摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 引言 | 第10-19页 |
1 植物与病原菌的互作 | 第10-11页 |
·植物的免疫系统 | 第10页 |
·引起植物免疫反应的PAMPs | 第10-11页 |
2 细菌鞭毛素与植物的互作 | 第11-14页 |
·细菌鞭毛的结构组成 | 第11页 |
·植物识别细菌鞭毛素的活性位点 | 第11-12页 |
·识别细菌鞭毛素的植物受体 | 第12-14页 |
3 鞭毛素诱导的植物防卫反应 | 第14-16页 |
·鞭毛素诱导的早期防卫反应 | 第14-15页 |
·鞭毛素诱导防卫基因的表达 | 第15-16页 |
4 燕麦嗜酸菌鞭毛素诱导的水稻防卫反应 | 第16-17页 |
5 研究目的和意义 | 第17-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-34页 |
1 实验材料 | 第19-21页 |
·供试菌株和植物 | 第19页 |
·主要仪器和试剂 | 第19页 |
·培养基和培养条件 | 第19-21页 |
2 实验方法 | 第21-34页 |
·燕麦嗜酸菌菌株诱导水稻免疫反应的测定 | 第21页 |
·水稻接种实验 | 第21页 |
·台酚蓝染色法检测水稻叶片细胞死亡 | 第21页 |
·DAB染色法检测水稻叶片H_2O_2的产生 | 第21页 |
·鞭毛素的基因克隆与生物信息学分析 | 第21-25页 |
·Aaa IPN1基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
·引物设计 | 第22-23页 |
·目的基因PCR扩增 | 第23-24页 |
·目的基因片段纯化回收 | 第24页 |
·PCR产物TA克隆 | 第24页 |
·E.coli感受态细胞的制备及转化 | 第24-25页 |
·重组质粒DNA提取 | 第25页 |
·Aaa IPN1鞭毛素蛋白生物信息学分析 | 第25页 |
·鞭毛素基因原核表达载体构建和目的蛋白纯化 | 第25-30页 |
·FliCaaa、FliCaaa-N和FliCaaa-C蛋白表达载体构建 | 第25-26页 |
·FliCaaa、FliCaaa-N和FliCaaa-C蛋白表达与纯化 | 第26-30页 |
·fliC2aaa、fliC2aaa-N和fliC2aaa-C基因克隆和原核表达载体构建 | 第30页 |
·FliC2aaa、FliC2aaa-N和FliC2aaa-C蛋白的诱导表达和纯化 | 第30页 |
·鞭毛素蛋白诱导水稻免疫反应的测定 | 第30-34页 |
·鞭毛素蛋白诱导水稻防卫基因的表达情况 | 第30-33页 |
·鞭毛素蛋白诱导水稻悬浮细胞ROS测定 | 第33页 |
·鞭毛素蛋白诱导水稻悬浮细胞介质碱性化测定 | 第33-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-52页 |
1 Aaa IPN1诱导水稻免疫反应的分析 | 第34-35页 |
·Aaa IPN1引起水稻细胞死亡检测 | 第34页 |
·Aaa IPN1引起水稻产生H_2O_2检测 | 第34-35页 |
2 Aaa IPN1鞭毛素基因的克隆和生物信息学分析 | 第35-40页 |
·目的基因fliCaaa和fliC2aaa的获得 | 第35-37页 |
·基因片段A1和A2克隆 | 第35页 |
·基因片段A1N、A1C和A2N克隆 | 第35-36页 |
·鞭毛素基因fliCaaa和fliC2aaa克隆 | 第36-37页 |
·鞭毛素FliCaaa和FliC2aaa生物信息学分析 | 第37-40页 |
3 FliCaaa蛋白及其不同结构域诱导水稻免疫反应的功能分析 | 第40-49页 |
·目的基因fliCaaa、fliCaaa-N和fliCaaa-C获得和表达质粒构建 | 第40-42页 |
·目的蛋白的诱导表达 | 第42-44页 |
·FliCaaa、FliCaaa-N和FliCaaa-C蛋白纯化和Western blot验证 | 第44-45页 |
·FliCaaa蛋白及其结构域对水稻叶组织细胞死亡的诱导作用 | 第45-46页 |
·FliCaaa蛋白及其结构域对水稻叶组织H_2O_2产生的诱导作用 | 第46页 |
·FliCaaa蛋白及其结构域对水稻防卫基因表达的诱导作用 | 第46-48页 |
·FliCaaa蛋白及其结构域对水稻悬浮细胞ROS的诱导作用 | 第48页 |
·FliCaaa蛋白及其结构域对水稻悬浮细胞介质碱性化的诱导作用 | 第48-49页 |
4 FliC2aaa蛋白及其不同结构域诱导水稻免疫反应的功能分析 | 第49-52页 |
·fliC2aaa、fliC2aaa-N和fliC2aaa-C基因克隆 | 第49页 |
·fliC2aaa、fliC2aaa-N和fliC2aaa-C基因表达载体的 | 第49-50页 |
·目的蛋白的诱导和纯化 | 第50-51页 |
·FliC2aaa蛋白及其结构域对水稻叶组织细胞死亡和H_2O_2产生的诱导作用 | 第51-52页 |
第四章 结论与讨论 | 第52-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
附录1 英文缩略表 | 第59-60页 |
附录2:蛋白表达纯化试剂配方 | 第60-61页 |
附表本研究中所用引物 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |