页
  (二) hTERT蛋白表达与TCC生物学行为的关系第36-37页
 四、 讨论第37-39页
第二部分 端粒酶反义寡核苷酸(ASODN-t)对T24膀胱癌细胞的作用第39-48页
 一、 主要材料第39-40页
  (一) 膀胱癌细胞株第39页
  (二) 主要试剂第39-40页
  (三) 主要仪器第40页
 二、 实验方法第40-41页
  (一) 细胞培养第40页
  (二) 实验分组第40页
  (三) 细胞形态学观察第40-41页
  (四) MTT法测定细胞生长曲线第41页
  (五) 透射电镜观察第41页
  (六) 流式细胞仪(FCM)检测第41页
  (七) 统计学处理第41页
 三、 实验结果第41-45页
  (一) 光镜观察结果第41-42页
  (二) 透射电镜观察结果第42页
  (三) MTT测定T24膀胱癌细胞生长变化第42-43页
  (四) 流式细胞仪(FCM)测定DNA含量及细胞周期变化第43-45页
 四、 讨论第45-48页
  (一) 端粒酶反义寡核苷酸(ASODN-t)抑制T24膀胱癌细胞增殖第46页
  (二) 端粒酶反义寡核苷酸(ASODN-t)诱导T24膀胱癌细胞凋亡第46-47页
  (三) 端粒酶反义寡核苷酸(ASODN-t)影响T24膀胱癌细胞周期第47-48页
第三部分 端粒酶反义RNA转染逆转膀胱癌T24细胞恶性表型的研究第48-59页
 一、 主要材料第48-50页
  (一) 膀胱癌细胞株第48页
  (二) 质粒与菌种第48-49页
  (三) 主要试剂第49页
  (四) 主要仪器第49-50页
  (五) 实验动物第50页
 二、 实验方法第50-52页
  (一) 质粒DNA转化与提取第50页
  (二) 细胞分组转染和筛选第50页
  (三) 转染前后T24细胞端粒酶活性检测第50-51页
  (四) 转染前后T24细胞恶性表型的变化第51页
  (五) 转染前后T24细胞周期FCM检测第51页
  (六) 裸鼠移植瘤实验第51页
  (七) 统计学处理第51-52页
 三、 实验结果第52-56页
  (一) 反义RNA质粒的酶切鉴定第52页
  (二) 转染后T24细胞抗性克隆筛选第52页
  (三) 转染后T24细胞的端粒酶活性变化第52页
  (四) 转染后T24细胞的生长曲线变化第52-53页
  (五) 转染后T24细胞的形态学变化第53页
  (六) 转染后T24细胞的超微结构变化第53-54页
  (七) 转染后T24细胞的细胞周期变化第54-55页
  (八) 裸鼠移植瘤实验第55-56页
 四、 讨论第56-59页
  (一) pBBS及pBBS-hTR载体的酶切鉴定第57页
  (二) 反义hTR抑制T24细胞端粒酶活性第57页
  (三) 反义hTR诱导T24细胞出现凋亡现象第57页
  (四) 反义hTR逆转膀胱癌T24细胞恶性表型第57-59页
小结第59-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-74页
附图第74-83页
发表论文第83页

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